IHC全攻略3：固定剂的选择
IHC/ICC实验中使用的所有样本必须经过固定，以维持组织形态，并保留目的分子的抗原性。固定改变了组织的化学组成，因此往往需要在维持组织结构和保留表位之间进行折衷。细胞或组织的不完全固定(固定不足)可能造成组织内目的蛋白的快速水解，并降低了特异的免疫反应性。然而，过度的固定(固定过度)可能导致表位的遮蔽或强的非特异背景染色，这可能会掩盖特异的标记。 理想的固定剂当然是：最好地保持细胞和组织的形态结构，并最大限度地保存抗原的免疫活性。然而，迄今为止尚无一种标准固定液能用于各种不同的抗原固定。经同一固定液固定后，不同组织可能呈现截然不同的染色结果。因此，不同的抗原和样本必须反复试验，选择最佳的固定剂。 甲醛 甲醛是保留组织和细胞内蛋白靶点的最常用固定剂。甲醛介导的组织固定被认为依赖于蛋白-蛋白以及包含亚甲基桥(-CH2-)的蛋白-核酸交联的形成。甲醛能化学连接NH2(氨基)和CONH(肽段)基团，NH2和NH，......阅读全文
2％多聚甲醛固定剂配方二则
METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldeh
非凝固型固定剂的类型及功能特点
1、 福尔马林(formalin)浓度在2～10%的福尔马林，为很好的硬化剂，但是渗透力薄弱，而且对材料会引起强烈收缩。所以最好与其他药剂混合使用，效果会大大增加。注意的是，它亦是一种还原剂，故不宜与氧化剂铬酸、锇酸相混。特点：很好的硬化剂，强还原剂；渗透力弱。2、重铬酸钾(potassium di
戊二醛固定剂的功能及作用特点
戊二醛是一种五碳醛，含有两个醛基。分子式为$C_5H_8O_2$，分子量为100。电镜固定通常用市售的25%的戊二醛水溶液稀释成需要的浓度。其pH为4.0$\sim$5.0。氧气、高温、中性或碱性pH均能使戊二醛发生聚合失去醛基，并降低交联效力，所以平时这种原液应保存在低温处。此外戊二醛存放时间过长
四氧化锇固定剂的功能及反应特点
四氧化锇是一种很强的氧化剂，呈浅黄色结晶，分子量254，饱和水溶液的浓度为7.24%，它的水溶液为中性，有极大毒性。市售有密封的四氧化锇晶体和四氧化锇水溶液两种。四氧化锇晶体溶于水的速度很慢，必要时可以使用超声波设备来加速溶解。市面上也有已经配制好的2%四氧化锇水溶液出售，使用相当方便。但要特别注意
增殖培养基的防沫剂的介绍
也称消泡剂，一种表面活性剂，能降低泡沫的表面张力，从而消除发酵中泡沫。在多数好气发酵中需解决泡沫问题。泡沫形成的主要原因是由于在培养基中有蛋白质，从而在发酵液和空气泡之间的界面上形成膜，这种膜不易被破坏。泡沫大量形成后，能进入发酵罐的排气管道而造成发酵染菌及发酵液流失。常用的消泡剂为油脂类、酯类
免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样，要想得到好的染色效果，关键取决于标本处理是否合适，只有使抗原性及组织结构保存的好，才能使以后的染色成功成为可能，其次要用高特异性和高效价的一抗，选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科，所要检出的抗原种类繁多，性质也各不相同。因此，不可能
免疫胶体金银细胞化学染色中固定剂选择
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样，要想得到好的染色效果，关键取决于标本处理是否适当，只有使抗原性及组织结构保存的好，才能使后续的染色成功成为可能，其次要用高特异性和高效价的一抗，选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科，所要检出的抗原种类繁多，性质也各不相同。因此，不可能
免疫胶体金银细胞化学染色中固定剂选择
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样，要想得到好的染色效果，关键取决于标本处理是否适当，只有使抗原性及组织结构保存的好，才能使后续的染色成功成为可能，其次要用高特异性和高效价的一抗，选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科，所要检出的抗原种类繁多，性质也各不相同。因此，不可能
免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样，要想得到好的染色效果，关键取决于标本处理是否合适，只有使抗原性及组织结构保存的好，才能使以后的染色成功成为可能，其次要用高特异性和高效价的一抗，选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科，所要检出的抗原种类繁多，性质也各不相同。因此，不可能
光学显微技术中使用的固定剂的配方介绍
凝固型固定剂1、酒精(ethyl，alcohol)常用95%酒精及纯酒精。酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。高浓度酒精有使材料收缩的作用。70%的酒精可作保存液。配制低度酒精必须要用普通酒精即95%的酒精，绝不可用纯酒精。酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。酒精可使核酸，蛋白质
光学显微技术中使用的固定剂的种类介绍
四氧化锇（Osmium tetroxide）四氧化锇是一种很强的氧化剂，呈浅黄色结晶，分子量254，饱和水溶液的浓度为7.24%，它的水溶液为中性，有极大毒性。市售有密封的四氧化锇晶体和四氧化锇水溶液两种。四氧化锇晶体溶于水的速度很慢，必要时可以使用超声波设备来加速溶解。市面上也有已经配制好的2%四
微生物培养基促进剂的概念
促进剂是指那些非细胞生长所必需的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。
微生物培养基促进剂的作用
促进剂不是前体或营养物 可影响正常代谢，或促进中间代谢产物的积累，或提高次级代谢产物的产量例如◇巴比妥可增加链霉素产生菌的抗自溶能力，推迟自溶时间，增加链霉素积累。◇谷氨酸棒杆菌生产赖氨酸时，加入红霉素可提高产量25%以上。
微生物培养基促进剂的概念
促进剂是指那些非细胞生长所必需的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。
培养基的抑制剂与指示剂
