关于DNA聚合酶I的基本介绍
DNA聚合酶I（DNA-pol I），分子量109kD，为单肽链组成，400分子数/细胞，是原核生物的DNA聚合酶，由于发现最早命名为DNA聚合酶I，其他原核生物的DNA聚合酶，按发现的先后顺序分别命名为DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶Ⅴ。......阅读全文
关于DNA探针的基本内容介绍
DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板，人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段，可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合，经放射自显影或其他检测手段就可以
关于DNA疫苗的基本信息介绍
DNA疫苗——对目标细胞，藉由改造过的病毒或细菌感染，以插入基因或调节基因表现（gene expression）的手法，引起免疫系统的活化，若这些细胞因此在表面呈现异于接种者本身的物质，将会被免疫系统辨识后受到攻击，尽管此项技术仍在试验中，却有可能成为未来治疗癌症、遗传疾病的重要疗法。
关于DNA重组的基本信息介绍
DNA重组（DNA recombination）实质上指的是遗传重组（genetic recombination），也称为遗传改组（genetic reshuffling），是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生
关于DNA效应的基本信息介绍
一个国际研究小组通过单分子生物物理等手段严谨地证实了DNA中确实存在别构效应。该研究揭示了DNA一个新的基本性质，不但在物理上非常有趣，而且有重要的生理意义。相关研究发表在近期的《科学》杂志上。 别构效应广泛存在于蛋白质特别是酶中。别构效应是描述远离活性中心的结合到变构位点的效应因子能够通过蛋
关于DNA变性的基本信息介绍
变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变： 1）溶液粘度降低。DNA双螺旋是紧密的刚性结构，变性后代之以柔软而松散的无规则单股线性结构，DNA粘度因此而明显下降。 2）溶液旋光性发生改变。变性后整个DNA分子的对称性及分子局部的构性改变，使DNA溶液的旋光性发生变化。 3）增色效应(hy
关于卫星DNA的基本信息介绍
卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心（离心速度可以高达每分钟几万转）时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看
关于DNA杂交的基本信息介绍
DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种
关于叶绿体DNA的基本信息介绍
叶绿体DNA，英文chloroplast DNA，缩写cpDNA，存在于叶绿体内，双链环状，长度中间值通常为45微米，具有独立基因组。一个叶绿体含有10~50个cpDNA。 chloroplast DNA（cpDNA），存在于叶绿体内的DNA。高等植物叶绿体的DNA为双链共价闭合环状分子，其长
关于治疗性DNA疫苗的基本介绍
“治疗性DNA疫苗”是由解放军总医院第五医学中心免疫室主任奚永志团队申报的正式获得国际标准“三方”发明ZL授权的疫苗。 解放军总医院第五医学中心免疫室主任奚永志团队申报的《基于B7-1-PE40KDEL外毒素融合基因的DNA疫苗及其用途》，正式获得国际标准“三方”发明ZL授权。该成果是具有完全
关于端粒DNA的基本信息介绍
端粒DNA，包括非特异性DNA和由高度重复序列组成的特异DNA序列，通常是由富含鸟嘌呤核苷酸（G）的短的串联重复序列组成，伸展到染色体的3'端。人工合成四膜虫端粒的重复DNA片段（TTGGGG）4端。人和小鼠的端粒DNA重序列为TTGGG，人类端粒的长度约为15Kb碱基。由于dsDNA存
关于DNA滚环复制的基本介绍
滚环式复制（rolling circle replication）是噬菌体中常见的DNA复制方式。许多病毒DNA的复制、质粒、F因子在接合（conjugation）转移时其DNA的复制，以及许多基因扩增时都采用这种方式。 在以这种机制进行的复制中，亲代双链DNA的一条链在DNA复制起点处被切开
普通型耐热DNA聚合酶的介绍
普通型 1.Taq DNA 聚合酶 由一种水生栖热菌yT1株分离提取出,是发现的耐热DNA聚合酶中活性最高的一种,达200,000单位/mg。具有5'-3'外切酶活性,但不具有3'-5'外切酶活性,因而在合成中对某些单核苷酸错配没有校正功能。 TaqDNA聚
关于聚合酶的分类介绍
可分为以下几个类群: (1)依赖DNA的DNA聚合酶； (2)依赖RNA的DNA聚合酶； (3)依赖DNA的RNA聚合酶； (4)依赖RNA的RNA聚合酶。 前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，Pol
DNA聚合酶的功能简介
DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是
DNA聚合酶的共同特点
DNA聚合酶有多种，E.coli就有三种。通常DNA聚合酶具有以下共同特点：①需要DNA模板，因此这类酶又称为依赖DNA的DNA聚合酶； ②需要RNA或DNA作为引物(primer)，即DNA聚合酶不能从头催化； ③催化dNTP加到引物的3'-OH末端，其速率为1000nt/min，因而DN
耐热DNA聚合酶的选择
耐热DNA聚合酶特点：合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素，如何选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶，虽然名称各不相同，但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。TIANGEN公司生产的耐热DNA聚
