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融合基因的表达物

融合基因的表达产物为融合蛋白。......阅读全文

基因表达的机制

转录转录过程由RNA聚合酶(RNAP)进行,以DNA为模板,产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动,留下新合成的RNA链。基因组DNA由两条反向平行和反向互补链组成,每条链具有5'和3'末端。这两条链分别称为“模板链”(产生RNA转录物的模板)和“编码链”(含有转录本序列的DN

杆状病毒表达系统用于表达单一非融合蛋白的转染质粒

  由于外加的多角体蛋白或其它的氨基酸可能对外源蛋白的生物活性或细胞定位产生影响,所以用于表达非融合型蛋白的转移载体被广泛应用。几种不同的策略被用于设计高水平表达非融合蛋白的转移载体:  (1)如pAcRP[5]系列等,都在多角体基因启动子启始密码ATG上游引入一个单一的限制性多克隆位点;  (2)

LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验

实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒 氨苄青霉素IAAIPTGPBS盐酸胍Tris·Cl 仪器、耗材 超声波发生器透析袋转子离心机 实验步骤 利用pUR载体表达lacZ融合蛋白:   1a.  按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中,转化大肠杆菌感

LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验

实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 氨苄青霉素IAAIPTGPBS盐酸胍Tris·Cl仪器、耗材 超声波发生器透析袋转子离心机实验步骤 利用pUR载体表达lacZ融合蛋白: 1a.  按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中,转化大肠杆菌感受态细胞,在LB/氨苄青霉素平皿上挑选转化子。2a.  接种含

LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验

基本方法             实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒

什么是融合基因?

所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连.置于同一套调控序列(包括启动子、增 强子、核糖体结合序列、终止子等)控制之下,构成的嵌合基因。

bcrabl融合基因哪些

慢性粒细胞白血病(Chronic Myelogenous Leukemia,CML)是一种发生于造血干细胞的血液系统恶性克隆增生性疾病。在受累的细胞系中可找到Ph标记染色体或(和)bcr/abl基因重排。bcr基因断裂点集中在三个区域:主要(major bcr,M-bcr)、次要(minor bcr

细胞融合的诱导物分类

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

细胞融合的诱导物介绍

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

细胞融合的诱导物介绍

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

bcr/abl融合基因的基因检测方法

Southern Blot即DNA印迹,可以对bcr-abl融合基因DNA重排进行分子生物学检测。将经限制性内切酶酶切及琼脂糖电泳分离的DNA片段转移到固相杂交膜上,胚系DNA会产生特征性片段,但发生过基因重排的细胞DNA因酶切位点有所改变会产生有别于胚系的DNA酶切片段。大多数bcr基因的断裂点集

融合基因跟基因突变的区别

这应该是肿瘤患者用药过程中才会出现的问题 融合基因比例升高就意味着耐药性的产生 比如说ALK ROS 等基因的融合 专业角度来说的话基因融合和基因突变实际上是两个平行关系 属于基因变异的两者类型

表达基因的克隆策略与分离表达基因序列的技术方法

人类基因组计划的主要任务之一就是要从大片段基因组区域或整条染色体DNA 上鉴定出基因表达序列(gene expressed sequences)或转录单位(transcription units)。在人类基因组30亿个碱基对中,发生转录的表达序列(即基因)仅占总序列的3~5%。基因组中绝大部

硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验

实验材料 融合蛋白试剂、试剂盒 氨苄青霉素甘油色氨酸仪器、耗材 电泳仪培养箱摇床试管实验步骤 1.  将编码目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS质粒上的trxA基因3‘末端,构建符合读框的融合基因,或者于pALtrxA-781的单一Rsr 2位点上插入短肽编码序列。2.  用含

硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验

实验材料融合蛋白试剂、试剂盒氨苄青霉素甘油色氨酸仪器、耗材电泳仪培养箱摇床试管实验步骤1.  将编码目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS质粒上的trxA基因3‘末端,构建符合读框的融合基因,或者于pALtrxA-781的单一Rsr 2位点上插入短肽编码序列。2.  用含有重组硫

硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验

基本方案             实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒

融合基因的概念和特点

所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连.置于同一套调控序列(包括启动子、增 强子、核糖体结合序列、终止子等)控制之下,构成的嵌合基因。

关于融合基因的分类介绍

  根据构成融合基因的种类,可以将融合基因分为四大类:  (1)由报告基因和功能基因构成的融合基因。常用的报告基因有:GFP(绿色荧光蛋白)基因、GUS基因、LacZ基因和Luciferasese(虫荧光素酶)基因等,主要目的是对功能基因进行示踪,研究其功能及特性。  (2)由信号肽或单体蛋白的序列

融合基因的操作程序

在构建融合蛋白中,一个关键的问题是两蛋白间的接头序列( Linker ),即连接肽。它的长度对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短,可能影响两蛋白高级结构的折叠,从而相互干扰;如果接头序列太长,又涉及免疫原性的问题,因为接头序列本身就是新的抗原。一般来说, 3-5个氨基酸的Linker可满

融合基因的制备方法介绍

1、进行目的基因的克隆:根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cDNA为模板,利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质粒。3、

基因的翻译表达-2

方法   1:重组载体构建同前面实验 2:诱导表达:提取带重组片断的质粒DNA转化BL21(DE3)受体菌37℃活化过夜,转入新鲜培养基摇菌至对数生长期(约2-3小时),加入IPTG至终浓度0.4mM,继续培养6小时 3:表达产物提取及鉴定见实验十九

基因表达组件的概念

中文名称表达组件英文名称expression cassette定  义与基因表达有关的一系列序列元件的组合。常包括启动子、编码序列、终止子、增强子等。完整的表达组件是能够表达出目的物的成套基因元件。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

基因表达的系列分析

中文名称基因表达的系列分析英文名称serial analysis of gene expression;SAGE定  义通过构建较短的表达序列标签规模化地检测基因表达种类及其丰度的实验技术。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

基因差异表达的概念

差异表达不仅有助于阐明生命的奥秘,而且还能为基因诊断与治疗提供重要的理论依据。近几年来,差异表达基因克隆技术不断完善与发展,已成为研究肿瘤和疾病等相关基因的重要手段。

基因共表达的定义

共表达质粒就是指那些可以同核DNA一起表达的质粒DNA。

基因超表达的定义

超表达是指目的基因的全长序列与高活性组成型启动子或组织特异性启动子融合,通过转化,获得该基因产物大量积累的植株。

基因表达调控的概念

基因表达调控是生物体内基因表达的调节控制,使细胞中基因表达的过程在时间、空间上处于有序状态,并对环境条件的变化作出反应的复杂过程。基因表达的调控可在多个层次上进行,包括基因水平、转录水平、转录后水平、翻译水平和翻译后水平的调控。基因表达调控是生物体内细胞分化、形态发生和个体发育的分子基础。

基因超表达的概念

超表达是指目的基因的全长序列与高活性组成型启动子或组织特异性启动子融合,通过转化,获得该基因产物大量积累的植株。

基因的翻译表达-1

1体外TNTRT7 转录/翻译系统表达重组基因体外翻译是研究基因表达、基因调控的一类重要技术,该技术可广泛用于基因表达量、启动序列等调控因子的确立,并结合PTT实验筛选天然突变或人工诱变的基因片段,还可用来进行蛋白和DNA结合方面的研究。早期的体外翻译研究大多是提取mRNA然后通过网织红细胞或麦胚系

基因表达度的概念

中文名称表达度英文名称expressivity定  义个体基因表达的变化程度。同一基因型的不同个体在性状或疾病的表现程度上的差异。可以因环境因子的差异、其他基因的影响或者个体遗传背景的不同等引起。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)