如何在WesternBlot检测时提高大分子量蛋白的转印效率？
① 增加转印时间。② 在转印缓冲液中添加0.01%或0.02%的SDS以提高蛋白从胶中转出的效率。③ 减少转印缓冲液中甲醇的量。④ 使用低浓度的胶更利于转印。......阅读全文
如何在Western－Blot检测时提高大分子量蛋白的转印效率？
① 增加转印时间。② 在转印缓冲液中添加0.01%或0.02%的SDS以提高蛋白从胶中转出的效率。③ 减少转印缓冲液中甲醇的量。④ 使用低浓度的胶更利于转印。
Western－blot转印的优化
从SDS凝胶中进行Western蛋白转印的优化需要对一系列参数进行考虑。目的是转印所有凝胶上的蛋白并将其定量地转移到转印膜上。进行高效转印需要一定程度的优化，尤其是对于大分子量和小分子量蛋白。转印后，凝胶上应不残留或残留很少的蛋白。可以在转印后进行染色进行检测。转移出凝胶的蛋白应该仅在接触凝胶的膜的
western－blot－试验中蛋白转膜总转不上去
当然，首先要考虑的问题是你转过头了，蛋白质跑出去了。其次你的电流有点大，你也没说转了多久？用的干转还是湿转？是不是拿出来的时候很热？这种情况有可能使蛋白质降解。我们一般是湿转用100mA转2小时， 干转所需电流更小。
western－blot转膜的原理
电场力作用条件下，带电粒子（PAGE胶中的蛋白）会发生定向迁移；蛋白大小如果超过膜孔径（0.22μm or 0.45μm），不会透过膜；WB用的膜具有蛋白吸附作用；
大分子量蛋白转印的5个技巧
做western blot印迹膜时，较大的蛋白质众所周知是难以处理的。 特别是，您可能很难实现良好的转印效率。 在某些方面，蛋白质难以朝着你想要的方向前进。 我们将给5点建议，帮助胶上大分子量蛋白的转印。 01 牺牲胶的韧性来提高效率 低浓度的丙烯酰胺凝胶可能难以操作。一旦手指触摸它就会
大分子量蛋白转印的5个技巧
做western blot印迹膜时，较大的蛋白质众所周知是难以处理的。 特别是，您可能很难实现良好的转印效率。 在某些方面，蛋白质难以朝着你想要的方向前进。我们将给5点建议，帮助胶上大分子量蛋白的转印。01牺牲胶的韧性来提高效率低浓度的丙烯酰胺凝胶可能难以操作。一旦手指触摸它就会撕裂？ 但是，与
Western－Blot转膜技术要点
这个年过的有点崎岖，在面对社会性问题时疫情给我们带来了很多正能量，相信很多还没返校的人已经给自己立了flag。在我们回望过去的一年，这个时代已经变了。任何的进步都被透明公开的呈现在我们面前，而我们看到的好消息远比自己收获的多，所以我们总忍不住问自己，“我成长了吗？”“我的实验能顺利些吗？” “我
Western－Blot转膜技术要点
这个年过的有点崎岖，在面对社会性问题时疫情给我们带来了很多正能量，相信很多还没返校的人已经给自己立了flag。在我们回望过去的一年，这个时代已经变了。任何的进步都被透明公开的呈现在我们面前，而我们看到的好消息远比自己收获的多，所以我们总忍不住问自己，“我成长了吗？”“我的实验能顺利些吗？” “我的科
免疫印迹（Western－Blot）不同蛋白的转膜条件
蛋白来源:RAW264.7 总蛋白蛋白名称:一些转录因子蛋白分子量:40~70 KDWB 用膜类型、孔径:0.45 NC转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒流 400 mA转膜时间:60~90 minPS. 其实吧,以我的经验来看,除非目的蛋白特别小,或者特别大,不然转膜时间真的不是那么重要, 曾经因为
高灵敏度化学发光技术应用心得（一）
一．概述化学发光 (ChemiLuminescence ，简称为 CL) 分析法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光分析的本
如何在Western－Blot中选择一抗？
说到免疫印迹最重要的就是抗体的选择了。在免疫印迹中我们会用到一抗和二抗等抗体，本文着重给大家介绍一下一抗的选择。一抗就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。抗体因其种属来源不同可以分为多种类型，如鼠抗，兔抗，羊抗等等，那么在使用时我们应该怎么选择呢？检测任何一种目的蛋白都
电泳和Western转印的常见问题
表1 Common problems for electrophoresis and western bloting问 题可能原因建议解决方法推荐电压条件下电泳时间过长。电泳缓冲液过稀。配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液。推荐电压条件下电流过高，热量过大。电泳缓冲液过稀。配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液。
从样本制备和转印过程提高western－blot的准确性
适当的样本准备 样品准备不当，会让你头疼不已，当准备裂解液时： 快速工作 保持低温环境 增加蛋白酶 进行分装，避免反复冻融 如果要分装样品，请确保等量分装，以便检查是否在此过程中丢失了目标。 如果您分离的样品浓度非常低，请记住，使用高灵敏度底物和较少的裂解液
