细胞转染实验的步骤介绍
一、细胞传代 (1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。 (2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。 (3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。 (4)加入1ml的含血清培养基终止反应。 (5)用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。 (6)将培养液装入离心管中，1000rpm离心5min。 (7)用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。 (8)将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。 (9)将培养皿转入CO2培养箱中培养，第二天转染。 二、细胞转染 1）转染试剂的准备 A.将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。 ......阅读全文
细胞转染实验的实验步骤细胞转染
1）转染试剂的准备A.将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。B.震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2）选择合适的混合比例（1：1－1：2/脂质体体积：DNA质量）来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡
细胞转染实验的步骤介绍
一、细胞传代 (1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。 (2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。 (3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)
细胞转染实验的步骤
细胞传代(1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁，
细胞转染实验的实验步骤
细胞传代(1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁，
细胞转染实验的实验步骤细胞传代
(1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁，观察到细
真核细胞的转染实验步骤
1. 在6孔板中接种1~3×105细胞/孔，加入2ml完全培养基，置CO2孵箱中37℃培养过夜。 2. 待细胞长到50-80%单层时，在无菌离心管中配制如下溶液： i. 溶液A：将4?g待转染的超纯DNA稀释到250?l无血清培养基中，静置5min ii. 溶液B：将2-25?l Lipo
真核细胞的转染实验步骤
1. 在6孔板中接种1~3×105细胞/孔，加入2ml完全培养基，置CO2孵箱中37℃培养过夜。2. 待细胞长到50-80%单层时，在无菌离心管中配制如下溶液： i. 溶液A：将4?g待转染的超纯DNA稀释到250?l无血清培养基中，静置5minii. 溶液B：将2-25?l Lipofec
细胞转染实验介绍
一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介
细胞转染常用步骤
1. 转染试剂的准备① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体 [1] 体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGF
细胞瞬时转染步骤
原理：通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术，将靶基因导入细胞，一般在转染后48小时左右，靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的，48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。应用：观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（短时间即可进行观察，但效应会很快丢失）。一般流程：1）细胞接种：转染实
细胞转染的常用步骤
1. 转染试剂的准备① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体 [1] 体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGF
细胞转染的常用步骤
1. 转染试剂的准备① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体 体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA
细胞转染实验的实验步骤第二次细胞传代
1） 在转染后24小时，观察实验结果并记录绿色荧光蛋白表达情况。2） 再次进行细胞传代，按照免疫染色合适的密度0.8X105个细胞/35mm培养皿将细胞重新放入培养皿中。3） 在正常条件下培养24小时后按照染色要求条件固定。
慢病毒转染细胞步骤
一、慢病毒 转染贴壁细胞实验方法 1、慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞 以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。 2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基 替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育。
慢病毒转染细胞步骤
一、慢病毒转染 贴壁细胞实验方法1、慢病毒转染 前18-24小时，将贴壁细胞以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育。3、(对polybrene
干细胞稳定转染操作步骤
外源基因进入细胞主要有三种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法，实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入，但是由于前两者的效率低且伤害较大，所以现在除了对于一些特殊细胞系，一般的转染方法都利用脂质体。利用脂质体转染和其他方法一样，最重要的就是防治其毒性，因此脂质体与
慢病毒转染细胞的操作步骤
相关专题慢病毒包装技术专题一、慢病毒 转染贴壁细胞实验方法1、慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞 以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基 替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育
慢病毒转染细胞的操作步骤
相关专题慢病毒包装技术专题一、慢病毒 转染贴壁细胞实验方法1、慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞 以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基 替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育
细胞转染实验的实验目的
学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。
细胞转染实验的实验原理
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法、脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和
细胞转染实验的目的
学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。
细胞转染实验的原理
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法、脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和
真核细胞转染实验
学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。实验材料真核细胞试剂、试剂盒脂质体 转染液仪器、耗材CO2孵箱 离心管 6孔板
真核细胞转染实验
真核细胞的转染 实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒 脂质体 转染液
细胞转染实验目的
学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。
昆虫细胞转染实验
实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1. 接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿，在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养，于27℃培养30~60 min，让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿，吸取40
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
昆虫细胞转染实验
实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1. 接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿，在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养，于27℃培养30~60 min，让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿，吸取40 ul 无菌
关于细胞转染实验的材料器材介绍
（1）材料 293T细胞、MyoD表达质粒和EGFP表达质粒、DMEM培养基、链霉素/青霉素（双抗）、FCS（小牛血清）、PBS（磷酸盐缓冲溶液）、胰酶/EDTA消化液、转染试剂（TransFast） （2）器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头酒精灯、废液缸、血球计数板、