蛋白质印迹法的概念和原理
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。......阅读全文
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
蛋白质印迹法实验结果“背景过高”的原因及解决办法
可能原因验证或解决办法膜没有完全均匀湿透使用100%甲醇浸膜5~10min洗膜不充分增加洗液体积和洗涤次数阻断不充分增加封闭液孵育时间，或者提高温度选择合适的封闭试剂（脱脂奶粉、酪蛋白等）二抗浓度过高降低二抗浓度检测过程中膜干燥保证充分的反应液，避免出现干膜现象曝光过度缩短曝光时间抗体与阻断蛋白有交
蛋白质印迹法实验结果没有阳性条带或条带很弱的原因
①目的蛋白质未充分转移到膜上或洗膜过度，应使用丽春红S染色以检查转膜效果，或减少洗膜次数，缩短洗膜时间；②抗体不匹配或一抗过期或一抗不能识别变性或还原的蛋白质，应注意选择特异性的抗体并在有效期内使用，或改用非变性凝胶系统；③抗体浓度低，应适当增加抗体浓度，或延长孵育时间；④样品中的目的蛋白质含量低或
燃烧的定义和燃烧法的概念
燃烧是一种放热发光的化学反应，也就是化学能转变成热能的过程。专业定义：燃烧是可燃物与氧化剂作用发生的放热反应，通常伴有火焰、发光和（或）发烟的现象（特点）。燃烧法是一种化学生产中的工艺。在化学中常常用来对物质进行成分分析。燃烧法也可以来鉴别纺织纤维或者用来处理废弃物。生活垃圾一般可以通过燃烧进行发电
免疫印迹法实验的操作步骤和注意事项
操作步骤 一蛋白质样品获得：细菌诱导表达后，可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞，真核细胞加匀浆缓冲液，机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃，13,000r离心15min。取上清液作为样品。 二电泳：制备电泳凝胶，进行SDS-PAGE。 三转移：（半干式转移） 1、电泳结束后将胶条
液相色谱仪液体样品预处理技术分子印迹法概念及作用
分子印迹属于超分子研究范畴。它是指制备对某一特定分子(模板分子或印迹分子)具有选择性的聚合物的过程。通常可描述为制造识别“分子钥匙”的人工“锁”技术。如在非共价型印迹中以感兴趣的目标分子充当模板,该分子通过氢键、静电作用、疏水作用等非共价键作用,对可聚合的功能单体进行组装,加入交联剂聚合,然后除去印
蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）底物化学发光－ECL－法
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western B
Western免疫印迹的原理
与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物
免疫印迹（Wb)的原理
(1)是一种蛋白质测定的技术,集合凝胶电泳的高分辨率,固定免疫测定的敏感及特异性和不需要对靶蛋白进行放射性核素标记,在固相膜上保持的时间很长等优点。(2)可以在样本中检测到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗体中检测到单克隆抗体,还可以对已经转移到固相膜上面的蛋白质进行连续的分析。
DNA斑点和狭线印迹实验——多样抽滤法
斑点和狭线印迹实验，可用于检测被印迹的1DNA制品中靶序列的相对丰度。主要应用（1）遗传病诊断；（2）DNA图谱分析；（3）检测样品中的DNA及其含量；（4）PCR产物分析。实验方法原理斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的技术。实验材料DNA试剂、试剂盒S
电印迹法的技术方法介绍
中文名称电印迹法英文名称electroblotting定 义将经凝胶电泳分离的蛋白质、DNA或RNA条带通过电泳按原位转移到另外的固体支持物上形成印迹的方法。此法比靠毛细管作用的印迹法效率高，速度快。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
关于DNA印迹法的基本介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离，使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性（使双链DNA变成单链），通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用，将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤
Southern印迹法的技术方法介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离，使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性（使双链DNA变成单链），通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用，将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或
