物理转染法的介绍
包括：①显微注射②电穿孔③基因枪等，显微注射虽然费力，但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物，但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲的强度和持续时间有关系，基因枪依靠携带了核酸的高速粒子而将核酸导入细胞内，这种方法适用于培养的细胞核在体的细胞。......阅读全文
临床物理检查方法介绍饮水通气法介绍
饮水通气法介绍: 饮水通气法又称波利策法。患者含水一口,医生将波氏球前端的橄榄头塞于受试者一侧前鼻孔,另侧前鼻孔用手指紧压,之后叫患者将水吞下,在吞咽时候医生迅速紧压橡皮球。咽鼓管功能正常者,此时软腭上举、鼻咽腔关闭,同时咽鼓管开放的瞬间,从球内压入鼻腔的空气可逸入鼓室,医生可以从听诊管内可听到鼓膜
临床物理检查方法介绍吞咽试验法介绍
吞咽试验法介绍: 吞咽试验法有两种方法:第一种是将听诊管的橄榄头分别置于患者和检查者的外耳道口,然后请患者作吞咽动作,根据听诊来判断咽鼓管功能是否正常。第二种是请患者作吞咽动作,观察其鼓膜,若鼓膜可随吞咽动作而向外运动,示功能正常。吞咽试验法正常值: 鼓膜可以随吞咽动作而向外运动,功能正常。吞咽试验
关于细胞转染的技术介绍
国际上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术，以其适用宿主范围广，操作简便，对细胞毒性小，转染效率高受到研究者们的青睐。其中树枝状聚合物（Dendrimers）和聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的转染性能最佳，但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性，且其合成工艺复杂。聚乙烯亚胺是
关于基因转染的定义介绍
基因转染是一种“将具生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能”的技术。其中，核酸包括DNA（质粒和线性双链DNA），反义寡核苷酸及RNAi（RNA interference）。基因转染技术已广泛应用于基因组功能研究（基因表达调控，基因功能，信号转导和药物筛选研究）和基因治疗
关于化学转染的方法介绍
1.DEAE-葡聚糖法 DEAE-葡聚糖是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一，DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物，它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取，用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究，但用于稳定转染却不是十分可靠。 2.磷酸钙法 磷酸钙法是磷酸钙共沉淀转染法，因为试剂易取得
关于转染细胞筛选的介绍
1、确定抗生素作用的最佳浓度： 不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。 1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。 2) 将培养液换成含抗生
关于瞬时转染的优点介绍
瞬时转染（transient transfection）是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。 第一、操作简
关于细胞转染的基本介绍
转染(transfection)是细胞在一定条件下主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。 [1] 从本质上讲，和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化，其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞，以提高细胞膜的通透性，从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上，人们往往也通称
细胞转染实验的步骤介绍
