物理转染法的介绍
包括：①显微注射②电穿孔③基因枪等，显微注射虽然费力，但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物，但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲的强度和持续时间有关系，基因枪依靠携带了核酸的高速粒子而将核酸导入细胞内，这种方法适用于培养的细胞核在体的细胞。......阅读全文
临床物理检查方法介绍足长身高预测法介绍
足长身高预测法介绍: 足长身高预测法是指成年的身高=13岁时足长×7。运用这种方法来预测孩子未来的身高更为简单方便,误差不超过3厘米。足长身高预测法正常值: 预测身高与真实身高一致。足长身高预测法临床意义: 异常结果:预测身高与真实身高不一致。 需要检查的人群:儿童。足长身高预测法注意事项: 不合
临床物理检查方法介绍集光检查法介绍
集光检查法介绍: 集光检查法是虹膜检查法的一种,在虹膜上也常易发现炎性结节或非炎性的囊肿或肿瘤,另加放大镜检查。集光检查法正常值: 正常时虹膜组织纹理应极清晰,但在发炎时,因有肿胀充血而可以呈污泥状,在正常情况下,一般是不能见到虹膜血管的,但当虹膜发生萎缩时,除组织疏松,纹理不清外,虹膜上原有的血管
临床物理检查方法介绍视网膜检影法介绍
视网膜检影法介绍: 检影验光全称为视网膜检影法(retinoscopy,skiascopy)是一种客观验光方法,检影是一种他觉法测量眼屈光状态的方法。需要长期训练,才能掌握真谛。视网膜检影法正常值: 一般情况下,顺动光多为红色,逆动光多为淡黄色、灰白色、灰色,高度屈光不正多为暗灰色甚至不能区别光动。
临床物理检查方法介绍裸眼检查法介绍
裸眼检查法介绍: 裸眼检查法是眼震检查法中一种,受检者按检查者手指所示方向,向左、右、上、下及正前方5个基本方向注视,观察其眼球运动。裸眼检查法正常值: 按眼震强度的不同,可将其分为3度:Ⅰ°眼震仅出现于向快相侧注视时;Ⅱ°向快相侧及向前正视时均有眼震;Ⅲ°向前及向快、慢相方向注视时皆出现眼震。裸眼
临床物理检查方法介绍四步触诊法介绍
四步触诊法介绍: 四步触诊法是通过触诊判定胎产式、胎先露、胎方位、胎先露是否衔接、子宫大小是否与孕周相符,并估计胎儿的大小和羊水量的多少的方法。四步触诊法正常值: 正常的胎产式,意思是宝贝的脊柱是顺着母亲的脊柱方向的。 正常的胎方位:头先露:胎头朝下,最先进入骨盆。 正常胎势为胎头俯屈、两臂交叉
临床物理检查方法介绍小儿角膜检查法介绍
小儿角膜检查法介绍: 小儿角膜炎检查法是针对小儿角膜炎治疗的一种检查方法,小儿角膜检查法:在有严重羞明和眼睑痉挛的患者或小儿,可先滴一次1%的卡因或4%可卡因等表面麻醉剂,然后用开睑器分开上下睑而检查角膜。小儿角膜检查法正常值: 病症范围:多数角膜炎患者都有强度发炎症状,如疼痛,角膜炎羞明、流泪和眼
临床物理检查方法介绍眼位检查法介绍
眼位检查法介绍: 眼位检查法包括角膜映光法,单双视标检查法,遮盖法。这对斜视眼诊断有很大帮助。眼位检查法正常值: 观察原来被盖眼的运动方向,如果由外到内,说明受检查可能存在外隐斜视或外斜视,如果由内向外运动,说明受检者可能存在内隐斜视或内斜视。眼位检查法临床意义: 异常结果:根据运动的方向能够判断病
临床物理检查方法介绍检眼镜检查法介绍
检眼镜检查法介绍: 检眼镜检查法是用以检查眼的屈光间质(角膜、房水、晶状体及玻璃体)和眼底(视盘、视网膜及脉络膜),是眼科的常用检查方法。检眼镜检查法正常值: (1) 眼屈光间质(角膜、房水、晶体、玻璃体)无混浊。 (2) 眼底: ① 视盘位于眼球后极偏鼻侧约3-4mm,直径约1.5mm,呈椭圆
临床物理检查方法介绍带状光检影法介绍
带状光检影法介绍: 带状光检影法同普通点状(圆光)检影镜相同之处,可做普通平面检影镜使用;不同一般检影镜之处,在于将光带置于不同子午线上,观察相互垂直的光带特征有无区别,从而确定有无散光存在,各类散光均可利用顺动光带进行轴位测定。带状光检影法正常值: 一般高度屈光不正光带特征为暗、慢、宽;低度为亮、
临床物理检查方法介绍近视力检查法介绍
近视力检查法介绍: 近视力检查法是针对近视患者检查的一种方法,测量结果更容易配备适合眼镜,保护好视力。近视力检查法正常值: E字视力表双眼踝视达1.0及以上就是正视眼(正常的)。近视力检查法临床意义: 异常结果: (1) 按照近视的程度 ① 3.00D(300度)以内者,称为轻度近视眼。 ②
临床物理检查方法介绍角膜知觉检查法介绍
角膜知觉检查法介绍: 角膜知觉检查法是用以检查角膜感觉是否正常。如当发现有角膜炎或溃疡而无显著刺激症状时,应做角膜知觉检查,以确定三叉神经有无机能减低或麻痹症状。角膜知觉检查法正常值: 如果知觉正常时,当触到角膜后,必然立刻出现反射性眨眼运动。如果反射迟钝,就表示有知觉减低现象,如果知觉完全消失,则
临床物理检查方法介绍远视力检查法介绍
远视力检查法介绍: 远视力是指人眼辨别最小物像的能力,是视网膜中心凹处的形觉敏感度,国内现已通用标准对数视力表。远视力检查法正常值: 检查时,如果被检者仅能辨认表上最大的“0.1”行E字缺口方向,就记录视力为“0.1”;如果能辨认“0.2”行E字缺口方向,则记录为“0.2”,如此类推。能认清“1.0
基因转染技术的DNA的准备介绍
用于转染的质粒DNA必须无蛋白质，无RNA和其它化学物质的污染，OD260/280比值应在1.8以上。DNA的质量和纯度能影响某些细胞系的转染效率，可以通过CsCl梯度法或标准柱层析法进行纯化。
临床物理检查方法介绍头盆不称的估计法介绍
头盆不称的估计法介绍: 头盆不称的估计法是通过肛诊检查产妇是否存在骨盆狭窄或胎儿的头过大,或是骨盆正常,但由于胎儿的头过大,分娩时不能顺利通过产道的现象。头盆不称的估计法正常值: 胎头低于耻骨联合平面提示无头盆不称,可自然分娩。头盆不称的估计法临床意义: 异常结果: 临产时胎头尚未入盆,则有头盆不