目的：进行选择、鉴定及判断结果的需要。1.抑制剂目的在于抑制非检出菌（非病原菌）的生长，以利于检出菌（病原菌）的生长。常用的有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。2.指示剂目的是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝
微生物培养基促进剂的作用机制
促进剂提高产量的机制还不完全清楚，其原因是多方面的。如在酶制剂生产中，有些促进剂本身是酶的诱导物；有些促进剂是表面活性剂，可改善细胞的透性，改善细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产，也有人认为表面活性剂对酶的表面失活有保护作用；有些促进剂的作用是沉淀或鳌合有害的金属离子。各种促进剂的效果除受菌种、菌
固体培养基的凝固剂应具备的条件
理想的凝固剂应具备以下条件： ①不被所培养的微生物分解利用； ②在微生物生长的温度范围内保持固体状态，在培养嗜热细菌时，由于高温容易引起培养基液化，通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题； ③凝固剂凝固点温度不能太低，否则将不利于微生物的生长； ④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用；
培养基的基本组分保护剂简介
细胞保护剂是保护细胞免受渗透压变化、剪切力、氧化及气泡作用等引起的损伤的物质。在使用生物反应器培养动物细胞时，细胞易被机械搅拌和通气鼓泡产生的流体剪切力和气泡作用所伤害甚至破损死亡。为降低这种损伤，除优化生物反应器结构和生产工艺外，可在细胞培养液中添加一些保护剂。其主要是通过改变细胞培养基物性或
色谱固定相(固定液)
色谱固定相(固定液)色谱柱是色谱的心脏，样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类，一类是具有吸附性的多孔固体物质，也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固
色谱固定相(固定液)
色谱固定相(固定液)色谱柱是色谱的心脏，样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类，一类是具有吸附性的多孔固体物质，也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固
色谱固定相(固定液)
色谱柱是色谱的心脏，样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类，一类是具有吸附性的多孔固体物质，也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上。常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固定相。吸附剂中有硅
戊乙稀醇缩甲醛是电镜中的固定剂吗
戊二醛，分子式为C5H8O2，是一种有机化合物，呈带有刺激性气味的无色透明油状液体，常用作杀菌剂、食品工业加工助剂、消毒剂、鞣革剂、木材防腐剂、药物和高分子合成原料等。戊二醛和多聚甲醛分子中的醛基均能与蛋白质结合形成分子间的交联, 影响蛋白质构象而使之固定, 而戊二醛与蛋白质分子中的氨基、肽链N-端
组织固定固定液的选择
影响标本固定的因素很多，如组织与固定液的比例、固定时间、固定温度等；除此之外，固定液本身也很重要，若所选固定液不当，细胞内蛋白质、脂类、核 酸等成 分将会有不同程度地损失。固定剂最好随配随用，并注意其浓度和酸碱度。因此根据实际工作的目的，选用合适的固定液非常重要。下面是一些常用固定液的配制方
什么叫色谱柱，什么叫离子交换剂，什么叫固定相
色谱是利用待分离组分在两种萃取剂中的分配比差异来进行分离的。 实际操作中，会把一种萃取剂装填到一根玻璃管或者不锈钢管里，加上待分离组分以后，用另一种萃取剂去洗脱。 这根装有萃取剂的管子就是色谱柱，里面填充的萃取剂因为不会移动，就叫做固定相。聪明的你一定就明白另一种用来洗脱的萃取剂就叫做流动相了。在离
光学显微技术中使用的固定剂的特点及注意事项
固定剂最先应用在光学显微技术中，但光学显微镜中使用的沉淀凝集蛋白性的固定剂对电镜并不特别适用。于是人们引入四氧化锇和中性甲醛进行固定。早期的电镜生物样品化学固定法都采用四氧化锇单一固定，但四氧化锇不能很好地保存糖原和其它碳水化合物，而且四氧化锇在组织中的渗透速度比较慢（约2mm/h）。电镜中使用的固
微生物培养基促进剂的物理性质
外观：清澈，暗棕色液体比重：0.98（25℃时）闪火点：>60℃流动点：-46℃溶解度：完全溶解于油中促进剂-928附着力促进剂
细胞培养基各类添加剂（生长因子等）模式
成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、丙酮酸及脂类等。已发现当培养基中的血清浓度减少时，这些成分都是必需的。既使在使用血清的情况下，这些成分也可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。 激素和生长因子在大多数常规培养基的配方中都没有注明，但
组织固定
一、固定的目的和意义活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织化学改变，并导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态改变直至腐 败自溶。固定的目的就是要通过使用化学和物理的方法，尽可能地保存组织细胞离体时具有的生理和病理形态结构及生物化学和免疫化学成分。良好
色谱固定相(固定液)的相关介绍
色谱柱是色谱的心脏，样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类，一类是具有吸附性的多孔固体物质，也称为吸附剂；另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固定相。吸附剂中有
固定化细胞和固定化酶比较
固定化细胞：优点： 固定化细胞内酶的活性基本没有损失。缺点： 固定化细胞只能用于生产细胞外酶。固定化酶：优点：容易与水溶性反应物和产物分离。缺点： 一种酶只催化一种化学反应,而产物形成是通过一系列酶促反应得到的.