关于内含肽介导的蛋白连接的介绍
通过改变裂解条件以及对内含肽进行适当修饰，可以生物合成c端带有硫酯键或N端带有半光氨酸的蛋白质分子。两种蛋白质混合以后，硫酯键和半光氨酸利用“自然化学连接”(native chemical ligation)的原理进行自发的连接反应，在硫酯和半光氨酸之间形成肽键，从而将两种蛋白质连接起来。自然化学连接是从蛋白质半合成研究中发展起来的技术 ，其基本原理是，C端带有硫酯的合成肽与N端带有半光氨酸的合成肽或蛋白质混合后，硫酯和半光氨酸之间会发生高效的化学选择性反应，形成的硫酯键将两个蛋白质分子连接起来，随后的S -N的酰基重排将硫酯键转变为肽整个过程除了没有发生Asn的环化以外，与内含肽的作用机理基本一致。但是，自然化学连接法不能在细胞中表达C末端硫酯蛋白，而且固相合成的肽链长度也有限。......阅读全文
关于内含肽介导的蛋白连接的介绍
通过改变裂解条件以及对内含肽进行适当修饰，可以生物合成c端带有硫酯键或N端带有半光氨酸的蛋白质分子。两种蛋白质混合以后，硫酯键和半光氨酸利用“自然化学连接”(native chemical ligation)的原理进行自发的连接反应，在硫酯和半光氨酸之间形成肽键，从而将两种蛋白质连接起来。自然化
内含肽介导的蛋白连接
通过改变裂解条件以及对内含肽进行适当修饰，可以生物合成c端带有硫酯键或N端带有半光氨酸的蛋白质分子。两种蛋白质混合以后，硫酯键和半光氨酸利用“自然化学连接”(native chemical ligation)的原理进行自发的连接反应，在硫酯和半光氨酸之间形成肽键，从而将两种蛋白质连接起来。自然化学连
关于内含肽的应用介绍
内含肽序列加上C端外显肽的第一个氨基酸残基包含了蛋白剪接的全部信息，甚至可以介导非“原配”的外源蛋白质的剪接。内含肽与上游和下游的外显肽序列之间几乎没有同源性，所以，如果外源目的蛋白替换天然外显肽，内含肽仍然可以保持剪接活性。但是利用好这一特点对蛋白质人工剪接需要考虑一些影响因素：外源蛋白及剪接
关于内含肽的种类介绍
从内含肽的内部有无自导引归巢核酸内切酶结构域，可将内含肽分为2种类型。一种是全功能型内含肽(maxi—intein)，具有蛋白剪接活性和自导引核酸内切酶序列(homingendonuclease)；另一种是微型内含肽(mini—intein)，只有蛋白剪接活性。其中自导引归巢核酸内切酶结构域的缺
关于内含肽的结构介绍
被人们公认的标准内含肽的结构模体为：N端剪接区+中部归巢核酸内切酶区域+ C剪接区域 。两端剪接区参与蛋白质的剪接，中部区域参与蛋白质归巢过程，少数内含肽不含核酸内切酶区域。全功能型内含肽包括8个保守区或基序，一般由244～1650个氨基酸碱基组成，大部分在500个氨基酸残基左右。自导引归巢核酸
内含肽的应用介绍
内含肽序列加上C端外显肽的第一个氨基酸残基包含了蛋白剪接的全部信息，甚至可以介导非“原配”的外源蛋白质的剪接。内含肽与上游和下游的外显肽序列之间几乎没有同源性，所以，如果外源目的蛋白替换天然外显肽，内含肽仍然可以保持剪接活性。但是利用好这一特点对蛋白质人工剪接需要考虑一些影响因素：外源蛋白及剪接位点
关于内含肽的基本信息介绍
内含肽intein是位于宿主蛋白质中的一段插入序列，前缀in一取自inventing, 后缀tein一取自protein。与内含肽相对应的另一专用术语是外显肽。内含肽基因不是一个独立的基因， 必须插入于外显肽基因才能复制转录，可从前体蛋白中切除并将两侧外显肽连接起来成为成熟蛋白质。其对应的核苷酸
内含肽
内含肽intein是位于宿主蛋白质中的一段插入序列，前缀in一取自inventing, 后缀tein一取自protein。与内含肽相对应的另一专用术语是外显肽。内含肽基因不是一个独立的基因， 必须插入于外显肽基因才能复制转录，可从前体蛋白中切除并将两侧外显肽连接起来成为成熟蛋白质。其对应的核苷酸序列
内含肽的结构
被人们公认的标准内含肽的结构模体为：N端剪接区+中部归巢核酸内切酶区域+ C剪接区域 。两端剪接区参与蛋白质的剪接，中部区域参与蛋白质归巢过程，少数内含肽不含核酸内切酶区域。全功能型内含肽包括8个保守区或基序，一般由244～1650个氨基酸碱基组成，大部分在500个氨基酸残基左右。自导引归巢核酸内切
