引物修补的定义
中文名称引物修补英文名称primer repair定 义当DNA模板受损时,可根据其损伤情况,以一套或几套引物借助核酸聚合酶的作用合成新的互补核酸链,以修复损伤形成的错误序列的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文
引物修补的定义
中文名称引物修补英文名称primer repair定 义当DNA模板受损时,可根据其损伤情况,以一套或几套引物借助核酸聚合酶的作用合成新的互补核酸链,以修复损伤形成的错误序列的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
引物修补的概念
中文名称引物修补英文名称primer repair定 义当DNA模板受损时,可根据其损伤情况,以一套或几套引物借助核酸聚合酶的作用合成新的互补核酸链,以修复损伤形成的错误序列的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
测序引物的完整定义
DNA测序是根据DNA聚合反应(服从碱基互补配对原理)设计出来的,聚合反应需要引物(primer)。所谓引物就是一线性片段(和模版链互补),其上带有能与核苷酸相结合的游离3'-羟基,这个3'-羟基位于引物的3'末端,称为引物末端。也就是,新链中的一部分是早已就位的,而且所有D
兼并引物PCR技术的定义
1.概述:兼并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。兼并度越低,产物特异性越强。2.设计引物原则:尽量选择兼并性小的氨基酸,并避免引物3’末端兼并,因为3'端最后3个碱基的退火足以在错误位点起始PCR;次黄嘌呤可以同所有的碱基配对,降低引物的退火温度。
序列特异性引物的定义和技术特点
序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统;在引物延伸时,A与B同时竞争靶序列上同一复性位点,扩增反应后,经凝胶电泳及放射自显影,胶片上的显带是标记同位素的引物所扩增的产物。
引物设计的引物设计原则
1、长度:15—30bp,其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38,否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度),从而降低产物的特异性。2、G十C含量:应在40%一60%之间,PCR扩增中的复性温度一般较Tm值低等于引物的Tm值减去5—10度。引物长度小于20时,
引物设计的引物设计原则
1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之间,Tm值曲线以选取72度附近为佳,5'到 3
引物设计的引物设计原则
1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之间,Tm值曲线以选取72度附近为佳,5'到 3
引物设计的引物设计原则
1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之间,Tm值曲线以选取72度附近为佳,5'到 3
引物溶解引物保存
1. 如何测定引物的OD值?用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其吸光度
引物溶解引物保存
1. 如何测定引物的OD值? 用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其
成人疝修补方法改进
近三年来,我们对成人腹股沟斜疝在修补方式上进行改进,其中手术52例,2例失访,随访最长者3年,最短4个月,平均20个月,疗效好,无复发,现介绍如下: 1、临床治疗 男性病人49例,女性病人1例,最大79岁,最小20岁;其中9例男性为复发疝。 2、手术方法 采用腹股沟斜
实验电炉炉衬修补方法
当实验电炉炉衬遍地有若干的毁伤时,必需进行修补,以延伸炉衬寿命和避免因为炉衬毁伤而形成变乱实验电炉炉衬的修补部位及办法如下:1、出铁口耐火资料与炉壁接缝处开裂或毁伤的修补可用不定形耐火资料推打修补,修补局限较大时要用柴炭等烘干;2、实验电炉侧壁开裂的修补 普通在1m m以下的裂纹不需修补而可以持续
搪玻璃反应釜的修补
化工行业大量使用的搪玻璃,由于介质的腐蚀性、反应条件忽冷忽热、运输、使用、人为等问题,总会出现这样那样的搪瓷层损坏,造成不必要的生产停止,如大面积脱落,建议只能返厂重新搪瓷。搪瓷釜价格较高,微小损坏时没有必要整台设备更新,这就需要选用合适的修补法,用(劲素成)JS916马上进行修补,否则,就会
设计引物遵循原则、引物保存和各种PCR的引物设计
一 设计引物应遵循以下原则1 、引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。2 、引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。3 、引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上
新型胶水可修补心脏伤口
鼻涕虫留下的发白、黏滑的痕迹为研发一种新型胶水提供了启示。这种胶水极其灵活,并且能同体液相容。 和其他类型的手术用胶水不同,被称为牢固粘合剂的新型密封剂没有毒性,并且能粘住诸如心脏、肝脏等湿滑组织,即便当它们的表面覆盖有血液时。这是因为密封剂含有带正电且能同生物组织形成稳定连接的分子。研究人
