核酸基因分子探针
从化学和生物学的意义上理解,探针是一种已知特异性的分子,它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体,以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交,形成杂交体,再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断,称为分子杂交基因诊断。此法开始用于遗传性疾病的诊断如血红蛋白病的诊断、先天性遗传病的产前诊断。近来,已发展为诊断外源性病原体如病毒、细菌、原虫等的方法;内源性病变基因研究如癌基因检测、基因突变、基因缺失或变异引起的疾病的基因诊断;人类基因识别及其生理功能和衰老有关研究;在法医检测中有关性别鉴别和DNA指纹谱的鉴定。基因探针的研究引起了人们高度重视,在探针的制备技术上有重大突破。可将核酸分子探针检测比喻为在柴草堆中去找一根针的神奇技术。据美国华尔街分析家预言:“在生物技术市场中,下一个突破和具有吸引力的是基因探针”。它的巨大的开发潜力和经济......阅读全文
核酸基因分子探针
从化学和生物学的意义上理解,探针是一种已知特异性的分子,它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体,以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交,形成杂交体,再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断,称为
核酸分子杂交探针的介绍
若杂交的目的是识别靶DNA中的特异核苷酸序列,这需要牵涉到另一项核酸操作的基本技术─探针(probe)的制备。探针是指带有某些标记物(如放射性同位素32P,荧光物质异硫氰酸荧光素等)的特异性核酸序列片段。若我们设法使一个核酸序列带上32P,那么它与靶序列互补形成的杂交双链,就会带有放射性。以适当
分子杂交技术的核酸探针标记法
核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA
核酸探针标记
实验概要核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因
分子杂交基因探针的类型介绍
分子杂交基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类,根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针,RNA探针,cDNA探针,cRNA探针及寡核苷酸探针等几类,DNA探针还有单链和双链之分。
核酸探针的分类
核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。
核糖核酸探针
核糖核酸探针1.室温下,于1.5ml无菌微量离心管内依次加入:5μl 5×转录缓冲液1μg 模板DNA1.2μl 10 mmol/L rATP(终浓度为480μmol/L)1.2μl 10 mmo
分子杂交基因所用DNA探针应用介绍
DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获得DNA探针数量很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针。这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。这些DNA探针
核酸分子杂交的概念、基本原理、探针及类型
主要内容:一、分子杂交的概念 二、分子杂交基本原理 (一)DNA变性: 1、DNA变性的方法2、增色效应3、溶解曲线4、融解温度5、影响Tm值的因素。 (二)复性:退火一、分子杂交的概念: 分子杂交(molecular hybridization)指具有一定同源序列的两条核酸单链(DNA或RNA),
分子探针还是分子铁锤?
这一期的《Nat. Chem. Biol.》有一篇题为“The promise and peril of chemical probes”的评论文章,二十几个作者都是化学生物领头人,其中包括Stuart Schreiber和Brian Shoichet这样的大腕。文章回顾了早期分子探针的缺陷并对
摇核酸的荧光探针
DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA,如为获得单独的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜
核酸探针标记的简介
核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。
基因探针基因探针的基本介绍
基因探针基因探针(probe)就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列,它可以包括整个基因,也可以仅仅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。 1.探针的来源 DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe
