IHC全攻略3：固定剂的选择
IHC/ICC实验中使用的所有样本必须经过固定，以维持组织形态，并保留目的分子的抗原性。固定改变了组织的化学组成，因此往往需要在维持组织结构和保留表位之间进行折衷。细胞或组织的不完全固定(固定不足)可能造成组织内目的蛋白的快速水解，并降低了特异的免疫反应性。然而，过度的固定(固定过度)可能导致表位的遮蔽或强的非特异背景染色，这可能会掩盖特异的标记。 理想的固定剂当然是：最好地保持细胞和组织的形态结构，并最大限度地保存抗原的免疫活性。然而，迄今为止尚无一种标准固定液能用于各种不同的抗原固定。经同一固定液固定后，不同组织可能呈现截然不同的染色结果。因此，不同的抗原和样本必须反复试验，选择最佳的固定剂。 甲醛 甲醛是保留组织和细胞内蛋白靶点的最常用固定剂。甲醛介导的组织固定被认为依赖于蛋白-蛋白以及包含亚甲基桥(-CH2-)的蛋白-核酸交联的形成。甲醛能化学连接NH2(氨基)和CONH(肽段)基团，NH2和NH，......阅读全文
细胞常用固定剂和固定方法
培养细胞常用固定剂有4％多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。1．4％多聚甲醛磷酸缓冲液 固定10—20分钟，干燥。2．甲醇 10‰甲醇固定5—20分钟，自然干燥。3．丙酮 4℃冷丙酮固定组织穿透性和脱水性强，抗原保存好，很少用于组织切片，常用于培养细
什么是固定剂？
固定剂最先应用在光学显微技术中，但光学显微镜中使用的沉淀凝集蛋白性的固定剂对电镜并不特别适用。于是人们引入四氧化锇和中性甲醛进行固定。早期的电镜生物样品化学固定法都采用四氧化锇单一固定，但四氧化锇不能很好地保存糖原和其它碳水化合物，而且四氧化锇在组织中的渗透速度比较慢（约2mm/h）。
甲醛固定剂的介绍
甲醛分子中只有一个碳原子，含有一个醛基，分子式为$CH_2O$，分子量为30。市面上虽然有多种形式的甲醛溶液出售，但它们含有少量的甲酸和甲醇，对被固定的样品产生不良影响，适合电镜固定使用的只有通过由多聚甲醛(paraformaldehyde)新鲜制备的甲醛溶液。甲醛溶液的毒性很大，即使是稀释液也要格
固定剂的功能介绍
固定剂最先应用在光学显微技术中，但光学显微镜中使用的沉淀凝集蛋白性的固定剂对电镜并不特别适用。于是人们引入四氧化锇和中性甲醛进行固定。早期的电镜生物样品化学固定法都采用四氧化锇单一固定，但四氧化锇不能很好地保存糖原和其它碳水化合物，而且四氧化锇在组织中的渗透速度比较慢（约2mm/h）。
重铬酸钾固定剂介绍
重铬酸钾（potassium dichromate）在固定中有两种作用，一是缓冲作用，二是固定作用，帮助保存脂类和糖类。在处理神经组织样品时，因为重铬酸钾能很好地保存髓磷脂，可与四氧化锇配合使用，作为第二重固定剂。但需要注意的是，重铬酸钾是一种致癌物质，应小心操作。
固定剂的种类详解
四氧化锇（Osmium tetroxide）四氧化锇是一种很强的氧化剂，呈浅黄色结晶，分子量254，饱和水溶液的浓度为7.24%，它的水溶液为中性，有极大毒性。市售有密封的四氧化锇晶体和四氧化锇水溶液两种。四氧化锇晶体溶于水的速度很慢，必要时可以使用超声波设备来加速溶解。市面上也有已经配制好的2%四
高锰酸钾固定剂介绍
高锰酸钾（potassium permanganate）可以与脂类反应，增强膜结构的反差。可以保存DNA和糖原，但有一定的抽提作用，几乎无法固定细胞内的颗粒性或纤维状结构，可能会引入一些假象。穿透性强，适用于有厚细胞壁或蜡质层包被的植物及昆虫样品。使用时可以不加缓冲液，固定时间不宜太长，,0.5-1
醋酸铀固定剂介绍
醋酸铀（uranyl acetate）}既是一种固定剂又是一种染色剂。它可以与磷酸基团反应，从而固定DNA和RNA，以及含有磷酸基团的磷脂，从而对膜结构的保存有帮助。另外，它可以与蛋白中的酸性基团（如天冬氨酸残基、谷氨酸残基）和碱性基团（如赖氨酸残基）反应，从而起固定蛋白的作用。但醋酸铀不能很好得保
甲醛固定剂的特点介绍
