关于hat培养基的基本介绍

缺失这两种酶之一的细胞,在HAT培养基中,应该不能生存,只有发生融合或者其他情况下,才能使细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。 HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对£具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径(denovopathway)和中间合成途径(salvagepathway)。中间合成途径包括:通过HGPRT的催化作用把次黄嘌呤转化成次黄嘌呤核苷-磷酸(IMP),通过TK的催化把胸腺嘧啶核苷转化成脱氧胸腺嘧啶核苷-磷酸(dTMP),再进一步合成核酸。由于氨基蝶呤可阻碍起始合成途径,所以培养基中含有它时,细胞便只有中间合成途径,所以必须供给核苷酸。至于缺失中间合成途径的细胞,可失去增殖能力臻于死亡。根据这一点,不仅把混存于细胞群中的正常细胞,通过试管内培养进行选择,例如嘌呤的中间合成途径缺失株和嘧啶的中间合成途径缺失株,由于可以互补,所以两者的杂种细胞,即使在氨基蝶呤的存在条件下......阅读全文

关于hat培养基的基本介绍

  缺失这两种酶之一的细胞,在HAT培养基中,应该不能生存,只有发生融合或者其他情况下,才能使细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。  HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对£具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径(denovopathway)和中间合成途径(s

HAT选择性培养基的基本作用

HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对£具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径(denovopathway)和中间合成途径(salvagepathway)。中间合成途径包括:通过HGPRT的催化作用把次黄嘌呤转化成次黄嘌呤核苷-磷酸(IMP),通过TK的催化把胸腺嘧

HAT选择性培养基简介

  HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的培养基。HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对£具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径和中间合成途径(salvagepa-th■way)。中间合成途径包括:通过HGPRT的催化作用把次黄嘌呤转化

HAT选择性培养基的概念

HAT(H—Hypoxanthine次黄嘌呤,A—Aminopterin氨基蝶呤,T——Thymidine 胸腺嘧啶核苷)培养基的选择培养。HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。

HAT培养基在杂交瘤细胞筛选的应用

1964年Littlefield首先发明了HAT(H-Hypoxanthine次黄嘌呤,A-Aminopterin氨基蝶呤,T--Thymidine 胸腺嘧啶核苷)培养基的选择培养。 HAT培养基是指含有次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thym

HAT选择性培养基的用途和合成途径

1964年Littlefield首先发明了HAT(H—Hypoxanthine次黄嘌呤,A—Aminopterin氨基蝶呤,T——Thymidine 胸腺嘧啶核苷)培养基的选择培养。HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。

关于发酵培养基的基本介绍

  发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,要求发酵培养基的组成应丰富、完全,碳、氮源要注意速效和迟效的互相搭配,少用速效营养,多加迟效营养;还要考虑适当的碳氮比,加缓冲剂稳定pH值;并且还要有菌体生长所需

关于基本培养基的基本内容介绍

  基本培养基:仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,称为基本培养基(minimal medium,MM),有时用符号“[ - ]”来表示。不同微生物的基本培养基是不同的,基本培养基又称无机盐培养基。  一、基本培养基的配方:  蒸馏水1L  葡萄糖 0.5%  硝酸铵 1.0 g/L  磷酸二

关于基本培养基的分类介绍

  完全培养基:凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或者半天然培养基,称为完全培养基(complete medium,CM),有时用符号“[ + ]”表示。完全培养基营养丰富、全面,一般可在基本培养基中加入富含氨基酸,维生素和碱基之类的天然物质配制而成。  补充培养基:凡是只能满足相应的营养缺陷

关于固体培养基的形式—斜面培养基的基本介绍

  斜面培养基(agarslantculture-medium ):固体培养基(solid culture medium )的一种形式;制作时应趁热定量分装于试管内,并凝固成斜面的称为斜面培养基,用于菌种扩大转管及菌种保藏。  与斜面培养基相对和并列的概念是:平面培养基、高层培养基。固体培养基倒在培

关于种子培养基的基本信息介绍

  种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体,并使菌体长得粗壮,成为活力强的“种子”。所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好,这样可达到较高的溶解氧,供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH,其组成还要根据

关于PDA培养基的基本信息介绍

  PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。  一、PDA培养基的特点及用途:  一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。  按物理性状划分:固体培养基  按培养基成分划分:半合成培

