物理转染法的介绍
包括：①显微注射②电穿孔③基因枪等，显微注射虽然费力，但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物，但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲的强度和持续时间有关系，基因枪依靠携带了核酸的高速粒子而将核酸导入细胞内，这种方法适用于培养的细胞核在体的细胞。......阅读全文
关于瞬时转染的基本信息介绍
瞬时转染（transient transfection）是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。
常用的基因转染技术病毒载体介绍
1、逆转录病毒载体 逆转录病毒为RNA病毒，它们的基因组编码在一条单链RNA上，病毒进入细胞通过逆转录作用，病毒RNA即转变为双链DNA分子，DNA进入细胞核并整合在细胞染色体中，这种整合的病毒称为原病毒。在原病毒的两端各有一长末端重复序列（LTR），LTR内侧还有为复制所必需的其他顺序，包括
siRNA的转染
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至
转染的分类
包括：1.DEAE-葡聚糖法DEAE-葡聚糖是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一，DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物，它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取，用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究，但用于稳定转染却不是十分可靠。2.磷酸钙法磷酸钙法是磷酸钙共沉淀转染法，因为试剂易取得，价格便宜
siRNA的转染
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA )和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA 复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转
临床物理检查方法介绍椎管内注射标记物法介绍
椎管内注射标记物法介绍： 椎管内注射标记物法是将标记物注射如入椎管内，用于观察瘘孔部位，定位脑脊液瘘孔。椎管内注射标记物法正常值： 检查结果没有发现瘘孔。椎管内注射标记物法临床意义： 异常结果：检查结果可以观察到孔洞，患有脑脊液瘘孔，需要进一步进行详细检查是否为脑脊液鼻漏。 需要检查的人群：
临床物理检查方法介绍双视标检查法介绍
双视标检查法介绍: 双视标检查法,这种检查方法适合麻痹性斜视,在为病人检查斜视角时,先查第一斜视角,再查第二斜视角。这类检查法要求病人必须具备正常视网膜对应。双视标检查法正常值: 当屏上一个小红灯点亮以后,让病人向屏幕上投放绿色光斑,当患者认为绿色光斑与小红灯重合了,记录下绿色光斑的位置,这样依次重
临床物理检查方法介绍睫状血管检查法介绍
睫状血管检查法介绍: 睫状血管检查法是眼部检查的一种方法,主要是检查出是否有急性虹膜睫状体炎。睫状血管检查法正常值: 正常前房深度(指中央部)约为2.5-3毫米,应注意年龄不同(过幼或过老的人前房较浅)和有屈光不正(远视者前房较浅,近视者较深)时前房深浅会各有不同。睫状血管检查法临床意义: 异常结果
临床物理检查方法介绍前房轴深检查法介绍
前房轴深检查法介绍: 前房轴深检查法:用前房深度测定仪检查,或用Zeiss-Opton裂隙灯上附加Jaeger计以45°观察角检查前房轴深。正常眼为2.5mm-3mm。前房轴深检查法正常值: 用Zeiss-Opton裂隙灯上附加Jaeger计以45°观察角检查前房轴深。正常眼为2.5mm-3mm。前
临床物理检查方法介绍直接检眼镜检查法介绍
直接检眼镜检查法介绍: 直接检眼镜检查法:能将眼底像放大约15-16倍,所见为正像,可看到的眼底范围小,但较细致详尽,亦可方便地用于检查眼的屈光间质。直接检眼镜检查法正常值: 正常的眼底分 视盘:位于眼球后极偏鼻侧约3-4mm,直径约1.5mm,呈椭圆形、色淡红,但颞侧颜色稍淡。 血管:动脉色鲜
临床物理检查方法介绍眼压计测量法介绍
眼压计测量法介绍: 眼压测量方法有很多种,包括指测法、压陷式眼压计测量法、压平眼压计测量法、非接触式眼压计测量法等。眼压计测量法正常值: 我国正常人眼压值是10-21mmHg,平均眼压15-16mmHg,平均值加2倍标准差(M±2SD),作为正常范围。眼压计测量法临床意义: 异常结果:眼压在青光眼发
临床物理检查方法介绍捏鼻闭口呼气法介绍
捏鼻闭口呼气法介绍: 捏鼻闭口呼气法又称瓦尔萨瓦法。它是通过病人用手指将两鼻翼向鼻中隔压紧,闭口并且同时用力呼气,空气无其它通路可泄就会进入咽鼓管,这时感觉鼓膜突然向外膨出,检查者从听诊管听到鼓膜的振动声。捏鼻闭口呼气法正常值: 从听诊管听到鼓膜的振动声,或可以看到鼓膜向外运动。捏鼻闭口呼气法临床意
临床物理检查方法介绍前房角镜检查法介绍
前房角镜检查法介绍: 前房角的宽窄及其在眼内压波动时的宽度变化情况,对诊断和治疗各种青光眼有重要价值。此外,前房角镜检查对前房角的异物或虹膜根部肿瘤、新生血管等的诊断也有帮助。前房角镜检查法正常值: 静态观察下,从前界线到睫状体带、虹膜根部等所有结构均能看到,有时还可看到梳状韧带。前房角镜检查法临床
临床物理检查方法介绍单视标检查法介绍
单视标检查法介绍: 单视标检查法,两只眼同时观察一个视标,使病人产生复视,根据复视象的位置变化来判断眼位。单视标检查法正常值: 如果垂直光线点光源,说明病人双眼正位;如果点光源。如果垂直光线穿过点光源,说明病人双眼正位;如果点光源在垂直光线的左侧(同侧复视),说明病人患外斜视,如果点光源位于垂直光线
临床物理检查方法介绍Frenzel氏眼镜检查法介绍