甲醛作为固定剂有如下特点：由于甲醛的分子量小，它的穿透能力比戊二醛强，反应温和，可用于细胞组织化学研究的前固定。而且它不象戊二醛有两个醛基，引入较少的游离醛基到组织细胞中，因而在一些细胞组织化学研究中更有利。但它的反应是部分可逆的，对细胞基质保存差，脱水后大部分基质丢失，所以不少实验室不单独使用甲醛
丙烯醛固定剂介绍
丙烯醛（acrolein）是一种三碳醛，含有一个醛基和一个双键。它比甲醛和戊二醛活泼，渗透组织的速度也比甲醛和戊二醛快。它可以很好地保存蛋白和磷脂，最好作为甲醛或戊二醛固定液的添加剂使用。通常使用市售密封的100%丙烯醛液体，固定时使用的浓度小于1%。它溶于水的速度慢，毒性很大，着火点低，储存和使用
戊二醛固定剂介绍
戊二醛是一种五碳醛，含有两个醛基。分子式为$C_5H_8O_2$，分子量为100。电镜固定通常用市售的25%的戊二醛水溶液稀释成需要的浓度。其pH为4.0$\sim$5.0。氧气、高温、中性或碱性pH均能使戊二醛发生聚合失去醛基，并降低交联效力，所以平时这种原液应保存在低温处。此外戊二醛存放时间过长
丹宁酸固定剂介绍
丹宁酸（Tannic acid）是一种从植物中提取的物质，泛指五倍子酸（gallic acid）糖苷或多聚糖苷。大分子很难渗透到组织中，因此电镜中使用低分子量的丹宁酸。丹宁酸既是一种强的固定剂，能固定许多蛋白以及糖类衍生物，又是一种媒染剂，能增强对重金属（如铀、铅）的吸收，从而增强样品反差，特别是细
固定剂的使用注意事项
电镜中使用的固定剂都有毒性，操作时都要很小心，尽可能在通风橱中完成操作。如果实验室中发生固定剂泄漏，必须立即用大量奶粉覆盖泄漏出来的溶液，待反应充分后收集处理。
四氧化锇固定剂的特点
1.四氧化锇可以与脂类、糖类和蛋白质反应。其对脂类的固定作用可以补充醛类固定剂对脂类固定不足的缺点。2.能增加膜的反差，起到"电子染色"作用。用四氧化锇固定的材料，往往细胞膜结构比较清晰。这是由于被还原的锇沉积在细胞膜结构上，而锇是一种原子序数较高的元素，能加强它们的电子散射（质量密度大），所以四氧
凝固型固定剂的种类介绍
1、酒精(ethyl，alcohol)常用95%酒精及纯酒精。酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。高浓度酒精有使材料收缩的作用。70%的酒精可作保存液。配制低度酒精必须要用普通酒精即95%的酒精，绝不可用纯酒精。酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。酒精可使核酸，蛋白质及肝醣等发生
固定剂使用的注意事项
电镜中使用的固定剂都有毒性，操作时都要很小心，尽可能在通风橱中完成操作。如果实验室中发生固定剂泄漏，必须立即用大量奶粉覆盖泄漏出来的溶液，待反应充分后收集处理。
固定剂的种类及特点介绍
四氧化锇（Osmium tetroxide）四氧化锇是一种很强的氧化剂，呈浅黄色结晶，分子量254，饱和水溶液的浓度为7.24%，它的水溶液为中性，有极大毒性。市售有密封的四氧化锇晶体和四氧化锇水溶液两种。四氧化锇晶体溶于水的速度很慢，必要时可以使用超声波设备来加速溶解。市面上也有已经配制好的2%四
戊二醛固定剂的特点
戊二醛作为固定剂有如下特点：它的反应速度快，是优良的前固定剂。但它的渗透速度较慢，必要时配合甲醛使用效果更佳。它是蛋白质的强固定剂。它能快速而不可逆地与氨基反应，和甲醛相似，戊二醛的一个醛基与氨基反应，脱水后生成不稳定的Schiff键化合物。由于戊二醛有两个醛基，它可以通过与相邻的另一氨基反应，而产
四氧化锇固定剂的缺点
四氧化锇虽然具有以上优点，但它也存在不少缺点：四氧化锇渗透力弱，所以组织块要小。否则，将从组织块表面到中间形成一个固定梯度，致使内部自溶过程继续进行引起组织块内部固定不好。不能保存糖原也不能有效固定核酸，而且对微管固定效果也不理想。固定的时间不宜太长。时间过长，会使组织变脆，给切片带来困难。此外四氧
培养基的指示剂
培养基的指示剂是检验主管技师考试辅导的部分内容，以下是医学教育网对这块内容的整理，希望对考生有所帮助： 在培养基中加入一定种类的指示剂，是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。美蓝常用作氧化还原指示剂。
