关于线粒体膜电位变化的检测

在凋亡研究的早期,从形态学观测上线粒体没有明显的变化。随着凋亡机制研究的深入,发现线粒体凋亡也是细胞凋亡的重要组成部分,发生很多生理生化变化。例如,在受到凋亡诱导后线粒体转膜电位会发生变化,导致膜穿透性的改变。MitoSensorTM,一个阳离子性的染色剂,对此改变非常敏感,呈现出不同的荧光染色。正常细胞中,它在线粒体中形成聚集体,发出强烈的红色荧光。凋亡细胞中,因线粒体穿膜电位的改变,它以单体形式存在于细胞液中,发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。CLONTECH公司的ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit就采用这种原理来检测线粒体膜电位的变化。但是,这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。......阅读全文

NOVOstar钙流检测系统在量度分离线粒体对钙离子吸收中...

NOVOstar钙流检测系统在量度分离线粒体对钙离子吸收中的应用实而不华的钙流检测系统-NOVOstar 中科院上海生科院神经所刚于七月份在著名科学期刊PNAS (vol.110, no.27, 11011-11016) 发表了题为《Canonical transient receptor pote

共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针

一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛,以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1.细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前两者为单波长激光探针,利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca

线粒体介导的凋亡过程介绍

当线粒体的膜电位下降,线粒体膜通透性增加,线粒体内促凋亡因子(例如:当线粒体的膜电位下降,线粒体膜通透性增加,线粒体内促凋亡因子(例如:Cyt C、AIF、SMAC/DIABLO、HTRA2/OMI、ENDOG)释放到胞质中。Cyt  C释放到胞内以后,与Apaf-1相互作用,在ATP和dATP的协

线粒体通透性转换孔的生理学特性

  正常生理情况下, PT允许相对分子质量 < 1. 5 ×10 的离子自由通过, 通过氧化磷酸化来驱动 ATP 合成酶, 维持线粒体膜电位及细胞内外的离子平衡。但在凋亡信号刺激下, PT 完全开放, 直径约3. 0 nm,3使相对分子质量 > 1. 5 ×10 的与可溶物质非选择性地自由通过, 这

细胞生物学术语膜电位

膜电位(Membrane Potential)通常是指以膜相隔的两溶液之间产生的电位差。一般是指细胞生命活动过程中伴随的电现象,存在于细胞膜两侧的电位差。膜电位在神经细胞通讯的过程中起着重要的作用。1791年意大利解剖学家加伐尼(L.Galvani)偶然发现,如果将蛙腿的肌肉置于铁板上再用铜钩钩住蛙

TDP43可导致线粒体损伤并激活线粒体去折叠蛋白反应

  TDP-43是一个多功能的DNA和RNA结合蛋白,由TARDBP基因编码,在细胞内的RNA转录、选择性剪接及mRNA稳定性调节等过程中发挥功能。在ALS (amyotrophic lateral sclerosis)和FTLD (frontotemporal lobar degeneration

关于法氏囊的剖检变化-介绍

  法氏囊呈黄色胶冻样水肿、质硬、粘膜上覆盖奶油色纤维素性渗出物,有的法氏囊粘膜严重发炎、出血、坏死、萎缩。死鸡严重脱水、腿和胸部肌肉有出血,颜色暗红。肾肿胀,肾小管和输尿管充满白色尿酸盐。脾胀及腺胃和肌胃交界处粘膜出血。

关于肾盂积水的病理变化

  尿路即使完全阻塞后,在一定时期内肾小球滤过仍继续进行。但因肾小球滤液不能排出,故一方面向肾间质及周围组织弥散,最后进入淋巴管或静脉;另方面在肾盏肾盂内蓄积,使肾盂肾盏逐渐扩张,肾盂内压力增高,压迫肾组织及其中的血管,使血流减少,以后肾组织受压逐渐萎缩。早期主要累及肾小管,表现为肾浓缩功能降低;以

抗线粒体2型抗体检测的标本采集

  1.患者准备检查前一天晚上8点后避免进食和剧烈运动。患者采血前最好休息15分钟以上。2.标本类型常规采集患者空腹静脉血液4ml置于无抗凝剂的一次性真空采血管中备用。3.标本运送标本采集后应明确标识并由专人及时送检,并注意运送过程中的生物危害性。4.标本处理(1)标本置于37℃孵箱孵育待血液完全凝

