重组蛋白的定义
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的 宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统；1.原核表达系统：最常用的大肠杆菌蛋白表达，真核表达系统如酵母，哺乳动物细胞蛋白表达（常用的细胞CHO，HEK293）及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用 转基因动物的 乳腺或者植物产生，产生的重组蛋白作为生物制药的产物，在医学中作用显著。利用基因工程技术，可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。 以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例：其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的 启动子等调控组件重组在一起，通过 显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会 泌乳）的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋......阅读全文
重组MVA活体免疫染色实验
实验方法原理活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara （MVA），因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑，并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰／乙醇抗外源基因表达蛋白一抗辣根
杂交瘤细胞和重组抗体
在过去的二十五年里，利用杂交瘤细胞生产了成千上万的鼠单克隆抗体。人们用同样的技术从转基因鼠中克隆人类的抗体，并设计了全长型抗体和重组片段，它们可以被用于多种诊断和治疗。而且如果他们能在哺乳动物细胞，牛奶及植物中表达，就可以大量获得。 一个世纪以前，Paul Ehrlich提出了著名的侧链理论来解
关于同源重组的Holliday模型介绍
Holliday于1964年提m Holliday模型，将同源重组分为四个阶段。 1．同源序列配对。 2．形成Holliday结构，即两段同源序列的单股同源DNA的同一磷酸二酯键被水解，同源末端交换，连接，形成Holliday结构（HoIJiday structure，又称Holliday连
细胞因子重组要求及状态
重组细胞因子要求：1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。4.
关于转座重组的转座效应介绍
DNA转座可以影响转座位点基因的功能和活性： ①转座位点位于编码序列内，转座子插入导致基因突变。 ②转座位点位于调控序列内，转座子插入影响基因表达。 ③在转座位点插入转座子基因，赋予新表型，例如抗药性。 ④链内复制转座后，转座子拷贝之间发生位点特异性重组，导致缺失或倒位。
关于位点特异重组的简介
位点特异性重组（sile-specific recombinalion）是指发生在特定的DNA序列之间的片段交换，序列之间不要求有同源性。位点特异性重组发生于包括基因表达调控、胚胎发育过程中的程序性基因重排、免疫球蛋白基因的重排、一些病毒DNA和质粒复制周期中发生的整合与解离等过程中。
重组气味分子使人更愉悦
从玫瑰花香到烟火熏香，再到刺鼻的鱼腥味，每一种气味都是由气味分子混合而成，再与人体鼻腔内的蛋白质受体相结合，让人感觉到不同的气味。科学家们一直试图弄清究竟是什么原因，使得气味分子在不同组合后让人产生愉悦感或不悦感。 8月29日，发表在Science Advances期刊上的一篇文章解释了一种
DNA重组的基本信息简介
DNA重组（DNA recombination）实质上指的是遗传重组（genetic recombination），也称为遗传改组（genetic reshuffling），是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生
重组质粒的连接、转化及筛选
实验材料 外源DNA 片段试剂、试剂盒 连接反应缓冲液T4 DNA 连接酶X-gal储液IPTG储液麦康凯选择性培养基仪器、耗材 恒温摇床台式高速离心机恒温水浴锅电泳装置电热恒温培养箱电泳仪移液枪eppendorf管
重组质粒的连接、转化及筛选
实验概要本技术以pBS质粒、E. coli DH5α为例介绍了重组质粒的连接、转化及筛选。实验原理本实验所使用的载体质粒DNA为pBS，转化受体菌为E.coli DH5α菌株。由于pBS上带有Ampr 和lacZ基因，故重组子的筛选采用Amp抗性筛选与α-互补现象筛选相结合的方法。因pBS带有Amp
重组质粒的连接、转化及筛选
材料、设备及试剂 一、 材料 外源DNA片段: 自行制备的带限制性末端的DNA溶液,浓度已知; 载体DNA: T-vector(Ampr ,lacZ),自行提取纯化,浓度已知; 宿主菌: E. coli DH5α,或JM系列等具有α-互补能力的菌株。 二、 设备 恒温摇床，台式高速离心机，恒
重组人溶菌酶能杀死真菌吗
分别将重组人溶菌酶和商品酶做梯度稀释后,滴加到涂布有一定量菌液的MH平板,通过平板扩散法测量各组抑菌环直径大小,从而判定其抑菌活性。结果表明,重组人溶菌酶抑菌活性显著高于标准溶菌酶,低质量浓度的重组酶即可对致病菌的生长产生抑制和杀灭作用。rhLYZ对金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌较为敏感,抑菌环直
基因重排与基因重组的区别
基因重排：通过基因的转座，DNA的断裂错接而使正常基因顺序发生改变基因重组: 是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新DNA分子的过程。也就是说,,基因重排是一个基因内DNA排列发生改变,,而使这个基因改变了,如出现新的基因就是靠这种方法,而基因重组却是几个不同基因互相
CreloxP重组系统技术详解