蛋白质组学概念的起源和发展
蛋白质组学的诞生和发展，离不开多学科和技术的逐渐交叉融合。这些学科技术包括（但不限于）基因组学、生物化学、分析化学、自动化、基于电磁场的精密质谱仪、信号处理、数理统计和计算机科学。近年来，分子医学、大数据技术和人工智能的发展，进一步加速推动了蛋白质组学的成长，使之在精准医疗领域展示出越来越大的应
银量法的概念和应用范围
沉淀滴定法是通过滴定方式来测定被测物质含量的方法，其中，利用生成难溶性银盐来进行测定的方法叫做银量法 (argentimetry) 。银量法可以测定银离子，氯离子，碘离子等，也可以测定经过处理能定量转化为这些离子的有机物。
圆形纸层析的概念和原理
中文名称圆形纸层析英文名称circular paper chromatography定 义将样品点于距圆心适当距离的圆形滤纸上，溶剂从圆心水平辐射状向外周展开的纸层析。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
连续层析的概念和原理
中文名称连续层析英文名称continuous chromatography定 义将系列层析柱串联进行层析的方法。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
牛顿环的概念和产生原理
牛顿环，又称“牛顿圈”。在光学上，牛顿环是一个薄膜干涉现象。光的一种干涉图样，是一些明暗相间的同心圆环。例如用一个曲率半径很大的凸透镜的凸面和一平面玻璃接触，在日光下或用白光照射时，可以看到接触点为一暗点，其周围为一些明暗相间的彩色圆环；而用单色光照射时，则表现为一些明暗相间的单色圆圈。这些圆圈的距
离子排斥层析的概念和原理
中文名称离子排斥层析英文名称ion exclusion chromatography;ion chromatography exclusion;ICE定 义基于离子交换剂的唐南(Donnan)排斥力为基础的层析法。可使强电解质与弱电解质或非电解质分离。分离阴离子用强酸性高交换容量的阳离子交换树脂，
软琼脂培养的概念和原理
I.Macpherson等于1964年首创的培养法，这一培养法选择性地使已转化的细胞进行增殖，而抑制正常细胞的增殖。通常是将含有0.5%琼脂的培养基作为营养层铺在底部，然后再将含有细胞的少量软琼脂培养基（琼脂量约0.3%）倒在上面。正常细胞仍停留在接种时的状态，几乎不进行增殖，但已转化的细胞则以半浮
空间排阻层析的概念和原理
中文名称空间排阻层析英文名称steric exclusion chromatography定 义多孔的层析介质因孔径不同而对分子量不同的分子的扩散具有不同的选择作用，使各种分子量的物质得以分开的方法。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
梯度洗脱层析的概念和原理
中文名称梯度洗脱层析英文名称gradient elution chromatography定 义使洗脱液形成由低到高或由高到低的极性、浓度或pH梯度等，将层析柱上不同的组分洗脱出来的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
顶替层析的概念和原理
中文名称顶替层析英文名称displacement chromatography定 义用对固定相有更高吸附力的成分替代原来吸附的物质，使后者迁移而洗脱出来的一种很常用的非线性层析形式。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
共价层析的概念和原理
中文名称共价层析英文名称covalent chromatography定 义作为层析填料的固相载体，与流经它的欲分离物质发生化学反应并以共价键相连，洗去不与其反应的其他物质后，再以另一化学反应使目的物从载体上释放洗脱下来，载体则恢复其原来形式的层析技术。如巯基交换层析。应用学科生物化学与分子生物学
疏水层析的概念和原理
疏水层析也称疏水作用下层析（hydrophobic interaction chromatography HIC）从分离纯化生命物质的机制来看，也属于吸附层析一类。疏水层析和反相层析（reversed phase chromatography）分离生命物质的依据是一致的，利用固定相载体上偶联的疏水性
亲和层析的概念和原理
亲和色谱也称为亲和层析，是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离的物质有一定结合能力的分子，并且它们的结合是可逆的，在改变流动相条件时二者还能相互分离。亲和色谱可以用来从混合物中纯化或浓缩某一分子，也可以用来去除或减少混合物中某一分子的含量。
平衡分离过程的概念和原理
依据被分离混合物中各组分在不互溶的两相平衡体系分配组成不等的原理进行分离的过程叫做平衡分离过程。分离媒介可以是能量媒介如热和功或物质媒介如溶剂和吸附剂，有时也可两种同时应用。下表列出了常用的基于平衡分离的分离过程。如：蒸发、蒸馏、吸收、萃取、结晶等。