细菌人工染色体的特点
细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)是指一种以F质粒(F-plasmid)为基础建构而成的细菌染色体克隆载体,常用来克隆150kb左右大小的DNA片段,最多可保存300kb个碱基对。......阅读全文
细菌人工染色体的特点
细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)是指一种以F质粒(F-plasmid)为基础建构而成的细菌染色体克隆载体,常用来克隆150kb左右大小的DNA片段,最多可保存300kb个碱基对。
细菌人工染色体
The Construction of Bacterial Artificial Chromosome (BAC) Libraries (complete manuscript) (Clemson University Genomics Institute) Construction of BAC
细菌人工染色体的应用
实验方法原理 细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大肠杆菌致育因子 (fertility, F)为基础的合成载体。 实验材料
细菌人工染色体的应用
细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大肠杆菌致育因子 (fertility, F)为基础的合成载体。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome
细菌人工染色体的概念
细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)是指一种以F质粒(F-plasmid)为基础建构而成的细菌染色体克隆载体,常用来克隆150kb左右大小的DNA片段,最多可保存300kb个碱基对。
细菌人工染色体的应用
实验方法原理 细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大肠杆菌致育因子 (fertility, F)为基础的合成载体。实验材料 限制性内切核酸酶大肠杆菌培养物电转感受态大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 LB 冷冻缓冲液仪器、耗材 脉冲场凝胶电泳仪LB
酵母人工染色体
· Easy YAC Preparation Method (Andrew Davies,Shaw lab)· Screening YAC libraries (Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
人工培养细菌的意义
(一)在医学中的应用 1.细菌的鉴定和研究:对细菌进行鉴定,研究其形态、生理、抗原结构、致病性、遗传与变异等生物学性状,均需人工培养细菌才能实现。 2.细菌性疾病的诊断和治疗:细菌感染引起的疾病,常须从患者体内分离出病原菌才能确诊。同时对分离出的病原菌作药物敏感试验,帮助临床选择有效的药物进行
酵母人工染色体的应用
直到 20 世纪 80 年代中期,尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前,如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究,该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理直到 20 世纪 80 年代
人工微型染色体的概念
中文名称人工微型染色体英文名称artificial minichromosome定 义将真核细胞的DNA复制起点、着丝粒和端粒三种关键性DNA序列互相搭配,人工组装成的小染色体。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
酵母人工染色体的应用
实验方法原理 直到 20 世纪 80 年代中期,尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前,如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究,该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。
酵母人工染色体的应用
实验方法原理 直到 20 世纪 80 年代中期,尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前,如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究,该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。实验材料 酿酒酵母试剂、试剂盒 甘油仪器、耗材 脉冲场凝胶电泳仪选择性培养
酵母人工染色体的简介
酵母人工染色体(Yeast artificial chromosomes,简称YAC),是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体,含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列,是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质)。其本质是脱氧核苷酸,是细胞核内由核蛋白
细菌的人工培养
人工制备营养充足的培养基并提供适宜的温度、气体、pH等培养条件,即能使细菌 在体外环境迅速生长繁殖。细菌培养对临床上病原菌的分离鉴定、制备抗生素、制备疫苗等生物制品都是必不可少的。 一、培养基的制备原则: 1、必须有充足的营养。 2、合适的酸碱度。 3、绝对无菌。 二、培养基的制备 培
酵母人工染色体的标记方法
YAC 载体的选择标记主要采用营养缺陷型基因,如色氨酸、亮氨酸和组氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等,以及赭石突变抑制基因 sup4 。与 YAC 载体配套工作的宿主酵母菌(如AB1380)的胸腺嘧啶合成基因带有一个赭石突变ade 2-1。
酵母人工染色体的工作原理
YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库,特别用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。当用BamHⅠ切割成线状后,就形成了一个微型酵母染色体,包含染色体复制的必要顺式元件,如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可以驱动染色体的复制和分配,从而决定这个微型染
酵母人工染色体的工作原理
YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库,特别用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。图3-26是 pYAC4 的遗传结构图,当用BamHⅠ切割成线状后,就形成了一个微型酵母染色体,包含染色体复制的必要顺式元件,如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可以驱
用于分子细胞遗传学的人工细菌染色体资源库实验
试剂、试剂盒TB 培养基RNase 溶液DNA 提取试剂盒苯酚琼脂糖细胞培养基Hank 平衡盐溶液胸腺嘧啶秋水仙胺低渗溶液仪器、耗材荧光显微镜冷CCD照相系统相差显微镜玻片电热板分光光度计水浴摇床恒温培养箱冰冻载玻片实验步骤展开
哺乳动物人工染色体的定义
中文名称哺乳动物人工染色体英文名称mammalian artificial chromosome;MAC定 义包含哺乳动物或人类大片段DNA或染色体的具有复制起点、端粒和着丝粒功能元件的人工染色体,导入细胞以单拷贝存在,但不整合到基因组中。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学
酵母人工染色体的概念和本质
酵母人工染色体(Yeast artificial chromosomes,简称YAC),是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体,含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列,是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质)。其本质是脱氧核苷酸,是细胞核内由核蛋白组成
关于人工染色体克隆载体的介绍
人工染色体克隆载体实际上是一种穿梭克隆载体,含有质粒克隆载体所必备的第一受体(大肠杆菌)源质粒复制起始位点,还含有第二受体(如酵母菌)染色体DNA着丝点、端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因。这样的克隆载体在第一受体细胞内可以按质粒复制形式进行高拷贝复制,在体外与目的DNA片段重组后
酵母人工染色体标记基因的介绍
在 YAC载体中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色体是线状的,因此其在工作状态也是线状的。但是,为了方便制备YAC载体, YAC 载体以环状的方式存在,并增加了普通大肠杆菌质粒载体的复制元件和选择标记,以便保存和增殖。 1、复制元件 YAC 载体的复制元件是其核心组成成分,其在酵母中复
简述酵母人工染色体的工作原理
YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库,特别用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。图3-26是 pYAC4 的遗传结构图,当用BamHⅠ切割成线状后,就形成了一个微型酵母染色体,包含染色体复制的必要顺式元件,如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可
酵母人工染色体的结构特征和本质
酵母人工染色体(Yeast artificial chromosomes,简称YAC),是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体,含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列,是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质)。其本质是脱氧核苷酸,是细胞核内由核蛋白组成
细菌感染的特点
细菌感染是致病菌或条件致病菌侵入血循环中生长繁殖,产生毒素和其他代谢产物所引起的急性全身性感染,临床上以寒战、高热、皮疹、关节痛及肝脾肿大为特征,部分可有感染性休克和迁徙性病灶。病原微生物自伤口或体内感染病灶侵入血液引起的急性全身性感染。临床上部分患者还可出现烦躁、四肢厥冷及紫绀、脉细速、呼吸增快、
细菌的人工培养程序及常用的人工培养方法
细菌的人工培养程序为: 标本(估计菌量少的标本,先增菌培养) →根据培养目的,接种于适当的培养基 →适宜的培养环境,35℃~37℃,18~24h →观察细菌的生长情况,选择可疑菌落进行分离、鉴定。 根据对气体的需求,细
细菌的人工培养程序及常用的人工培养方法
细菌的人工培养程序为:标本(估计菌量少的标本,先增菌培养) →根据培养目的,接种于适当的培养基 →适宜的培养环境,35℃~37℃,18~24h →观察细菌的生长情况,选择可疑菌落进行分离、鉴定。根据对气体的需求,细菌的人工培养方法可分
人工气候箱的特点
可人工控制光照、温度、湿度、气压和气体成分等因素的密闭隔离设备小型的称“人工气候箱”。 特点:光照控制,湿度控制,冷热控制,气压控制,气体成分控制 人工气候箱是具有光照、加湿功能的高精度冷热恒温设备,为用户提供一个理想的人工气候实验环境。 它可用作植物的发芽、育苗、组织、微生物的培养;昆虫
人工气候箱的特点
人工气候箱主要特点:1、多窗口数码显示方式。2、全电脑控制,1-30段可编程,可设定30组不同的控制参数。3、可选RS485通讯接口,实现与上位机的通讯,实时记录运行数据。4、温度采用PID控制方式,控温精度高。5、具有掉电记忆功能,保证在上电后,仪器能从断点继续运行。6、具有超强的紫外灭菌功能,保
细菌的人工培养――培养基
培养基是人工配制的适合于细菌生长繁殖的营养基质。培养基按其理化性状可分为液体、半固体和固体三大类。液体培养基可供细菌增菌及鉴定使用;在液体培养基中加入0.2%~0.5%的琼脂即成为半固体培养基,可用于细菌动力的观察及保存菌种;如琼脂量为2%~3%时,即为固体培养基,可供细菌的分离培养、保存菌种等使