关于固体培养基的基本内容介绍

  在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体培养基中加入1.5%~2.0%左右的琼脂,加热至100℃溶解,40℃下冷却并凝固,使其成为固体状态即为固体培养基。  固体培养基可以分为两类:一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿

关于免疫细胞无血清培养基的基本介绍

  人免疫细胞无血清基础培养基是无血清、不含异源动物成分(Xeno-free)的人免疫细胞培养基,可用于人淋巴细胞、CIK、DC、NK等各类免疫细胞的培养,具有很高的成活率、杀伤活性和扩增倍数,甚至优于国外进口同类优质产品。  无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培

关于固体培养基的基本原理介绍

  固体培养基的凝固剂一般不是微生物的营养成分,只起固化作用。理想的凝固剂应具备以下条件:不会被微生物分解利用;不会因高温灭菌而受到破坏;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;对微生物及操作人员均无毒害作用;透明度好、凝固力强;价格低廉,配制方便。常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,绝

完全培养基的基本介绍

  基础培养基添加血清、抗生素等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。基础培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需添加天然培养基,常用的是牛血清,因为牛血清中含有促细胞增殖的各种生长因子和其他多种有利于细胞生存的物质。此外为防止污染,培养液中尚需加一定量的抗生素。 完全培养基根据添

关于改良马丁培养基的基本信息介绍

  改良马丁培养基是医学实验、生物研究中应用非常广泛的一种体外诊断试剂,改良马丁培养基主要运用于血液、胸、腹水等标本中真菌生长的液体培养基,检测标本中是否有真菌存在,从而可以判断组织中是否被真菌感染。  一、改良马丁培养基的成分:  鱼蛋白胨、葡萄糖、酵母粉、三水磷酸氢二钾、七水硫酸镁、氯化钠、蒸馏

半固体培养基的基本介绍

  半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。  固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。  半固体

培养基制备基本方法的介绍

  1、培养基配方的选定  同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外.一般均应尽量收集有关资料.加以比较核对.再依据自己的使用目的加以选用,记录其来源。  2、培养基的制备记录  每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源.和各种成

细胞培养基的基本介绍

动物细胞培养必需的溶液平衡盐水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基础溶液。PH调整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羟乙基哌嗪乙烷磺酸)细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、胶原酶溶液。抗生素溶液:1)青、链霉素,每毫升培养液含100U青霉素

关于组合培养基的介绍

  合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如。高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种

关于培养基的配置介绍

  1.配料  配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。  2.溶解  淀粉溶解:少量冷水调成糊状  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。  

什么是HAT培养液?

中文名称HAT培养液英文名称HAT medium定  义内含次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)的培养液。在此培养液中,次黄嘌呤-鸟嘌呤核苷磷酸核糖基转移酶(HGPRT)或胸腺嘧啶核苷激酶(TK)缺陷型细胞不能生长。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

细胞培养基的成份基本介绍

细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。细胞培养基的成份基本介绍动物血清成分复杂,各种生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清对细胞生长很有效,但后期对培养产物的分离、提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量的动物血清来源有限,成

关于半固体培养基的介绍

  半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。  固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。  半固体

关于明胶培养基的原理介绍

  明胶培养基是在水浴锅中将NaCl-5g,蛋白胨-10g,牛肉膏-3g,明胶-120g,蒸馏水-1000mL这些成分溶化,不断搅拌。溶化后调pH 7.2~7.4,115°C 灭菌15min(温度过高明胶分子结构被破坏,不再凝固)。  明胶液化( gelaune liquefaction)指细菌把明

关于增殖培养基的成分介绍

  培养基的成分包括:碳源、氮源、矿物质,以及其他必需物质。这些成分通过生物反应过程,生成生物物质、生物化工产品,并放出CO2、H2O和热量。 培养基的成分还可以由发酵过程中所需的元素出发,如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要时还有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co

关于PDA培养基的配制介绍

  (1) PDA培养基— 称量和熬煮   按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。  (2)PDA培养基— 加热溶解  把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,

关于固体培养基的形式—制作斜面培养基和平板培养基的介绍

  培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。  (1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。  (2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台

关于液体培养基的配方的介绍

  牛肉膏蛋白胨液体培养基  (又称营养肉汤,用于培养细菌)  成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸馏水(或去离子水)1000mL,pH7.4士0.2.  制法:将各成分溶解于水中,于20~25℃条件下以1mol/LNaOH溶液用pH计校正pH7.4,分装三角瓶(装量以三角瓶容积的1/2