内含肽的种类
从内含肽的内部有无自导引归巢核酸内切酶结构域，可将内含肽分为2种类型。一种是全功能型内含肽(maxi—intein)，具有蛋白剪接活性和自导引核酸内切酶序列(homingendonuclease)；另一种是微型内含肽(mini—intein)，只有蛋白剪接活性。其中自导引归巢核酸内切酶结构域的缺失在
内含肽的基本信息介绍
生物体本身就是一个神秘而精密地高效运作的机器。大到各系统之间，小到每个细胞，无一不展示着生命的神奇，他们之间的配合是那样的天衣无缝。继内含子的自我剪接功能发现之后，第一个内含肽——命名为Sce VMA1 发现了，它的发现使内含肽陆续在各种生物中发现，它们在单细胞真核生物、真细菌、古细菌、噬菌体和
概述内含肽的分离纯化的介绍
内含肽具自切割特性的这种特性而实现目标蛋白与亲和标签分离的目的。内含肽在蛋白质纯化中的应用修饰后(位点特异性突变)的内含肽经诱导能够介导N端或C端单侧肽键断裂。首先将编码亲和标签、内含肽及目标蛋白的基因序列连接在一起，在合适的宿主系统中表达出一个标签-内含肽-目标蛋白的三联体，利用修饰后的内含肽
内含肽的分离纯化
内含肽具自切割特性的这种特性而实现目标蛋白与亲和标签分离的目的。内含肽在蛋白质纯化中的应用修饰后(位点特异性突变)的内含肽经诱导能够介导N端或C端单侧肽键断裂。首先将编码亲和标签、内含肽及目标蛋白的基因序列连接在一起，在合适的宿主系统中表达出一个标签-内含肽-目标蛋白的三联体，利用修饰后的内含肽构建
内含肽的作用机制
内含肽剪接是一个快速、高效的反应过程，前体蛋白在细胞中几乎分离不到。反应亦不需要任何辅助因子、酶和ATP能量，其催化结果是将内含肽两侧的外显肽通过肽键连接成成熟的天然肽。基于剪接位点氨基酸残基的化学性质以及带分支的剪接中间产物分子的发现，人们提出了多种假说来描述这一反应过程。目前被普遍接受的剪接机制
内含肽的应用内含肽可作为治疗线粒体疾病药物靶标
内含肽可作为治疗线粒体疾病药物靶标粒体DNA(mtDNA)突变，将导致mtDNA编码、与氧化磷酸化有关的13种蛋白质的突变，从而起很多罕见的疾病，这也可能是人类衰老的原因之一。由于该13种蛋白质高度的疏水性，通过转基编码表达的有生物活性的蛋白质很难从细胞质中进入线粒体。根据内含肽的作用机制，首先在胞
概述内含肽的作用机制
内含肽剪接是一个快速、高效的反应过程，前体蛋白在细胞中几乎分离不到。反应亦不需要任何辅助因子、酶和ATP能量，其催化结果是将内含肽两侧的外显肽通过肽键连接成成熟的天然肽。基于剪接位点氨基酸残基的化学性质以及带分支的剪接中间产物分子的发现，人们提出了多种假说来描述这一反应过程。目前被普遍接受的剪接
关于细胞连接—间隙连接的蛋白成分介绍
⑴ 细胞连接—间隙连接的蛋白成分： 已分离20余种构成连接子的蛋白,属同一蛋白家族,其分子量26—60KD不等； ⑵ 细胞连接—间隙连接的蛋白成分：连接子蛋白具有4个α-螺旋的跨膜区，是该蛋白家族最保守的区域。 ⑶ 细胞连接—间隙连接的蛋白成分：连接子蛋白的一级结构都比较保守, 并有相似的抗
内含肽的应用内含肽可作为抗结核分支杆菌药物靶标
由于肺结核的复发率高，且病菌对抗生素耐药具有适应性，针对结核分支杆菌(Mycobacteriumtuerculosis)的快速而独特的诊断工具就显得非常需要。分支杆菌是通过内含肽的作用影响人类的相关病，如结核、麻风病。在肺结核的发生中，DNA编码RecA和DnaB这两个蛋白质起重要作用，RecA和D
关于糖蛋白的连接方式介绍
糖蛋白的糖肽连接键，简称糖肽键。糖肽链的类型可以概况为： ① N-糖苷键型：寡糖链（GlcNAC的β-羟基）与Asn的酰胺基、N-未端的a-氨基、Lys或Arg的W-氨基相连。 ② O-糖苷键型：寡糖链（GalNAC的α-羟基）与Ser、Thr和羟基赖氨酸、羟脯氨酸的羟基相连。 ③ S-糖
关于糖蛋白的连接方式介绍
糖蛋白的糖肽连接键，简称糖肽键。糖肽链的类型可以概况为： ① N-糖苷键型：寡糖链（GlcNAC的β-羟基）与Asn的酰胺基、N-未端的a-氨基、Lys或Arg的W-氨基相连。 ② O-糖苷键型：寡糖链（GalNAC的α-羟基）与Ser、Thr和羟基赖氨酸、羟脯氨酸的羟基相连。 ③ S-糖