新型蛋白质分子探针-核酸适配体-治疗高度恶性肺腺癌
肺癌是发病率与死亡率最高的恶性肿瘤,而肺腺癌是肺癌的主要病理亚型。以EGFR抑制剂为代表的靶向治疗及以PD1/PDL1靶向性抗体为代表的免疫治疗极大地改善了肺腺癌病人的生存预后。然而,肺腺癌中恶性程度最高、以细胞快速增殖为主要特征的PP(Proximal-Proliferative)分子亚型肺腺
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中,zui常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中,zui常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
核酸探针杂交检测技术介绍
一、核酸探针预杂交预杂交的目的是用非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)将待测核酸分子中的非特异性位点封闭,以避免这些位点与探针的非特异性结合。杂交反应是使单链核酸探针与固定在膜上的待测核酸单链在一定温度和条件下进行复性反应的过程。杂交
核酸探针的定义和分类
RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种:即特异性cDNA、cRNA探针和人工合成寡核苷酸探针。
分子探针为乳腺癌基因描绘“显像图”
近日,黑龙江省哈尔滨医科大学附属第四医院核医学科赵长久、付鹏等人在国家自然科学基金支持下,成功建立了一种快速、准确、及时、无创性地评价乳腺癌小鼠双微体扩增基因(MDM2)表达程度的影像学方法,使乳腺癌在分子水平发生改变的“早早期”被诊断成为可能。此项成果日前刊发于《美国核医学》杂志。 有文
核酸探针标记及原位杂交
一、核酸探针标记核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否
球形核酸探针让肿瘤细胞“发光”
记者从中科院合肥物质科学研究院获悉:近期该院智能所智能微纳器件研究室张忠平特聘研究员团队在肿瘤细胞检测及精准手术导航方面取得突破。相关研究成果日前发表在国际著名化学期刊上,并已申请国家发明ZL。 癌症是一种高发病率和高致死率疾病,其共性是细胞不受控制生长和永生化。由于肿瘤细胞不受控制生长和
球形核酸探针让肿瘤细胞“发光”
本报合肥5月3日电 记者从中科院合肥物质科学研究院获悉:近期该院智能所智能微纳器件研究室张忠平特聘研究员团队在肿瘤细胞检测及精准手术导航方面取得突破。相关研究成果日前发表在国际著名化学期刊上,并已申请国家发明ZL。 肿瘤细胞.jpg 癌症是一种高发病率和高致死率疾病,其共性是细胞不受
球形核酸探针让肿瘤细胞“发光”
记者从中科院合肥物质科学研究院获悉:近期该院智能所智能微纳器件研究室张忠平特聘研究员团队在肿瘤细胞检测及精准手术导航方面取得突破。相关研究成果日前发表在国际著名化学期刊上,并已申请国家发明ZL。 肿瘤细胞.jpg 癌症是一种高发病率和高致死率疾病,其共性是细胞不受控制生长和永生化。由
核酸探针标记及原位杂交
一、核酸探针标记 核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。 核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大
球形核酸探针让肿瘤细胞“发光”
记者从中科院合肥物质科学研究院获悉:近期该院智能所智能微纳器件研究室张忠平特聘研究员团队在肿瘤细胞检测及精准手术导航方面取得突破。相关研究成果日前发表在国际著名化学期刊上,并已申请国家发明ZL。 癌症是一种高发病率和高致死率疾病,其共性是细胞不受控制生长和永生化。由于肿瘤细胞不受控制生长和永生
球形核酸探针让肿瘤细胞“发光”
本报合肥5月3日电 记者从中科院合肥物质科学研究院获悉:近期该院智能所智能微纳器件研究室张忠平特聘研究员团队在肿瘤细胞检测及精准手术导航方面取得突破。相关研究成果日前发表在国际著名化学期刊上,并已申请国家发明ZL。 癌症是一种高发病率和高致死率疾病,其共性是细胞不受控制生长和永生化。由于肿
核酸探针标记及原位杂交3
3.注意事项(1)避光下准备反应体系:由于光敏生物素醋酸盐对光敏感,应避免光照。在分装试剂及核酸与光敏生物素混合时应在暗室安全灯下操作。(2)核酸纯度:由于光敏生物素能与任何有机物反应,因此用做标记探针的核酸要高度纯化。用作标记探针的核酸最好不用Tris溶液溶解,Tris中所含氨基会干扰标记。(3)
核酸探针标记及原位杂交4
(三)试剂配制配制溶液过程中均需戴手套,液体配制均用超净水,所用瓶子均经160℃烘烤4h,主要目的是去除RNA酶。1.DEPC水 将DEPC按1‰浓度加入超净水中,充分混合后静置过夜,15~20min高压消毒,之后室温避尘存放。2.0.1mol PBS pH 7.4A液:0.1mol NaH2PO4
核酸探针在其他方面的应用
1、检测抗生素耐药性核酸探针可直接从标本中测出细菌的耐药基因。Perine 等用 DNA 探针查出尿路渗出液中的大多数淋球菌含有TEM 型β-内酰胺酶而对青霉素 G 耐药。2、流行病学调查核酸探针可用于研究医源性感染中爆发流行时大量的流行菌株间的同源性,结果易于分析和解释。3、恶性肿瘤最引起人们注意