一、细胞传代 (1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。 (2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。 (3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)
关于米糠油的物理精炼提练法介绍
物理精炼以其比较简单的工艺流程，可直接获得质量高的精炼油和副产品脂肪酸，而且原辅材料节省，没有废水污染，产品稳定性好，精炼率高等优点，越来越引起人们的关注。尤其对高酸值油脂，其优越性更加显著。它包括蒸馏前的预处理和蒸馏脱酸两个阶段。由于预处理对物理精炼油的质量起着决定性作用。近几年来对米糠油的物
磷酸钙共沉淀转染法的技术特点
磷酸钙法是磷酸钙共沉淀转染法，因为试剂易取得，价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染的研究，先将DNA和氯化钙混合，然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸钙沉淀，最后把含有沉淀的混悬液加到培养的细胞上，通过细胞胞膜的内吞作用摄入DNA。磷酸钙似乎还通过抑制血清中和细胞内的核酸酶活性而保护外源DNA免受
临床物理检查方法介绍角膜照影法介绍
角膜照影法介绍: 角膜照影法是针对暴露性角膜炎治疗的其中一种方法,暴露性角膜炎(exposure keratitis)常见于睑裂闭合不全的各种病变,致角膜暴露及瞬目运动障碍,泪液不能正常湿润角膜而发生角膜上皮损伤。角膜照影法正常值: 病变范围多位于下1/3的角膜。初期角膜及结膜上皮干燥、粗糙,暴露部
临床物理检查方法介绍虹膜检查法介绍
虹膜检查法介绍: 虹膜,眼睛构造的一部分,虹膜中心有一圆形开口,称为瞳孔,犹如相机当中可调整大小的光圈,内含色素决定眼睛的颜色。虹膜检查法正常值: 正常时虹膜组织纹理应极清晰,但在发炎时,因有肿胀充血而可以呈污泥状,在正常情况下,一般是不能见到虹膜血管的,但当虹膜发生萎缩时,除组织疏松,纹理不清外,
临床物理检查方法介绍语言检查法介绍
语言检查法介绍: 语言检查法可以迅速区别听力正常与否,也可大略地了解听力情况和听力障碍的性质。包括耳语试验和话语试验,适用于集体检查。语言检查法正常值: 能迅速听到检查者的词语。语言检查法临床意义: 异常结果:耳语试验和话语试验的听距相差悬殊者,为内耳病变。这种差距在老年性聋表现尤为明显。中耳病变,
临床物理检查方法介绍现时身高预测法介绍
现时身高预测法介绍: 现时身高预测法是瓦尔克尔氏预测法,这种身高预测法是根据孩子现在的身高,利用下面的公式来预测孩子未来的身高:Hm=A+B×C。公式中的Hm为孩子未来成人时的身高,A为固定的数值,B为相应年龄的系数,C为孩子当时的身高。由于世界各地的差异,误差在3厘米。现时身高预测法正常值: 预测
临床物理检查方法介绍散光表验光法介绍
散光表验光法介绍: 散光表验光法:是一种用散光表检查散光轴向的有效方法。散光表验光法正常值: 表示无散光或只有极少的散光(0.25D-0.5D左右);浓淡不一致者提示有散光。散光表验光法临床意义: 异常结果:对于有高度散光者来说,则常常是仅有视力模糊,而头痛或视力疲劳很轻或少见。 需要检查人群:近
临床物理检查方法介绍泪腺检查法介绍
泪腺检查法介绍: 泪腺检查是检查泪点位置是否正常,泪囊区有无红肿,压迫泪囊时有无分泌物自泪点溢出,泪腺区有无压痛及肿块。泪腺检查法正常值: 正常为10-15mm,
临床物理检查方法介绍巩膜检查法介绍
巩膜检查法介绍: 巩膜检查法是眼检查中的一小部分,通过观察巩膜颜色来诊断眼睛疾病,这对临床有非常大的意义。巩膜检查法正常值: 一般表层巩膜炎极少侵犯巩膜组织,巩膜炎则侵犯巩膜本身。巩膜炎多好发于血管穿过巩膜的前部巩膜,而伴于赤道后部的巩膜炎,因不能直接见到及血管少,发病亦少,容易被忽略。巩膜炎依部位
临床物理检查方法介绍耳镜检查法介绍
耳镜检查法介绍： 耳镜检查法：耳镜形如漏斗，口径大小不等，耳镜放在外耳道以便观察耳道各部及鼓膜之全貌。耳镜检查法正常值： 鼓膜处无穿孔或者脓液吸出。耳镜检查法临床意义： 异常结果：鼓膜处有穿孔或者浓液吸出。 需要检查人群：鼓膜穿孔患者耳镜检查法注意事项： 不适宜人群：无 检查前禁忌：无
临床物理检查方法介绍导管吹张法介绍