DNA聚合酶的研究历史
1953年，沃森和克里克发表了经典论文，描述DNA的化学结构，而一些科学家对它的重要性提出了最初的质疑。两人在论文中提出，DNA的复制原理仍有待确定。当时，美国生物化学家阿瑟·科恩伯格正在密苏里州圣路易斯市的华盛顿大学微生物学系工作，他认可了这篇论文的重要意义。由此，他开始对机体合成核酸的过程产生了
DNA聚合酶的研究历史
1953年，沃森和克里克发表了经典论文，描述DNA的化学结构，而一些科学家对它的重要性提出了最初的质疑。两人在论文中提出，DNA的复制原理仍有待确定。当时，美国生物化学家阿瑟·科恩伯格正在密苏里州圣路易斯市的华盛顿大学微生物学系工作，他认可了这篇论文的重要意义。由此，他开始对机体合成核酸的过程产生了
关于小卫星DNA的基本信息介绍
小卫星DNA (minisatellite DNA )又称可变数目串联重复（variable number tandem repeat, VNTR）,由15~65bp的基本单位串联而成,总长通常不超过20kb,重复次数在群体中是高度变异的。多态性由于重复单位之间的不平衡交换,从而产生不同等位基因
关于抗双链DNA抗体的基本介绍
抗双链DNA抗体是抗DNA抗体中的一种，是系统性红斑狼疮（SLE）的血清学标志物，而且是临床上最常进行的一项实验室检测指标。SLE是一种常见的慢性自身免疫性疾病，其发病原因和机制尚未明确，通常认为，是由于细胞和体液免疫紊乱，机体正常的免疫耐受性受损，导致对自身组织产生免疫反应而出现组织损害。抗d
关于DNA甲基化检测的基本介绍
DNA甲基化是基因表达调控的一种重要机制，DNA甲基化检测是指利用各种方法对肿瘤细胞DNA甲基化程度进行测定。在恶性肿瘤的发展中，甲基化的状态并不是一成不变，肿瘤细胞内全基因组的低甲基化程度与疾病进展、肿瘤大小和恶性程度都有密切的关系，DNA甲基化检测对肿瘤恶性程度的判断有重要意义。
关于DNA双螺旋的基本信息介绍
DNA双螺旋（外文名DNA double helix）指的是一种核酸的构象，在该构象中，两条反向平行的多核苷酸链相互缠绕形成一个右手的双螺旋结构。 DNA双螺旋的碱基位于双螺旋内侧，磷酸与糖基在外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架。碱基平面与假想的中心轴垂直，糖环平面则与轴平行，两条链皆为
关于随体DNA的基本信息介绍
随体DNA更广泛地是指染色体DNA和独立存在的小型DNA。 若将DNA放在氯化铯中，用平衡密度梯度离心，则按GC含量，在特定的密度部位形成带。采用该法将从细胞抽提的DNA分离，除主要的DNA带外，有时可出现小的带，后者就叫做随体DNA。有的随体DNA像细胞内的质环DNA那样是独立的分子，但也有
I型超敏反应的基本介绍
Ⅰ型超敏反应，亦称过敏反应（anaphylaxis）或变态反应（allergy） 。主要由特异性IgE抗体介导产生，可发生于局部，也可发生于全身。主要特征是：1.超敏反应发生快，消退也快；2.常引起生理功能紊乱，几乎不发生严重组织细胞损伤；3.具有明显个体差异和遗传倾向。4.肥大细胞和嗜碱粒细胞参
I型超敏反应的基本介绍
Ⅰ型超敏反应，亦称过敏反应（anaphylaxis）或变态反应（allergy）。主要由特异性IgE抗体介导产生，可发生于局部，也可发生于全身。主要特征是：1.超敏反应发生快，消退也快；2.常引起生理功能紊乱，几乎不发生严重组织细胞损伤；3.具有明显个体差异和遗传倾向。4.肥大细胞和嗜碱粒细胞参与5
DNA聚合酶及其应用
（一）大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶，包括 3种不同的酶活力：5′→ 3′聚合酶活性（模板， 带3′－OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ ）。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。
耐热DNA聚合酶简介
耐热DNA 聚合酶(Taq DNA 聚合酶)：1969年人们从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离出一种嗜热的水生真菌Thermusaquaticus,能在70~ 75C生长,从该菌分离纯化得到一种耐热的、依赖DNA 的DNA 聚合酶,简称Taq DNA 聚合酶。 耐热DNA聚合酶是一种可抗高温
DNA聚合酶及其应用
（一）大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶，包括 3种不同的酶活力：5′→ 3′聚合酶活性（模板， 带3′－OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ ）。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。
TaqDNA聚合酶的基本信息介绍
Taq DNA聚合酶是第一个被发现的热稳定DNA聚合酶，分子量65kD，最初由Saiki等从温泉中分离的一株水生噬热杆菌（thermus aquaticus）中提取获得。此酶能耐高温，在70℃反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后
关于PCR，你知道多少？（四）Taq－DNA聚合酶
在PCR反应中，毫无疑问的DNA聚合酶是最关键的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶 I的Klenow片段。但该酶存在很多缺陷，使之不能广为应用，比如：热稳定性差，每次DNA热变性后大部分酶都被灭活，需要重新加入，每个循环都要重新加入；Klenow酶反应温度较低，引物和模板容易形