华东师范大学最新文章构建药物筛选模型

  来自华东师范大学生命科学学院,中国科学院上海药物研究所的研究人员建立了一种快速且高效地分析线粒体膜电位的高通量筛选模型,通过对线粒体染料JC-1浓度及孵育时间,待筛选化合物孵育时间等实验条件的优化, 确立了筛选条件,并在鱼藤酮,丙二酸,抗霉素等线粒体抑制剂中进行验证,这将为发现治疗代谢综合征

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(二)

第三种 线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。线粒体

关于线粒体糖尿病的合并症介绍

  线粒体糖尿病(MIDD)常合并有MELAS综合征(Mitochondrial Encephalomyopathy, Lactic Acidosis, and Stroke-like episodes):线粒体性脑肌病,乳酸酸中毒,卒中样发作综合征,病者除有肌无力外,伴发肌阵挛癫痫、共济失调、视神

关于线粒体脑肌病的基因治疗介绍

  基因治疗策略包括降低突变型mtDNA/野生型mtDNA的比例、使用错位表达及异质表达、输入其他同源性基因以及利用限制性内切酶修复突变型mtDNA等。如用人胞质体(含正常线粒体无细胞核的细胞)对缺陷细胞(含缺陷mtRNA,呼吸链功能减退的细胞)进行基因补救治疗,能成功地使缺陷细胞呼吸链功能恢复正常

关于线粒体神经胃肠型脑肌病的简介

  线粒体神经胃肠型脑肌病( Mitochondrial Neurogastrointestinal Encephalopathy Disease,MNGIE) 是一种特殊类型的线粒体肌病,又被称为“多发性神经病伴眼肌麻痹、白质脑病、假性肠梗阻( POLIP) ”,“眼部及胃肠肌营养不良( OGIM

细胞凋亡检测方法总览(早期检测、晚期检测和mRNA水平)

细胞凋亡的检测方法,从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。一、早期检测1、PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测2、细胞内氧化还原状态改变的检测3、细胞色素C的定位检测4、线粒体膜电位变化的检测二、 晚期检测1、TUNEL2、LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测)当

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...(一)

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基于细胞实验的表型分析简介当需要持续获得高质量、高精确的数据时,那么迫切需要一台全自动基于细胞检测实验的多参数分析系统。一台紧凑的,全自动微孔板图像分析系统可用于多参数实验,如利用诱导多功能干细胞 (iPSC) 分化为心肌细胞,神经细胞和肝细胞研究中。

简化细胞凋亡研究的工具

有许多凋亡触发器,其中包括某些细胞因子,蛋白质 - 蛋白质相互作用和化学品。一旦开始凋亡,线粒体膜电位变化,可以测量通过流式细胞仪使用BD:MitoScreen(JC-1)流式细胞仪检测试剂盒。  线粒体膜电位导致线粒体膜通透性增加,并释放出可溶性蛋白,如细胞色素C和亲半胱天冬酶的增加。  半胱天冬

线粒体的形状

  线粒体一般呈短棒状或圆球状,但因生物种类和生理状态而异,还可呈环状、线状、哑铃状、分杈状、扁盘状或其它形状。成型蛋白(shape-forming protein)介导线粒体以不同方式与周围的细胞骨架接触或在线粒体的两层膜间形成不同的连接可能是线粒体在不同细胞中呈现出不同形态的原因。

线粒体的功能

主要功能:1,能量转化线粒体是真核生物进行氧化代谢的部位,是糖类、脂肪和氨基酸最终氧化释放能量的场所。线粒体负责的最终氧化的共同途径是三羧酸循环与氧化磷酸化,分别对应有氧呼吸的第二、三阶段。2,三羧酸循环糖酵解中生成的每分子丙酮酸会被主动运输转运穿过线粒体膜。进入线粒体基质后,丙酮酸会被氧化,并与辅

