酶联免疫斑点试验的概念
中文名称酶联免疫斑点试验英文名称enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 义一种酶联免疫技术。用于测定分泌特异性抗体或细胞因子的单个细胞对特异性抗原的应答能力，及产生应答的细胞数量。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）......阅读全文
酶联免疫斑点试验的概念
中文名称酶联免疫斑点试验英文名称enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 义一种酶联免疫技术。用于测定分泌特异性抗体或细胞因子的单个细胞对特异性抗原的应答能力，及产生应答的细胞数量。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断
什么是酶联免疫斑点试验
常用于类风湿因子、IFN-γ等细胞因子分泌细胞的定量测定。 在作ELISPOT时，选择的特异性抗体应该具有高亲和力、高特异性、低内毒素的特性。选用的细胞激活物必须不影响细胞的分泌功能。
酶联免疫斑点试验的实验目的
中文名称酶联免疫斑点试验英文名称enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 义一种酶联免疫技术。用于测定分泌特异性抗体或细胞因子的单个细胞对特异性抗原的应答能力，及产生应答的细胞数量。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断
酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)
实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70％乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70％乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体（PBS稀释），4℃过夜 倒空板中包被液，轻轻在纸上拍干，用PBS
酶联免疫斑点实验(ELIspot)_酶联免疫斑点实验(ELIspot)2
实验方法原理ELISPOT技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作
酶联免疫斑点(ELISPOT)－FAQ
第一部分：关于ELISPOT1． 什么是ELISPOT检测?答:酶联免疫斑点 ( enzyme-linked immunosorbent spot, ELISPOT) 检测技术是通过两种高亲和力的特异性抗细胞因子抗体来检测淋巴细胞分泌细胞因子情况的一种方法。淋巴细胞在体内被抗原激活后，或者在体外培养
酶联免疫斑点实验(ELIspot)
实验材料 血液样品细胞样品试剂、试剂盒 70％乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材 PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤 一、包被96孔板 用70％乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体（PBS稀释），4℃过夜 倒空板中包被液，轻轻在纸上拍干，
ELISPOT酶联免疫斑点分析简介
ELISPOT 技术简介 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中
ELISPOT酶联免疫斑点分析简介
ELISPOT 技术简介 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中
ELISPOT（酶联免疫斑点法）技术
酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay, ELISPOT)是细胞免疫学研究中最敏感的检测方法之一，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK) 分泌细胞进行检测。由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA 和有限稀释法等具有更高的灵敏性，能
ELISPOT酶联免疫斑点分析简介（二）
ELISPOT 技术的现在1996年以来随着抗体制备、PVDF膜材等技术改良，ELISPOT 分析技术已经逐渐达到科研人员的期待，它已是当世公认最灵敏抗原特定T细胞的体外检测技术。藉由检验新鲜分离PBMC细胞所分泌cytokine的指纹，ELISPOT 分析技术可提示T细胞免疫系统的两个重要
ELISPOT酶联免疫斑点分析简介（三）
ELISPOT 技术优势图注：ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生 IFN- 的T细胞与一百万个抗原呈现细胞（Antigen Presenting Cells，APC）混合后，使用 ELISPOT 法（上图）、胞质内染法（中图）和 ELISA 法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年，Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率，经过不断发展，目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子
ELISPOT酶联免疫斑点分析简介（一）
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年，Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率，经过不断发展，目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因
酶联免疫斑点实验(ELIspot)_PVDF－Elispot法
实验方法原理细胞受到刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后， 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF孔板出现"紫色"的斑点表明细胞产生了细胞因子，通过ELISPOT酶联斑点分析系统对斑点的分析后得出
酶联受体的基本概念
这一类受体转导的信号通常与细胞的生长、繁殖、分化、生存有关。酶联受体也是跨膜蛋白，细胞内结构域常常具有某种酶的活性，故称为酶联受体。但并非所有的酶联受体的细胞内结构域都具有酶活性，所以，按照受体的细胞内结构域是否具有酶活性将此类受体分为两大类：缺少细胞内催化活性的酶联受体和具有细胞内催化活性的受体。
免疫斑点试验的原理
硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力，在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。因而，将抗原吸附于纤维素膜后，就可利用纤维素膜作为固相进行抗原抗体反应。当加入抗体后(即可与膜上的抗原结合，犎；后再加入带有标记物的抗体，使标记通过抗抗体和相应抗体的结合间接地交联于纤维素膜上。加入标记
标记抗体的应用技术——免疫斑点试验
实验方法原理硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力，在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。因而，将抗原吸附于纤维素膜后，就可利用纤维素膜作为固相进行抗原抗体反应。当加入抗体后（即可与膜上的抗原结合），然后再加入带有标记物的抗体，使标记通过抗抗体和相应抗体的结合间接地交联于纤维素膜上。
技术答疑：放免和酶联免疫试验的区别
先说区别：（1）放射免疫分析（RIA）通过放射活性分子共价交联至抗体或抗原上，免疫反应后测定放射活性分子的放射信号来定量检测相应抗体或抗原等，可用于测定包括病毒、细菌、寄生虫、肿瘤以及小分子药物等的多种抗原和抗体。由于该方法特异性好，灵敏度高，且仪器自动化，操作简便，样品制备简单等，因而自50年代末
丙型肝炎病毒的酶联免疫试验法检测介绍
即：放射免疫诊断（RIA）或酶联免疫试验（ELISA）检测血清中抗HCV1989年，Kuo等建立了抗-C-100放射免疫试验方法（RIA），随后 Ortho公司又研制成功酶联免疫试验方法（ELISA）检测抗-C-100。这两种方法均用重组酵母表达的病毒抗原（C-100-3，为NS4编码的蛋白，含
酶联免疫反应吸附试验（ELISA）共有几种类型
（一）双抗体夹心法双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。（3）加酶标抗体：使固
酶催化的概念
酶催化可以看作是介于均相与非均相催化反应之间的一种催化反应。 既可以看成是反应物与酶形成了中间化合物，也可以看成是在酶的表面上首先吸附了反应物，然后再进行反应。
酶标记的概念
中文名称酶标记英文名称enzyme labeling定 义一种免疫标记技术。即将酶与抗体或抗原结合，通过与底物反应而显色，用于示踪组织切片或细胞等标本中的相应抗原或抗体。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
漆酶的概念
漆酶(Laccase,EC 1.10.3.2)因最早为日本学者Yoshida发现于漆树漆液中而得名,是一种含铜的多酚氧化酶,属于蓝色多铜氧化酶家族[9]。按其来源,漆酶主要分为漆树漆酶、真菌漆酶及细菌漆酶[10]。白腐真菌是分泌漆酶的最主要菌种。
酶联免疫试验法（ELISA）检测抗C100的缺点
1. 抗-C-100出现较晚，约半数输血后丙型肝炎病人于输血后4～6个月抗-C-100首次阳转，因此，不宜作为急性丙型肝炎的常规实验室诊断； 2.抗-C-100不是中和抗体，也不是lgM抗体，而是lgG 抗体； 3.本法不够灵敏，少数丙型肝炎病人检测不到抗-C-100； 4.有非特异性，一
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
酶联受体的基本概述
这一类受体转导的信号通常与细胞的生长、繁殖、分化、生存有关 。酶联受体也是跨膜蛋白，细胞内结构域常常具有某种酶的活性，故称为酶联受体。但并非所有的酶联受体的细胞内结构域都具有酶活性，所以，按照受体的细胞内结构域是否具有酶活性将此类受体分为两大类：缺少细胞内催化活性的酶联受体和具有细胞内催化活性的受体
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原