导管吹张法介绍: 导管吹张法,咽鼓管导管前端弯曲,末端开口稍大,呈喇叭状。末端开口外侧有一小环,位置恰与导管前端的弯曲方向相反,可指示前端的方向。主要有两种操作方法:咽鼓管圆枕法,鼻中隔法。导管吹张法正常值: 经听诊管听诊,咽鼓管通畅。导管吹张法临床意义: 异常结果:经听诊管听诊,咽鼓管不通畅。
临床物理检查方法介绍咽鼓管检查法介绍
咽鼓管检查法介绍: 咽鼓管检查法(examination of eustachian tube)是将空气经咽鼓管吹入中耳,以检查咽鼓管的通畅度、有无狭窄和阻塞、鼓室外有无液体存留,并进行治疗的方法。咽鼓管检查法正常值: 咽鼓管通畅咽鼓管检查法临床意义: 异常结果:咽鼓管阻塞。 需要检查人群:咽鼓管
临床物理检查方法介绍彻照法检查介绍
彻照法检查介绍: 用彻照法检查眼屈光间质(角膜、房水、晶体、玻璃体)有无混浊。彻照法检查正常值: 转动眼球,漂浮的黑影是玻璃体的混浊,固定的黑影是角膜或晶体的混浊。检查时还可将正镜片度数逐步减小,度数越小越接近眼底,用以估计混浊的位置。彻照法检查临床意义: 异常结果:屈光间质有混浊改变,则在橘红色的
临床物理检查方法介绍父母身高预测法介绍
父母身高预测法介绍: 父母身高预测法是欧洲一位科学家以父母的身高与子女身高的关系创造出一个预测身高的公式: 儿子身高(厘米)=父亲身高+母亲身高×1.08÷2 女儿身高(厘米)=父亲身高×0.923+母亲身高÷2 这个公式基本上符合“高加高生高”,“矮配矮生矮”,“高加矮生高”的遗传法则。这个
临床物理检查方法介绍玻片压诊法介绍
玻片压诊法介绍: 玻片压诊法是选择透明洁净的载物玻片或透明特制的压舌板,按压于皮损处,以观察皮疹的颜色改变。是皮肤病一种辅助诊断方法。玻片压诊法正常值: 无玻片压诊法临床意义: 炎性红斑、毛细血管扩张等,压之可褪色;紫癜、色素沉着等,压之不褪色;寻常性狼疮结节,压之呈苹果酱色。 异常结果:有的特点
临床物理检查方法介绍听力检查法介绍
听力检查法介绍: 听力检查法是通过观察声刺激所引起的反应,以了解听觉功能状态和诊断听觉系疾病的检查。目的是了解听力损失的程度、性质及病变的部位。听力检查法正常值: (1) 语音测试正常者耳语可在6m距离处听到 (2) 表测试记录方法以受检耳听距(cm)/该表标准听距(cm)表示,数字小表示听力好。
临床物理检查方法介绍角膜映光法介绍
角膜映光法介绍: 角膜映光法(Hirschbeng法)是一个检查显性共转性斜视的粗略方法,比较适用于幼儿及弱视、或不能进行详细检查的患者。角膜映光法正常值: 注视眼的映光点位于瞳孔的中央,偏斜眼角膜上的映光点位于非中央部位。角膜映光点偏离瞳孔中央1mm,相当于视轴偏斜7°(15△)。如果角膜映光点位
临床物理检查方法介绍眼压指测法介绍
眼压指测法介绍: 指测法是令患者双眼自然向下看,检查者以两食指尖由睑板上缘之上方轻触眼球,其余各指置于患者的前额部作支持,两食指尖交替轻压,根据传达到指尖的波动感,估计眼球压力的高低。眼压指测法正常值: 一般正常为Tn,眼压高为T+1、2、3,眼压低为T-1、2、3。眼压指测法临床意义: 异常结果:
临床物理检查方法介绍听力测试法介绍
听力测试法介绍: 听力测试的目的是了解听力损失的程度、性质及病变的部位,是一个主观数值,也就是不同频率声音你能听到最小声音的分贝数听力测试法正常值: 正常人的听力范围在0-25分贝(dB)之间,正常者耳语可在6m距离。听力测试法临床意义: 异常结果:耳语听到距离缩短至4m,表示轻度耳聋,1m为中度耳
痘苗载体转染细胞实验——CaCl2－法
实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质粒转染病毒感染的细胞，痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案，经几轮噬斑纯化，从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9
各种转染试剂的中文转染方法
FuGENE6（Roche）转染步骤： 转染前一天将细胞分至培养板，转染当天细胞应50-80％融合。将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。 将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。 1. 在PCR管中加入不含血