关于细胞克隆的准备工作介绍

准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。......阅读全文

关于多克隆位点的应用介绍

  多克隆位点,是指载体上含有的一个人工合成的DNA片段,其上含有多个单一酶切位点,是外源DNA的插入部位,具备条件:是载体中的一段碱基序列,由数个酶切位点组成,这些位点在载体上都是单一位点。  多克隆位点(multiple cloning site, MCS),是包含多个(最多20个)限制性酶切位

关于-单克隆抗体药物的分类介绍

  单抗药物一般分为:治疗疾病(尤其是肿瘤)的单抗药剂、抗肿瘤单抗偶联物、治疗其他疾病的单抗。单抗药剂针对的靶点通常为细胞表面的疾病相关抗原或特定的受体。如:最早被美国FDA批准用于治疗肿瘤的单抗药物利妥昔单抗;抗肿瘤单抗偶联物,或称免疫偶联物(Immunoconjugate)由单抗与有治疗作用的物

关于T载体克隆的基本信息介绍

  重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。  DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶

关于基因克隆载体的基本信息介绍

  把能够承载外源基因,并将其带入受体细胞得以稳定遗传的DNA分子称为基因克隆载体。  在转基因研究中,单独一个包含启动子、编码区和终止子的基因,或者组成基因的某个原件,一般是不容易进入受体细胞的,即使采用理化方法进入细胞后,也不容易在受体细胞内稳定维持。目的基因能否有效转入受体细胞,并在其中维持和

关于人工染色体克隆载体的介绍

  人工染色体克隆载体实际上是一种穿梭克隆载体,含有质粒克隆载体所必备的第一受体(大肠杆菌)源质粒复制起始位点,还含有第二受体(如酵母菌)染色体DNA着丝点、端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因。这样的克隆载体在第一受体细胞内可以按质粒复制形式进行高拷贝复制,在体外与目的DNA片段重组后

关于单克隆抗体的制备过程介绍

  1.免疫动物  免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。  2.细胞融合  采用二

单克隆抗体的细胞融合关键介绍

1.技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。2.融合试验最大的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个无毒无菌的操作环境。

脑脊液检查的准备工作介绍

  脑脊液检验是指通过物理学、化学、细胞学等方法对脑脊液进行检验。脑脊液含有一定的细胞及化学成分,病理情况下,被血-脑屏障隔离的物质可进入脑脊液,导致其成分发生变化,脑脊液检验可了解这些变化,帮助进行疾病诊断。  脑脊液标本的获取需要进行腰椎穿刺,必要时可从小脑延髓池或侧脑室进行穿刺采集,因此应向患

什么是细胞克隆

  克隆技术  克隆,是英文“clone”一词的音译,在台湾与港澳一般意译为复制或转殖,是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组之后代的过程。  -{A|zh-cn:克隆;zh-hk:转植;zh-mo:转植;zh-tw:复制}-的英文‘clone’源于希腊语的‘klōn’(嫩枝)。在园艺

什么是细胞克隆

  克隆技术  克隆,是英文“clone”一词的音译,在台湾与港澳一般意译为复制或转殖,是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组之后代的过程。  -{A|zh-cn:克隆;zh-hk:转植;zh-mo:转植;zh-tw:复制}-的英文‘clone’源于希腊语的‘klōn’(嫩枝)。在园艺

什么是细胞克隆?

体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,简称:SCNT),又称体细胞克隆,是遗传学及发育生物学实验之中一种使用体细胞和卵细胞培育胚胎的常用技术手段。该技术提取去核卵母细胞,并把供体体细胞核移入卵母细胞中。体细胞核移植技术被应用于临床治疗及克隆技术中。世界上第一只克隆

关于单克隆抗体的动物免疫的介绍

  单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。  免疫原分为可溶性抗原和颗粒性(细胞)抗原,用无菌盐水稀释并与佐剂混合,腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液,在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫  周期

简述细胞克隆的培养过程

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

单克隆抗体制备饲养细胞的相关介绍

  在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feedercell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞

关于单克隆抗体的研究进展介绍

  单克隆抗体药物的发展起源于1975年,杂交瘤技术的问世使大量制备均一的鼠源单克隆抗体成为可能。1986年第一个抗移植后免疫排斥反应的鼠源单克隆抗体muromonab-CD3(OKT3),经美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration, FDA)批准上市,但是来

关于金属硫蛋白的克隆及检测介绍

  随着分子生物学技术的快速发展,使MT克隆技术、RNA印迹技术和PCR技术应用于MT的定量检测成为现实。金属硫蛋白克隆检测是通过MT多克隆和单克隆抗体,运用免疫扩散、免疫电泳等方法来检测组织中的MT-mRNA含量进行定量分析,这在MT分子的生物学研究中有很重要的意义。  金属硫蛋白多采用联机检测,