线粒体的组成

  线粒体的化学组分主要包括水、蛋白质和脂质,此外还含有少量的辅酶等小分子及核酸。蛋白质占线粒体干重的65-70%。线粒体中的蛋白质既有可溶的也有不溶的。可溶的蛋白质主要是位于线粒体基质的酶和膜的外周蛋白;不溶的蛋白质构成膜的本体,其中一部分是镶嵌蛋白,也有一些是酶。线粒体中脂类主要分布在两层膜中,

线粒体的作用

线粒体的作用:1、细胞有氧呼吸的主要场所线粒体是一种存在于大多数细胞中的用两层膜包被的细胞器,是细胞有氧呼吸的主要场所,被称为“power house”,其直径在0.5到1.0微米左右。大多数真核细胞或多或少都拥有线粒体,但它们各自拥有的线粒体在大小数量以及外观等方面上都有所不同。线粒体是一些大小不

线粒体的结构

  线粒体由外至内可划分为线粒体外膜(OMM)、线粒体膜间隙、线粒体内膜(IMM)和线粒体基质四个功能区。处于线粒体外侧的膜彼此平行,都是典型的单位膜。其中,线粒体外膜较光滑,起细胞器界膜的作用;线粒体内膜则向内皱褶形成线粒体嵴,负担更多的生化反应。这两层膜将线粒体分出两个区室,位于两层线粒体膜之间

线粒体的分布

  线粒体分布方向与微管一致,通常分布在细胞功能旺盛的区域:如在肾脏细胞中靠近微血管,呈平行或栅状排列;在肠表皮细胞中呈两极分布,集中在顶端和基部;在精子中分布在鞭毛中区。在卵母细胞体外培养中,随着细胞逐渐成熟,线粒体会由在细胞周边分布发展成均匀分布。线粒体在细胞质中能以微管为导轨、由马达蛋白提供动

线粒体的功能

  能量转化  线粒体是真核生物进行氧化代谢的部位,是糖类、脂肪和氨基酸最终氧化释放能量的场所。线粒体负责的最终氧化的共同途径是三羧酸循环与氧化磷酸化,分别对应有氧呼吸的第二、三阶段。细胞质基质中完成的糖酵解和在线粒体基质中完成的三羧酸循环在会产还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicot

重大发现!Nature揭示两种线粒体分裂方式

  化学家安托万-拉瓦锡(Antoine Lavoisier)在法国大革命期间被送上断头台前不久,对称为呼吸的生物能量产生过程做出了关键性的发现。他的见解之一是认识到,正如他所描述的那样,呼吸是“只是碳和氢的缓慢燃烧,这类似于灯或点燃的蜡烛的工作方式,从这个角度来看,呼吸的动物是名副其实的易燃体,它

关于线粒体膜上的Bcl2的作用介绍

  (1)Bcl-2能改变线粒体巯基的氧化还原状态来控制其膜电位从而调控细胞凋亡。在细胞凋亡中,线粒体的巯基可能组成了胞内氧化还原电位的传感器,Bcl-2可能是通过抑制谷胱甘肽(GSH)的外泄,降低胞内的氧化还原电位,来抑制细胞凋亡的;  (2)Bcl-2能调节粒体膜对一些凋亡蛋白前体的通透性。Bc

激光共聚焦显微镜技术的应用

最近需要做成骨细胞培养的实验,师兄给个建议,说是可以做激光共聚焦显微镜 检测。关于这个我还真不知道该如何下手设计这个实验,网上搜集了一些资料,分享给大家,供参考。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世纪80年代发展起来的一项具

条件恐惧实验对于小鼠认知功能和线粒体功能的影响

【摘要】 目的观察条件恐惧实验对于小鼠认知功能和线粒体功能的影响。方法成年雄性C57BL/6小鼠60只随机分为四组:假手术+生理盐水组(SN组,”一10)、假手术+SS 31组(ss组,n—lo)、盲肠结扎穿孔(CLP)+生理盐水组(CN组,”一20)和CLP+SS31组(cs组,”一2

细胞凋亡及检测工具

程序性细胞死亡(Programmed Cell Death, PCD)是有机体在漫长的进化过程中发展起来的细胞自杀机制,在清除无用的、多余的或癌变的细胞,维持机体内环境稳态方面发挥重要作用。程序性细胞死亡调控机制的失调与多种疾病的发生发展相关,如神经变性性疾病、自身免疫病、恶性肿瘤、衰老、病原微