实验电炉炉衬修补办法
当实验电炉炉衬遍地有若干的毁伤时,必需进行修补,以延伸炉衬寿命和避免因为炉衬毁伤而形成变乱实验电炉炉衬的修补部位及办法如下: 1、出铁口耐火资料与炉壁接缝处开裂或毁伤的修补 可用不定形耐火资料推打修补,修补局限较大时要用柴炭等烘干; 2、实验电炉侧壁开裂的修补 普通在1m
实验电炉损耗原因及修补
实验炉损失原因和修复实验电炉炼钢电炉电极损耗的主要原因是:冶炼过程是由化学损失和氧化物电极打破物理磨损造成的。化学损失的原因是:氧枪的长度和电阻炉壁角设计、废钢和不合理的明清炉门氧枪氧电极表面氧化造成了严重的交通过于高,化学损失增加。调整角度的氧枪的解决方案:1优化,避免吹氧直接影响电极;2使用过程
实验电炉损耗原因及修补
实验电炉炼钢电炉电极损耗的主要原因是:冶炼过程是由化学损失和氧化物电极打破物理磨损造成的。化学损失的原因是:氧枪的长度和电阻炉壁角设计、废钢和不合理的明清炉门氧枪氧电极表面氧化造成了严重的交通过于高,化学损失增加。调整角度的氧枪的解决方案:1优化,避免吹氧直接影响电极;2使用过程,优化氧枪控制氧枪大
PCR的引物
特异性的引物决定了所扩增的DNA片段,引物(primer)本质上是人工合成的小片段寡聚核苷酸片段,一般不超过50个碱基(通常18-25个),它们与所要扩增的DNA片段的正链与负链的末端完全互补。在“退火”时引物结合于DNA模板的起始和终止点,DNA聚合酶结合到这两个位置,开始合成新的DNA链。
通用引物和特异性引物的区别
通用引物,含义为克隆位点两旁的序列匹配,目的是引扩出DNA片段,主要用来测序。而序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。通用引物是一般和载体多克隆位点两旁的序列匹配,或者是与载体里面的一些启动、终止元件匹配。这样不管载体插入什么DNA片段,都可以用通用引物扩出来。通用引物可以用来测序,但是只是“通用
实验室反应釜的修补
有时,我们可以通过修补的方式,使定制反应釜恢复正常,重新投入使用,可以大程度的节约成本。以下是关于使用耐腐蚀金属修补实验室反应釜的方法,供参考。 一、利用耐蚀金属片覆盖于实验用磁力反应釜损坏面上,然后用同种金属做成的螺钉紧固。此法简单易行,如施工精细,则有较长的使用寿命。 二、利用耐蚀金属和耐蚀
关于鼻甲黏膜瓣修补法的介绍
(1)中鼻甲黏膜转位法将穿孔缘切除少许以形成新的创面。在同侧中鼻甲上做倒“U”形切口,由上而下剥离黏膜瓣至蒂部,将此黏膜瓣向下翻盖于穿孔并将其缝合于穿孔周围的创缘上。对侧鼻腔填塞,2~3周后切断蒂部。 (2)下鼻甲黏膜转位法方法同上,所不同的是于下鼻甲表面做正“U”形切口,黏膜瓣向上翻盖于高于
大型实验电炉炉衬的修补办法
炉衬(furna linings)是指用于对金属进行精炼(refining)的炉子的炉壁。使用耐高温陶瓷(refractory ceramics)制成。当实验电炉炉衬遍地有若干的毁伤时,必需进行修补,以延伸炉衬寿命和避免因为炉衬毁伤而形成变乱。实验电炉炉衬是比较容易坏的地方,所以要更加注重实验电炉炉
快速了解反转录引物随机引物
随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时,可采用随机六聚体这一非特异的引物来拷贝全长mRNA。 1.特异性引物一般在增低丰度目的基因才选择使用,用得比较少。一般都推荐用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物。由于rna的二级结构破坏不完全,导致特异性
什么是上游引物和下游引物
虽然这个问题很简单,但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物(引物就是单链寡聚核苷酸,基因扩增需要从引物开始),同理,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。具体示意如下:(上下两条长线代表DNA模板)5'-----------------------
Cell子刊:修补“破碎的心”的关键
最近,美国索尔克生物研究所的研究人员,通过再激活动物细胞中存在的长期休眠的分子机制,治愈了活体小鼠的受损心脏,这一发现可以帮助人类心脏疾病的新疗法铺平道路。 这一新的研究结果,发表在2014年11月6日的《Cell Stem Cell》杂志,该研究表明,尽管成年哺乳动物通常不能再生受损组织,但
关于反应罐的的修补问题介绍
反应罐的修补: 化工行业大量使用的反应罐,由于介质的 腐蚀性、反应条件 忽冷忽热、运输、使用、人为等问题,总会出现这样那样的 搪瓷层损坏,造成不必要的生产停止,如大面积脱落,建议只能返厂重新搪瓷。搪瓷釜价格较高,微小损坏时没有必要整台设备更新,这就需要选用合适的修补法,用(劲素成)JS916马
PCR引物
PCR Primer Design and Reaction Optimization (Molecular Biology Techniques Manual) PCR Primer Design (Newman Lab) PCR Primer Design (Eppendorf)Detail
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