关于多克隆抗体的相关内容介绍

  天然的抗原分子中常含有多种不同的抗原表位,以该抗原刺激机体的免疫系统可同时激活多种B细胞克隆,产生的抗体中会含有多种针对不同抗原表位的抗体,因此称之为多克隆抗体。多克隆抗体主要从动物免疫血清、恢复期患者血清或免疫接种人群的血清中获得。多克隆抗体的优势是:作用全面,具有中和抗原、免疫调理、补体依赖

关于克隆PCR产物的对照实验相关介绍

  A)涂布未转化的感受态细胞。  如有菌落,表明氨苄失效,或污染上带有氨苄抗型的质粒,或产生氨苄抗型的菌落。  B)转化完整质粒,计算菌落生长数,测定转化效率。  例如,将1ug/ul质粒1:100稀释,1ul用于100ul感受态细胞转化。用SOC稀释到1000ul后,用100ul铺板。培养过夜,

转化细胞培养技术中的准备工作

一、转化细胞准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试等。 1、清洁、消毒、液体 直接接触细胞的用品要超净处理——无

关于B型超声检查的准备工作

  1.仪器条件  (1)首选实时超声诊断仪。凸阵、线阵和扇扫式仪器皆可应用;  (2)探头频率可根据扫查部位及病人胖瘦情况,选用2.5~10MHz的一种频率探头。  (3)辉度、对比度及增益调节应与所查部位及器官相适宜,深浅随时调节。  2.检查前准备  (1)为了显示盆腔脏器(子宫、卵巢、输卵管

关于复发性白内障切除术的准备工作介绍

  1、麻醉方式及术前准备:  术前详细询问病史,并进行视功能检查,裂隙灯显微镜检查,眼底检查,以及全身体格检查,对有出血倾向者还应进一步检查凝血功能。术前至少应滴抗生素眼药水3天。手术前晚及当天早上应口服镇静剂。术前1小时应用散瞳药将瞳孔充分散大。术前应剪睫毛及冲洗结膜囊。  2、适应证:  适用

关于急性化脓性骨髓炎的术前准备工作介绍

  按一般骨科手术前常规处理,但应注意:  1、详细检查并详阅X线片,明确死骨及死腔位置,确定手术切口途径等。  2、术前2~7d开始应用抗生素,用药前应作窦道分泌物细菌培养及抗生素敏感度测定。  3、创伤所致的骨髓炎,手术前应预防破伤风。  4、必要时准备输血。

关于超声引导组织学穿刺活检术的准备工作介绍

  1.超声诊断仪一般采用扇扫或小凸阵探头,附加导向装置。也可采用普通凸阵探头或线阵探头,附加导向装置。胸腹部采用3~5MHz,浅表部位宜采用5~7MHz以上的探头。经直肠前列腺活检,采用5~9MHz端射式腔内探头。  2.备手动负压抽吸式“配套活检针”,如Surecut针或SonopsyC1针。有

分子克隆介绍

各位小伙伴,大家还记得当初进实验室的时候接触到的一个实验技能是什么呢?没错,是 PCR 扩增。小编曾经也是,看着自己亲自配比 PCR 克隆扩增的每个组分,亲眼看着琼脂糖凝胶在紫外透光台上发出的幽绿色的荧光,也是深深被迷住。但总不可能成天就对着这个邪魅的荧光发呆,对吧?看久了,她会爱上你的眼

平板细胞克隆形成试验

概念:细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。基本步骤:1、取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个

平板细胞克隆形成试验

实验方法原理克隆形成试验是测定细胞增殖能力的有效方法之一,贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。细胞克隆形成率表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量,可以反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。实验材料细胞样品试剂、试剂盒胰蛋白酶胎牛血清DME

平板细胞克隆形成试验

克隆形成试验可反映细胞群体依赖性和增殖能力。一般细胞在体外增殖六代以上,其后代形成的细胞群体称为细胞集落或克隆。每个克隆由单一细胞而来,含有50个以上细胞,大小在0.3-1mm之间。通过克隆形成可检测各种理化因素对细胞克隆形成能力的影响。平板克隆形成试验可检测贴壁细胞细胞的克隆形成能力,软琼脂集落形

什么叫T细胞克隆

细胞克隆,是将一个单细胞从细胞群中分离出来单独培养,使之重新繁衍成一个新的单一细胞群的培养技术。未经克隆化的细胞具有异质性,经过克隆得到的是均一细胞集团。这里仅介绍T细胞与NK 细胞的克隆方法。基本原理:用限度稀释克隆形成法制备T 细胞克隆时,并非依赖细胞 的特性,而是将T 细胞在细胞培养板上稀释到

平板细胞克隆形成试验

平板细胞克隆形成试验             实验方法原理 克隆形成试验是测定细胞增殖能力的有效方法之一,贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活

平板细胞克隆形成试验

            实验方法原理 克隆形成试验是测定细胞增殖能力的有效方法之一,贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。细胞克隆形成率表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量,可以反映细胞群体依赖性和增殖能力两个