Cre-loxP重组系统 一．Cre-loxP重组系统作用原理 1. Cre重组酶和loxP位点 Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，
重组系统腺相关病毒产品说明
一．Cre-loxP重组系统作用原理Cre重组酶和loxP位点Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够特异性识别loxP位点。LoxP（l
重组杆状病毒的纯化实验
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1. 制备病毒上清的系列稀释液，该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2. 当蚀斑形成后，用灭菌巴斯德吸管
细胞因子重组要求及状态
重组细胞因子要求： 1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。 2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。 3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo
染色体重组节的概念
重组节(recombination nodules)直径约为90nm, 是由蛋白质装配成的小体, 结构不清楚。重组节中含有催化遗传重组的酶类，因此推测某些重组节与染色体重组有关。已发现，交叉与重组节在总的数量上是相等的，而在联会染色体上的分布方式两者也极为相似，果蝇的某些突变引起了交叉分布的异常，重
DNA－同源重组的关键分子机制
蛋白质与植物基因研究国家重点实验室研究团队揭示 DNA 同源重组的关键分子机制 作为三大DNA代谢途径（DNA 复制、重组、损伤修复）之一，DNA同源重组（Homologous Recombination）是生命体的基本生物事件。它在细胞生长、减数分裂、配子形成、物种进化、DNA双链断裂修复、
重组水蛭素的相关信息介绍
由于水蛭素具有重要开发价值，而水蛭的来源有限，故国内外医药界均着重研究通过基因工程获得重组水蛭素。1986年后，重组水蛭素已在大肠杆菌和酶母中分别表达成功，与天然水蛭素相比，重组水蛭素在第63位氨基酸（酪氨酸）上未硫酸酪化，活性略低，其余性质基本相同。在治疗的剂量下静脉注射无毒副反应。现国外一些
概述卫星RNA的重组的内容
在一些动物病毒中,存在着基因组之间的重组现象。发生重组的RNA可能具有同源性,也可能没有同源性。前一种情况下,交换重组的RNA发生在两者之中的相同位置而不会改变通读框架ORF；后一种情况下,交换重组的位置不确定,因而会影响到ORF。在植物病毒中,仅证明雀麦花叶病毒BMV存在着RNA基因组重组现象
接合在基因重组中的应用
自然中转导现象较普遍，可能是低等生物进化过程中产生新的基因组合的一种基本方式。供体菌和受体菌的完整细胞经直接接触而传递大段DNA遗传信息的现象，称为接合。细菌和放线菌均有接合现象。
DNA重组（DNA－recombination）技术：工具酶
一、限制性内切酶限制性内切酶（restriction endonucleases，RE）是其中最重要的工具酶之一。它是一类核酸水解酶，能识别和切割双链DNA分子中的特定核苷酸序列。（一）命名原则限制性内切酶大多从细菌中发现，根据来源进行命名，限制酶的第一个字母（大写，斜体）为宿主菌的属名，第二、第三
基因重组发生在那个阶段？
基因重组主要发生在减数diyi次分裂的四分体时期和减数diyi次分裂后期。在减数diyi次分裂的四分体时期，两条已经自我复制的同源染色体联会形成的四条染色单体的结合体。在减数diyi次分裂时，由于同源染色体的联会，使得每对同源染色体中含有四个染色单体，这时的一对同源染色体又叫一个四分体。在减数分裂中
关于基因重组疫苗的基本介绍
发生在生物体内基因的交换或重新组合。包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。是生物遗传变异的一种机制。 指整段DNA在细胞内或细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,并能在新的位置上复制、转录和翻译。在进化、繁殖、病毒感染、基因表达以致癌基因激活等过程中,基因重组都起重要作用。基因重
基因组重排的重组类型
基因重组是指一个基因的DNA序列是由两个或两个以上的亲本DNA组合起来的。基因重组是遗传的基本现象,病毒、原核生物和真核生物都存在基因重组现象。减数分裂可能发生基因重组。基因重组的特点是双DNA链间进行物质交换。真核生物,重组发生在减数分裂期同源染色体的非姊妹染色单体间,细菌可发生在转化或转导过程中
简述多肽药物的基因重组技术
自然界很多生物都能产生活性多肽，如哺乳动物的胰岛素。但从动植物体内提取活性多肽需要大量原料，成本昂贵，不够绿色环保。利用基因技术生产天然活性多肽解决了这一问题。重组技术是通过将多肽的基因序列构建到载体上，形成重组DNA表达载体，并在原核或真核细胞中进行多肽分子表达、提取、纯化。此方法适合制备大于
关于重组子的筛选方法介绍
1、抗生素筛选法：菌株为某种抗生缺陷型，而质粒上带有该抗性基因（如氨苄青霉素，卡拉霉素等）这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。本实验利用抗生筛选转化子。 2、互补法：至今使用的许多载体（如PUC系列）有含有一个大肠杆菌DNA的短区段，其中含有β－半乳糖苷酸基因（lacZ）的调控序列和
重组疫苗载体的概念和作用
中文名称重组疫苗载体英文名称recombined vaccine vector定 义用于携带重组疫苗抗原编码基因的已有病毒或细菌的疫苗株。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫预防（三级学科）
国家重点实验室重组！
国家重点实验室重组！顶尖高校宣布重大举措 1月28日，南开大学国家重点实验室重组工作研讨会在八里台校区服务楼召开。副校长陈军出席会议并讲话。 陈军指出，习近平总书记多次对重组国家重点实验室体系工作作出重要指示批示，强调国家重点实验室建设的重要意义。元素有机化学国家重点实验室和药物化学生物学国