同位素标记亲和标签(ICAT)技术的技术原理
同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术，此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签( ICATs) 标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸，利用串联质谱技术，对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形，能非常准确的比较出两份样品蛋白质表达水平的不同。ICAT 的好处在于它可以对混合样品直接测试；能够快速定性和定量鉴定低丰度蛋白质，尤其是膜蛋白等疏水性蛋白等；还可以快速找出重要功能蛋白质。由于采用了一种全新的ICAT试剂，同时结合了液相色谱和串联质谱，因此不但明显弥补了双向电泳技术的不足，同时还使高通量、自动化蛋白质组分析更趋简单、准确和快速，代表着蛋白质组分析技术的主要发展方向。针对磷酸化蛋白分析以及与固相技术相结合ICAT技术本身又取得了许多有意义的进展，已形成ICA T 系列技术。......阅读全文
同位素标记亲和标签(ICAT)技术的技术原理
同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术，此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签(ICATs)标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸，利用串联质谱技术，对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形，能非常准确的比
同位素标记亲和标签(ICAT)技术的技术原理
同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术，此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签( ICATs) 标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸，利用串联质谱技术，对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形，能非常准确
蛋白质组的同位素标记亲和标签(ICAT)技术分离介绍
同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术，此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签( ICATs) 标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸，利用串联质谱技术，对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形，能非常
稳定同位素标记技术的原理
高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么这些元素是否都具有放射性呢？其实不然！所谓同位素是指具有相同原子序数（即质子数相同，因而在元素周期表中的位置相同），但质量数不同，亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出
稳定同位素标记技术的原理
高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么这些元素是否都具有放射性呢？其实不然！所谓同位素是指具有相同原子序数（即质子数相同，因而在元素周期表中的位置相同），但质量数不同，亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出
稳定同位素标记技术的原理
高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么这些元素是否都具有放射性呢？其实不然！所谓同位素是指具有相同原子序数（即质子数相同，因而在元素周期表中的位置相同），但质量数不同，亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出
稳定同位素标记技术的原理
高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么这些元素是否都具有放射性呢？其实不然！所谓同位素是指具有相同原子序数（即质子数相同，因而在元素周期表中的位置相同），但质量数不同，亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出
免疫亲和色谱法的技术原理
IAC 是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性的 SPE 技术,根据抗原抗体的特异性亲和作用,从复杂的待测样品中捕获目标化合物。其原理是将抗体与惰性微珠共价结合,然后装柱,将含抗原的溶液过免疫亲和柱,抗原与固定了的抗体结合,而非目标化合物则沿柱流下,最后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原。用适当
免疫亲和层析技术的工作原理
亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常，在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制，例如细胞裂解液，生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中，其中含有某类特定的生物大分子（从DNA到蛋白质，取决于实验需求）。等待一段时间使两相充分混合，随后将
蛋白质组研究系统
4700 TOF/TOF蛋白质组分析系统4700TOF/TOF蛋白质组分析系统是全球第一台TOF/TOF 串联飞行质谱仪，它作为目前的最新质谱技术，它一问世即被世界各大蛋白组研究中心和著名蛋白质实验室所争相采用。它由两级TOF和高能碰撞池组成，其工作原理是离子在MALDI源中产生并被加速和聚焦；对于
亲和色谱的技术特点
亲和色谱也称为亲和层析，是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离的物质有一定结合能力的分子，并且它们的结合是可逆的，在改变流动相条件时二者还能相互分离。亲和色谱可以用来从混合物中纯化或浓缩某一分子，也可以用来去除或减少混合物中某一分子的含量。
亲和层析中常用的组氨酸标签是什么原理