Frenzel氏眼镜检查法介绍: Frenzel氏眼镜检查法是眼震检查法中的一种,因受检者的瞳孔已被照亮并被凸透镜放大,观察眼震可更为清楚。Frenzel氏眼镜检查法正常值: Ⅰ°眼震仅出现于向快相侧注视时;Ⅱ°向快相侧及向前正视时均有眼震;Ⅲ°向前及向快、慢相方向注视时皆出现眼震。Frenzel氏
临床物理检查方法介绍眼球及眼眶检查法介绍
眼球及眼眶检查法介绍: 一般是在自然光线下用望诊方法检查。检查眼球时,应注意其大小、形状、有无突出或后陷,并应注意眼球的位置,有无不随意的眼球震颤。眼球及眼眶检查法正常值: 我国人眼球的突出度一般平均为13.6毫米,如果高于或低于此数时,可考虑为突出或后陷,但必须同时测量,且须要在相当时间间隔内测量
临床物理检查方法介绍Nagel色觉镜检查法介绍
Nagel色觉镜检查法介绍: Nagel色觉镜检查法,色觉镜是根据红光与绿光适当混合成黄光的原理设计的一种光谱仪器。Nagel色觉镜检查法正常值: 从色觉镜观察孔所见视野分为两部分,一部分为有一定波长的黄色;另一部分为红和绿的混色。黄色仅有亮度变化,红绿混合比率是可变的。Nagel色觉镜检查法临床意
临床物理检查方法介绍同色表检查法介绍
同色表检查法介绍: 假同色表通常称为色盲检查表,国外有石原忍和Stilling假同色表,国内有俞自萍、贾永源色盲检查图。同色表检查法正常值: 正常人以颜色而不以亮度来辨认图形,故能做出正确的判断,色觉异常者则以亮度而不以颜色进行辨认,从而不能做出正确的判断。同色表检查法临床意义: 异常结果:对颜色辨
临床物理检查方法介绍眼压描记检查法介绍
眼压描记检查法介绍: 眼压描记检查法即测定房水的排出率和生成率的方法,对青光眼诊断和研究有一定的临床意义。眼压描记检查法正常值: 我国人正常C值在0.19-0.65之间,如在0.13以下,则为病理状态。压畅比PO/c正常值小于100,大于120为病态。眼压描记检查法临床意义: 异常结果:压畅比PO/
临床物理检查方法介绍骶髂关节检查法介绍
骶髂关节检查法介绍: 骶髂关节检查法是诊断挤压或旋转骶髂关节而引起的疼痛是骶髂关节炎的可靠体征。一般可用骨盆分离试验、骨盆挤压试验、床边试验、“4”字实验来进行检查。骶髂关节检查法正常值: 检查结果为阴性。没有疼痛出现。骶髂关节检查法临床意义: 异常结果: 骨盆分离试验阳性,表明有骨盆骨折或骶髂关
临床物理检查方法介绍间接检眼镜检查法介绍
间接检眼镜检查法介绍: 间接检眼镜检查法:间接检眼镜能将眼底放大4.5倍,所见为倒立的实像,看到的范围大,一次所见可达25°-60°,立体感强,景深宽,对视网膜脱离、皱襞等不在眼底同一平面上的病变,可以同时看清。间接检眼镜检查法正常值: 视盘:位于眼球后极偏鼻侧约3-4mm,直径约1.5mm,呈椭圆
临床物理检查方法介绍耳的一般检查法介绍
耳的一般检查法介绍: 耳的一般检查法包括有外耳检查和耳镜检查,外耳检查有耳廓检查,外耳道检查,鼓膜检查。通过上述检查,观察耳的状况。耳的一般检查法正常值: 观察耳无任何异状。耳的一般检查法临床意义: 异常结果:外耳道壁有异物,红肿,疖肿,狭窄等,耳廓畸形和压痛,鼓膜穿孔。 需要检查人群:外耳道炎,
细胞转染原理及常见转染方法的比较（二）
线型PEI（Line PEI，LPEI）与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI（Branched PEI，BPEI）要早一些，过去的研究认为在不考虑具体条件，LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低，有利于细胞定位，因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有
细胞转染：脂质体转染的几个实验方法
实验原理 脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它适用于把DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时，首先需要优化转染条件，应找出该批LR对转
细胞转染原理及常见转染方法的比较（一）
实验原理：转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染（永久转染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的
磷酸钙介导的真核细胞转染实验——磷酸钙法
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞。电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响实验材料真核细胞试剂、试剂盒Ca
DNA转染
DNA转染· Transfection of Mammalian Cells Using Lipofectamine (LTI)· Guide to Eukaryotic Transfections with Cationic Lipid Reagents (PDF)
细胞转染
脂质体介导法 磷酸钙沉淀法 实验方法原理 外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的
关于细胞转染实验的材料器材介绍
（1）材料 293T细胞、MyoD表达质粒和EGFP表达质粒、DMEM培养基、链霉素/青霉素（双抗）、FCS（小牛血清）、PBS（磷酸盐缓冲溶液）、胰酶/EDTA消化液、转染试剂（TransFast） （2）器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头酒精灯、废液缸、血球计数板、
基因共转染的概念和方法介绍
基因工程中将两个以上的基因同时导入感受态真核细胞的方法，称作共转化(cotransformation,也称共转染)。将目的基因表达载体DNA 和标记基因表达载体DNA 混合后共同转移到靶细胞中，分别使用标记基因与目的基因对应的选择剂进行两次筛选，最后可得到复合转导的转化子。在磷酸钙沉淀物中，两种物理