断裂型内合肽介导的蛋白质环化的特征介绍
环化蛋白质具有3个明显的特性： ①提高稳定性和活性，这是由于环化的蛋白质可以减少非折叠状态的构象熵值； ②折叠速度快，这是因为其减少了折叠途径的数目的缘故； ③对N端和C端特异性的蛋白酶具有抗性，因此能改善在体内的稳定性。 由于以上特性，环化蛋白质在蛋白质工程和医药工业中备受重视。以IM
断裂型内合肽介导的蛋白质环化
环化蛋白质具有3个明显的特性：①提高稳定性和活性，这是由于环化的蛋白质可以减少非折叠状态的构象熵值；②折叠速度快，这是因为其减少了折叠途径的数目的缘故；③对N端和C端特异性的蛋白酶具有抗性，因此能改善在体内的稳定性。由于以上特性，环化蛋白质在蛋白质工程和医药工业中备受重视。以IMPACT～TWIN(
关于细胞连接—与肌动蛋白纤维相连的锚定连接的介绍
与肌动蛋白纤维相连的锚定连接 粘合带（adhesion belt）呈带状环绕细胞，一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连接下方。在粘合带处相邻细胞的间隙约15～20nm。 间隙中的粘合分子为E-钙粘素。在质膜的内侧有几种附着蛋白与钙粘素结合在一起，这些附着蛋白包括：α-，β-，γ-连锁蛋白（cate
关于细胞连接—封闭连接的介绍
细胞连接—封闭连接（tight junction）又称封闭小带（zonula occludens），存在于脊椎动物的上皮细胞间，长度约50-400nm，相邻细胞之间的质膜紧密结合，没有缝隙。在电镜下可以看到连接区域具有蛋白质形成的焊接线网络，焊接线也称嵴线，封闭了细胞与细胞之间的空隙。上皮细胞层
关于G蛋白介导的信号转导途径的介绍
G蛋白可与鸟嘌呤核苷酸可逆性结合。由γ亚基组成的异三聚体在膜受体与效应器之间起中介作用。小G蛋白只具有G蛋白亚基的功能，参与细胞内信号转导。信息分子与受体结合后，激活不同G蛋白，有以下几种途经： （1）腺苷酸环化酶途径 通过激活G蛋白不同亚型，增加或抑制腺苷酸环化酶（AC）活性，调节细胞内c
关于内含子的起源介绍
内含子起源有两种假说。 1．内含子与它所在的基因一样古老,在装配第一个这样的基因时,内含子就已存在。早期的内含子具有自催化、自我复制等能力,因此,它们是原始基因和基因组的组织与复制必不可少的部分。而原核生物和少数低等的真核生物,由于它们需要进行快速的DNA复制从而进行快速的细胞分裂,因而失去了
关于内含子的定义介绍
内含子（Intron）又称间隔顺序,指一个基因或mRNA分子中无编码作用的片段 [1] 。是真核生物细胞DNA中的间插序列。这些序列被转录在前体RNA中,经过剪接被去除,最终不存在于成熟RNA分子中。内含子和外显子的交替排列构成了割裂基因。在前体RNA中的内含子常被称作“间插序列”。在转录后的加
关于内含子的特点介绍
内含子（introns）在转录后的加工中, 从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。术语内含子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。 大多数真核结构基因中的间插序列（intervening sequence）或不编码序列。它们可以转录,但在基因转录后,由这些间插序列转录的部分（也可用内含子
关于细胞连接—一锚定连接的介绍
通过细胞的骨架系统将细胞或细胞与基质相连成一个坚挺、有序的细胞群体，使细胞间、细胞与基质间具有抵抗机械张力的牢固粘合。锚定连接在组织内分布很广泛,在上皮组织,心肌和子宫颈等组织中含量尤为丰富。 特点：通过肌动蛋白丝或中等纤维相连。 一锚定连接 1、参与锚定连接的骨架系统可分两种不同形式:
关于细胞连接—通讯连接的基本介绍
通讯连接：相邻细胞之间建立直接通讯联系，又称缝隙连接或间隙连接。 一间隙连接：是动物细胞间最普遍的细胞连接，是在相互接触的细胞之间建立的有孔道的、由连接蛋白形成的亲水性跨膜通道，允许无机离子、第二信使及水溶性小分子量的代谢物质从中通过，从而沟通细胞达到代谢与功能的统一。在细胞生长、细胞增殖与分