什么是不对称PCR？
不对称PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一对引物，PCR扩增后产生大量的单链DNA(SSDNA)。这对引物分别称为非限制引物与限制性引物，其比例一般为50——100:1。在PCR反应的最初10——15个循环中，其扩增产物主要是双链DNA，但当限制性引物(低浓度引物)消耗完后，非限制性引物(高浓度引物)引导的PCR 就会产生大量的单链DNA。不对称PCR的关键是控制限制性引物的绝对量，需多次摸索优化两条引物的比例。还有一种方法是先用等浓度的引物PCR扩增，制备双键DNA，(dsDNA)，然后以此dsDNA为模板，再以其中的一条引物进行第二次PCR，制备ssDNA。不对称PCR制备的ssDNA，主要用于核酸序列测定。 ......阅读全文
什么是免疫PCR(immunoPCR)？
1.定义：免疫-PCR(immuno-PCR)它利用抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性来检测抗原，尤其适用于极微量抗原的检测。是新近建立的一种灵敏、特异的抗原检测系统。主要步骤有三个:①抗原-抗体反应，②与嵌合连接分子结合，③PCR扩增嵌合连接分子中的DNA(一般为质粒DNA)。 2
什么是PCR假阴性？
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
什么是荧光定量PCR？
DNA有着双螺旋结构，当温度达到95摄氏度时，双链的DNA会分解成为单链状态，而在温度到达72摄氏度左右时，DNA聚合酶会沿着磷酸到五碳糖的方向进行合成。聚合酶链反应PCR就是通过不断地调节温度，以数量级的速度增加DNA数量的方法。而实时荧光定量PCR是指，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信
什么是普通PCR技术？
Kary Mullis于1983年发明了聚合酶链式反应法（polymerase chain reaction ，PCR），据说是载着女友开车的时候，忽然灵光一闪，想到了PCR原理（论开车的好处）。Kary Mullis于1993 年获诺贝尔化学奖。《纽约时报》如此评价：" 具有高度原创性和重大意义，
什么是荧光PCR检测
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。原理： PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探
什么是PCR假阳性？
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
什么是梯度PCR仪
把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（温度梯度），通常有12种温度梯度，这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段，其最适退火温度是不同的，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增，就可以筛选出表达量高的最适退火温度，进行有效的扩增。主要用于研究未知D
什么是反向－PCR？反向－PCR的特点
常规 PCR 是扩增两引物之间的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物来扩增两引物以外的 DNA 片段。一般先用限制性内切酶酶解 DNA(目的基因中不存在该酶的酶切位点,且片段应短于2～3kb),然后用连接酶使带有黏性末端的靶片段自身环化,最后用一对反向引物进行 PCR,得到
PCR仪是个什么仪器
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一
什么是PCR熔解曲线法
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析，用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后，通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链DNA变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在
什么是实时荧光定量PCR
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结
什么是菌落pcr假阳性
利用菌落作为模板进行PCR扩增，验证该菌落里是否带有目标片段。但是由于PCR是一个级联放大的过程，所以即使菌落中不含有目标片段，而是菌落表面沾有一部分之前连接，转化中用的目标DNA，也会导致PCR获得扩增条带，从而误认为这个菌落已经带有了目标片段，称之为假阳性。可以通过提质粒酶切，或者测序验证，排除
什么是PCR实验室？
PCR实验室又叫基因扩增实验室，PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术，是用来研究聚合酶链式反应，放大特定DNA片段，其目的在于通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精度可达纳米级别，能够对患者的病情进行科学、准确、
什么是PCR熔解曲线法
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析，用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后，通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链DNA变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在
什么是实时荧光定量pcr
实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程
什么是PCR熔解曲线法
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析，用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后，通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链DNA变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在
什么是多重PCR核酸检测
一般的PCR反应仅应用一对引物，通过PCR扩增对单个基因序列进行复制，主要用于单一靶标的检测。多重PCR (Multiplex PCR)，是在同一PCR反应体系里加上两对或以上的引物，同时进行多个基因的扩增检测。 多重PCR反应最常见的类型是双重反应。在一定情况下，为了能够同时检测多个靶标基
什么是半定量PCR技术？
半定量PCR，是指从传统的PCR定性分析方法基础上发展起来、能够测定目标产物相对数量的PCR技术。传统的PCR分析方法通过以DNA或cDNA为模板进行扩增，来确定目标产物的存在与否。而半定量PCR是首先通过确定目标物PCR有限扩增至最大值的最低循环数，进而比较不同样品之间该目标物的PCR扩增产物数量
什么是PCR实验室
答：一、PCR实验室的内涵1、Pcr实验室又叫基因扩增实验室。2、PCR是聚合酶链式反应的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。3、通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别。二、PCR实验室的条件1、必须拥有标准的PC
什么是梯度PCR仪？它与传统PCR有什么区别？
梯度指的是PCR时，退火温度条件可以设置一系列不同的温度梯度，这样的仪器就是梯度PCR仪了，传统的PCR仪一次只能运行一个特定的退火温度，不同的退火温度需要多次运行，而梯度PCR仪一次就可以实现多个不同的退火温度，这样可以节约时间。
PCR检查是查什么的
PCR是现在实验室常用的技术手段之一。一般用于病原的检测，分子机制中各基因的检测以及遗传相关的检测。感染性疾病PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10~100基因拷贝，而目前病原体抗原检测方法一般需要1
什么是实时荧光定量PCR仪
实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常
什么是realtimePCR溶解曲线
如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继
什么是realtimePCR溶解曲线
如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继
什么是realtimePCR溶解曲线
如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继
什么是实时荧光定量PCR，检测指标是什么
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结
pcr退火温度是根据什么原则设计？
在模板变性后温度快速冷却至40℃～60℃(某个退火温度 )的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸
什么是pcr三个复孔
PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的缩写，它是一种用来扩增及检测DNA片段的技术。"PCR三个复孔"通常指PCR反应中一个样本所需的三个反应器，并且每个反应器都包含PCR反应所需的所有试剂。这三个反应器分别是：1. 样品反应器（Sample well）：样品
什么是pcr三个复孔
PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的缩写，它是一种用来扩增及检测DNA片段的技术。"PCR三个复孔"通常指PCR反应中一个样本所需的三个反应器，并且每个反应器都包含PCR反应所需的所有试剂。这三个反应器分别是：1. 样品反应器（Sample well）：样品
不对称PCR技术的定义和方法介绍
不对称PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一对引物，PCR扩增后产生大量的单链DNA(SSDNA)。这对引物分别称为非限制引物与限制性引物，其比例一般为50——100:1。在PCR反应的最初10——15个循环中，其 扩增产物主要是双链DNA，但当限制性引物(低浓度引物)消耗完后，非限制