转染
细胞传代(1) 试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2) 弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3) 用Tip头加入1ml Trypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2 )。用手轻拍
转染的概念和常规转染技术分类
转染(transfection)是细胞在一定条件下主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染（永久转染）两大类。
细胞转染实验的实验步骤细胞转染
1）转染试剂的准备A.将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。B.震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2）选择合适的混合比例（1：1－1：2/脂质体体积：DNA质量）来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡
关于瞬时转染的基本信息介绍
瞬时转染（transient transfection）是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。
关于转染试剂的基本信息介绍
转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转基因和基因表达的重要工具，而且是基因治疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点：高效转染；安全；低细胞毒性；方法简单；省时、
关于转染试剂的历史背景介绍
已有众多的文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC（蛋白激酶C）通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22；31(37): 9025-30)；如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr；1777(4):3
常用的基因转染技术病毒载体介绍
1、逆转录病毒载体 逆转录病毒为RNA病毒，它们的基因组编码在一条单链RNA上，病毒进入细胞通过逆转录作用，病毒RNA即转变为双链DNA分子，DNA进入细胞核并整合在细胞染色体中，这种整合的病毒称为原病毒。在原病毒的两端各有一长末端重复序列（LTR），LTR内侧还有为复制所必需的其他顺序，包括
法舒地尔的物理参数
沸点：547.5°C at 760 mmHg闪点：284.9°C蒸汽压：2.55E-12mmHg at 25°C
基因转染(磷酸钙DNA共沉淀法)
实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 HBSCaCl2TEG418(新霉素G418)液G418选择培养基仪器、耗材 培养瓶
磷酸钙法转染HEK293T细胞
磷酸钙法转染HEK293T细胞可应用于：（1）研究转染哺乳动物细胞的机理；（2）基因工程。实验方法原理常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子
癌基因转化细胞：基因组DNA转染法
实验概要 癌基因转化细胞实验步骤1．提取基因DNA（含癌基因）。2．DNA准备：取供体DNA50～100微克，加3M NaCl或醋酸钠使最终浓度至0.3M混匀。3．再加2倍体积无水乙醇，3000转/分离心10分钟，去上清。4．加入转染缓冲液，待DNA充分融解后，再加入2.5M CaCl2，令最终浓度
基因转染(磷酸钙DNA共沉淀法)
基因转染技术可以应用于：基因组功能研究（基因表达调控，基因功能，信号转导和药物筛选研究）和基因治疗研究。实验方法原理核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使DNA 附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA 仅有1%～5%可以进入细胞核中，其
基因转染(磷酸钙DNA共沉淀法)
实验方法原理 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使DNA 附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA 仅有1%～5%可以进入细胞核中，其中仅有不到1%的DNA 可以与细胞D
磷酸钙法转染HEK293T细胞
磷酸钙法 实验方法原理 常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可
转染和转染效率测定步骤
LIPOFECTAMINE 2000转染试剂转染步骤此实验步骤设计用来进行24孔板贴壁细胞的瞬时或稳定转染，其为设计用来在生长培养基中直接加入复合物。1. 转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。2. 对于每孔细
临床物理检查方法介绍双视标检查法介绍
双视标检查法介绍: 双视标检查法,这种检查方法适合麻痹性斜视,在为病人检查斜视角时,先查第一斜视角,再查第二斜视角。这类检查法要求病人必须具备正常视网膜对应。双视标检查法正常值: 当屏上一个小红灯点亮以后,让病人向屏幕上投放绿色光斑,当患者认为绿色光斑与小红灯重合了,记录下绿色光斑的位置,这样依次重