非凝固型固定剂的种类介绍
1、 福尔马林(formalin)浓度在2～10%的福尔马林，为很好的硬化剂，但是渗透力薄弱，而且对材料会引起强烈收缩。所以最好与其他药剂混合使用，效果会大大增加。注意的是，它亦是一种还原剂，故不宜与氧化剂铬酸、锇酸相混。特点：很好的硬化剂，强还原剂；渗透力弱。2、重铬酸钾(potassium di
甲醛固定剂的功能及反应特点
甲醛分子中只有一个碳原子，含有一个醛基，分子式为$CH_2O$，分子量为30。市面上虽然有多种形式的甲醛溶液出售，但它们含有少量的甲酸和甲醇，对被固定的样品产生不良影响，适合电镜固定使用的只有通过由多聚甲醛(paraformaldehyde)新鲜制备的甲醛溶液。甲醛溶液的毒性很大，即使是稀释液也要格
高锰酸钾固定剂的功能及作用特点
高锰酸钾（potassium permanganate）可以与脂类反应，增强膜结构的反差。可以保存DNA和糖原，但有一定的抽提作用，几乎无法固定细胞内的颗粒性或纤维状结构，可能会引入一些假象。穿透性强，适用于有厚细胞壁或蜡质层包被的植物及昆虫样品。使用时可以不加缓冲液，固定时间不宜太长，,0.5-1
IHC全攻略3：固定剂的选择
IHC/ICC实验中使用的所有样本必须经过固定，以维持组织形态，并保留目的分子的抗原性。固定改变了组织的化学组成，因此往往需要在维持组织结构和保留表位之间进行折衷。细胞或组织的不完全固定(固定不足)可能造成组织内目的蛋白的快速水解，并降低了特异的免疫反应性。然而，过度的固定(固定过度)可能导致表
醋酸铀固定剂的功能及作用特点
醋酸铀（uranyl acetate）}既是一种固定剂又是一种染色剂。它可以与磷酸基团反应，从而固定DNA和RNA，以及含有磷酸基团的磷脂，从而对膜结构的保存有帮助。另外，它可以与蛋白中的酸性基团（如天冬氨酸残基、谷氨酸残基）和碱性基团（如赖氨酸残基）反应，从而起固定蛋白的作用。但醋酸铀不能很好得保
凝固型固定剂的类型及功能特点
1、酒精(ethyl，alcohol)常用95%酒精及纯酒精。酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。高浓度酒精有使材料收缩的作用。70%的酒精可作保存液。配制低度酒精必须要用普通酒精即95%的酒精，绝不可用纯酒精。酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。酒精可使核酸，蛋白质及肝醣等发生
重铬酸钾固定剂的功能及作用特点
重铬酸钾（potassium dichromate）在固定中有两种作用，一是缓冲作用，二是固定作用，帮助保存脂类和糖类。在处理神经组织样品时，因为重铬酸钾能很好地保存髓磷脂，可与四氧化锇配合使用，作为第二重固定剂。但需要注意的是，重铬酸钾是一种致癌物质，应小心操作。
什么是固定床催化剂评价装置？
固定催化剂评价装置，又称 固定床反应器、微反装置、小样材料评价系统等。主要为化学反应模拟有效的实验环境 ，对催化剂材料进行有效的性能评价。产品特点：（1）该装置所有配件采用行业品牌，包含（七星流量计、熊川SUS316L阀门管件）（2）程序升温，升温速率可调；（3）温度、流量、压力可控；（4）各关键部
丙烯醛固定剂的功能及作用特点
丙烯醛（acrolein）是一种三碳醛，含有一个醛基和一个双键。它比甲醛和戊二醛活泼，渗透组织的速度也比甲醛和戊二醛快。它可以很好地保存蛋白和磷脂，最好作为甲醛或戊二醛固定液的添加剂使用。通常使用市售密封的100%丙烯醛液体，固定时使用的浓度小于1%。它溶于水的速度慢，毒性很大，着火点低，储存和使用
丹宁酸固定剂的功能及作用特点
丹宁酸（Tannic acid）是一种从植物中提取的物质，泛指五倍子酸（gallic acid）糖苷或多聚糖苷。大分子很难渗透到组织中，因此电镜中使用低分子量的丹宁酸。丹宁酸既是一种强的固定剂，能固定许多蛋白以及糖类衍生物，又是一种媒染剂，能增强对重金属（如铀、铅）的吸收，从而增强样品反差，特别是细