从样本制备和转印过程提高western－blot的准确性
适当的样本准备样品准备不当，会让你头疼不已，当准备裂解液时：快速工作保持低温环境增加蛋白酶进行分装，避免反复冻融如果要分装样品，请确保等量分装，以便检查是否在此过程中丢失了目标。 如果您分离的样品浓度非常低，请记住，使用高灵敏度底物和较少的裂解液。如果你的裂解液中含有大量的DNA，它就会变得粘稠。
如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们，实验做
如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们，实
如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们，实
如何获得精准的Western－Blot实验结果？（一）
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们
如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们
如何做出一手漂亮的Western－Blot实验结果？
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们
如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们
western－blot－的转膜缓冲液
目的是为了消除电荷对电泳的影响，western各步骤的缓冲液基本上都是要加的。
Azure－Biosystems－Western－blotting之实验秘籍
蛋白分离、杂交、检测、分析 前瞻回顾 鉴于小编在《Azure Biosystems Western Blotting工作流程之实验方法的选择》中和大家聊了Western blot的实验方法选择，相信大家已经将您的western blot 实验方法选择好了，那么这期小编和大家聊聊wes
一文读懂蛋白质转印原理－大分子量蛋白转印有哪些技巧
通过凝胶电泳分离蛋白后，蛋白质被转移到固体膜载体上进行后续步骤。有效的转印依赖于膜的选择、所使用的转印设备的类型以及转印缓冲液的组成。 转印条件 蛋白的有效转印依赖于蛋白质从凝胶中迁移出来，也依赖于蛋白在膜上的滞留。像凝胶电泳一样，转印步骤将带负电荷的蛋白转印到带正电荷的电极上。转印效率受所
western－blot转膜是怎么做的
蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是电转印法，分为湿式转印与半干转印。湿式转印是将胶块垂直方向夹在湿式转印槽内进行电转印。以E-Blotter湿转槽为例，一般使用垂直电泳槽的缓冲液槽体，将内部垂直电
如何获得精准的Western－Blot实验结果？（二）
半干转： 对于半干转来说，也需要进行堆叠组装（滤纸，胶，膜需要放在转印buffer中进行预平衡）放在装置电极板的底部，盖上上极板，高强的电流通过三明治结构，转印速度较快，一般小于1h。 半干转优点缺点转膜速度快低分子量蛋白容易转过用不连续的Buffer系统优化转印的蛋白对于分子量＞120KDa的蛋
Azure－Biosystems－Western－blotting之实验秘籍（上）
蛋白分离、杂交、检测、分析前瞻回顾鉴于小编在《Azure Biosystems Western Blotting工作流程之实验方法的选择》中和大家聊了Western blot的实验方法选择，相信大家已经将您的western blot 实验方法选择好了，那么这期小编和大家聊聊western blot的
Western－Blot－蛋白样品制备
一、单层贴壁细胞总蛋白的提取：1.倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。2.每瓶细胞加 3 ml 4℃ 预冷的 PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动 1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次
半干转印与湿式转印的区别－|－WEALTEC－威泰克
刚接触 Western Blot 不久的用户，在选购 WB 设备时，经常会遇到仪器选型的问题：为什么常见的蛋白质电泳的转膜有两种方式可以选择，干式和湿式，那么哪种方法更适合我们呢？这里我们结合美国 WEALTEC 公司的 E-Blotter 湿转槽和 YRDIMES 快速半干转印槽举例说明。
蛋白质转印法
蛋白质经SDS-PAGE后，胶片浸入转印缓冲液，蛋白质可被转印到硝化纤维纸（nitrocellulose） 上，先经尿素洗去SDS，并使蛋白质回復原态抗原性，可使用抗体进行免疫染色 （Towbin et al, 1979）。仪器用具：电泳转印槽 （Hoefer Transphor TE 52）：转印