组氨酸是具有杂环的氨基酸，每个组氨基酸含有一个咪唑基团，这个化学结构带有很多额外电子， 对于带正电的化学物质有静电引力，亲和层析是利用这个原理来进行吸附的，亲和配体（也就是填 料）上的阳离子（一般是镍离子）带正电对组氨酸有亲和作用。组氨酸标签是原核表达载体上 6 个 组氨酸的区段，这个标签在 PH8
亲和层析－－GST标签（谷胱甘肽）
低耐压：谷胱甘肽琼脂糖微球大包装填料谷胱甘肽琼脂糖凝胶提供了一步纯化方法，并允许对含有谷胱甘肽结合序列的蛋白质进行快速、温和以及高特异性的纯化。通过使用含有还原型谷胱甘肽的缓冲液洗脱，已结合的 GST融合蛋白容易从填料中被取代。 该填料用于纯化谷胱甘肽 -S- 转移酶(GST) 以及带有 GST 标
亲和标记技术的应用
有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上，当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后，侧链即与邻近的氨基酸形成共价键，也就是说，结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上，并与相应抗体结合，经紫外线照射后，叠氮基转变成活化的硝基
亲和层析技术
亲和层析 （一）原理 亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。
DNA亲和层析的技术特点
DNA亲和层析是一种检测DNA与蛋白质相互作用的技术手段，属于亲和层析的一种，利用一些蛋白质能结合特定序列的DNA片段的原理，分离与特定DNA序列有相互作用的蛋白质。
亲和色谱法的技术特点
亲和色谱法（ affinity chromatography），将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相，利用与固定相不同程度的亲和性，使成分与杂质分离的色谱法。
亲和色谱法的技术简介
亲和色谱法（ affinity chromatography），将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相，利用与固定相不同程度的亲和性，使成分与杂质分离的色谱法。
DNA亲和层析的技术方法
DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步，即：一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱，用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白，用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。二、将第一步得到的能与DNA相
亲和色谱法的技术简介
利用酶与基质（或抑制剂）、抗原与抗体，激素与受体、外源凝集素与多糖类及核酸的碱基对等之间的专一的相互作用，使相互作用物质之一方与不溶性担体形成共价结合化合物，用来作为层析用固定相，将另一方从复杂的混合物中选择可逆地截获，达到纯化的目的。
亲和层析技术简介
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直接流出，从而与被分离的蛋白质分开，然后选用适当的洗脱液，改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来，这种分离纯化蛋白质
亲和层析技术介绍
在一对有专一的相互作用的物质中，把其中之一联结在支持物上，用于纯化相对的另一物质。常见的亲和对如：酶和抑制剂，抗原和抗体，激素和受体等。支持物为琼脂糖或纤维素等。
亲和层析实验技术方法
INTRODUCTIONThis protocol describes a method for removing antibodies that react with bacterially encoded proteins by passing a crude preparation of im
免疫亲和色谱技术是什么
亲和色谱固定相上键合配位体与被分离的生物活性分子之间的相互作用，可用锁匙结构的络合物的生成而表示这个过程。
亲和层析(affinity－chromatography)技术
（一）原理亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。此法具有高效、快速、简便等优点。（
大规模蛋白质相互作用研究方法进展（三）
图1 TAP亲和层析纯化原理[14] 注：A:标签中的ProteinA 与固化的IgG 结合缓冲液淋洗去除不能结合的杂蛋白，TEV 酶切分离ProteinA 和靶蛋白；B:利用CBP(Calmodulin binding peptide)-Calmodulin 的相互
亲和偶联－－组氨酸标签（Histag）
亲和层析法（IMAC）是目前最广泛使用的纯化技术，该技术是基于蛋白表面残基（组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等）与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合，该过渡金属 / 蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上，通常通过降低 pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。 低耐压ABT 提供两种螯合微球，使
蛋白质组的技术原理
双向凝胶电泳技术(2-DE)双向凝胶电泳技术与质谱技术是目前应用最为广泛的研究蛋白质组学的方法。双向凝胶电泳技术利用蛋白质的等电点和分子量差别将各种蛋白质区分开来。虽然二维凝胶电泳难以辨别低丰度蛋白，对操作要求也较高，但其通量高、分辨率和重复性好以及可与质谱联用的特点，使其成为目前最流行、可靠的蛋白
抗体的亲和层析法纯化技术
实验概要本实验介绍了抗体亲和层析法纯化的操作流程。实验原理亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化，富集某一含量较低的目的蛋白成为可能，因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外，如果配基与蛋白质的亲和能力很强，也可同时进行样品的浓缩。虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开，
免疫亲和色谱法－技术的应用
1)免疫萃取(innunoextraction)IAC 技术最简单的应用就是单纯作为样品的预处理手段,即制备免疫亲和柱,也称为离线(off-line)IAC。现在市场上已有克伦特罗、黄曲霉毒素等多种免疫亲和柱出售,使用效果非常好。2)IAC 联用技术IAC 联用技术也可称为在线 IAC。将 IAC