机械刮除法纯化方法介绍

原代培养时,如果上皮细胞和成纤维细胞为分区成片混杂生长,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。可采用机械的方法去除不需要的细胞区域而保留需要的细胞区域,其方法如下:(1)将要纯化细胞的培养瓶,在净化室内放在倒置显微镜监视下进行。(2)用硅橡皮刮子在不需要生长的细胞区域推划,使细胞悬浮在培养液中,注意不要伤及所需细胞。(3)推划后用培养液冲洗振摇两次倒掉,即可将培养基加入原瓶继续培养。(4)数日后如发现不需要的细胞又长出,可再进行上述操作,这样反复多次可以纯化细胞。操作过程中要严格无菌操作,防止污染。......阅读全文

机械刮除法纯化方法介绍

原代培养时,如果上皮细胞和成纤维细胞为分区成片混杂生长,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。可采用机械的方法去除不需要的细胞区域而保留需要的细胞区域,其方法如下:(1)将要纯化细胞的培养瓶,在净化室内放在倒置显微镜监视下进行。(2)用硅橡皮刮子在不需要生长的细胞区域推划,使细胞悬浮在培养

细胞人工纯化的机械刮除法简介

  原代培养时,如果上皮细胞和成纤维细胞为分区成片混杂生长,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。可采用机械的方法去除不需要的细胞区域而保留需要的细胞区域,其方法如下:  (1)将要纯化细胞的培养瓶,在净化室内放在倒置显微镜监视下进行。  (2)用硅橡皮刮子在不需要生长的细胞区域推划,使细

肿瘤细胞培养方法简介(机械刮除法、反复帖壁法、消化...

一、机械刮除法1、标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2、刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入瓶皿中,肉眼或显微镜窥视下,刮除无标记空间。3、用Hanks液冲洗一两次,洗除被刮掉的细胞。4、注入培养液继续培养,如发现仍有成纤维细胞残留,可重复刮除至完全除掉为止。二、反复帖壁

电磁流量计电极的两种清洗办法

电磁流量计的电极清洗有很多种方法,一般zui常用的有机械清除法,电化学方法,电击穿方法和超声波清洗。本文章就详细介绍下机械清除:机械根除法是颠末在电极上设备特另外机械规划来完结电极根除。现在有两种方法:1.一种是选用机械刮除器。用不锈钢制成一把带有细轴的刮刀,颠末空心电极把刮刀引出,细轴和空心电极之

细胞生物基本方法:肿瘤细胞培养

肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除(成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长,致难以纯化肿瘤组织)。有以下一些方法:1.机械刮除法2.反复帖壁法3.消化排除法4.胶原酶消化法 1)  机械刮除法1.标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2.刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入

抗体纯化方法介绍

抗体制备制备出效价高,特异性强,稳定性好的抗体是免疫学实验取得成功的基础,抗体质量的好坏直接影响着研究者研究的成败,不同的免疫学实验方法(如ELISA,IHC,IP,ICC,SDS-PAGE, WB等)对抗体的效价,浓度和纯度有不同的要求。我们知道,一般免疫血清中含有特异性抗体和非特异性抗体

临床物理检查方法介绍刮髌试验介绍

刮髌试验介绍: 刮髌试验又称 “指甲试验”。在髌骨的表面由上而下的划刮,试验阳性提示有无错位的髌骨骨折。刮髌试验正常值: 检查结果为阴性。触及髌骨表面没有间隙和压痛。刮髌试验临床意义: 异常结果:检查结果为阳性,即触及髌骨表面有间隙和压痛,即为阳性。本试验阳性提示有无错位的髌骨骨折。  需要检查的人

临床化学检查方法介绍角膜病灶刮片介绍

角膜病灶刮片介绍:  角膜病灶刮片是简单、快速、门诊筛查病原菌的有效检查方法。角膜病灶刮片检查对所有感染性角膜炎如有角膜溃疡,均要进行这项检查,对细菌性角膜炎通过刮片染色后可区分革兰阳性或阴性菌,在未得到细菌培养结果时,可作为临床用药的参考指标,以免延误病情。角膜病灶刮片正常值:  眼部菌群的种类和

临床物理检查方法介绍搔刮试验介绍

搔刮试验介绍: 搔刮试验检查是用于检查腹部肝脏是否正常的一项辅助检查方法。此试验主要用于肝下缘触诊不清楚时,以协助定界。患者取仰卧位,医生以左手持听诊器膜式体件于右锁骨中线肋缘之上,右手指在右锁骨中线自下而上呈“Z”字形轻轻搔刮右上腹腹壁,或在上腹部半圆形等距离范围内由远处向膜式体件处轻轻搔刮腹壁,

细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(一)

体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等,混杂的细胞会直接影响实验结果,而利用体外培养细胞进

细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(二)

(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化: 两者在胰蛋白酶的作用下,由于成纤维细胞先脱壁,二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显,故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开,方法步骤如下。 采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养

电烙筛选法纯化的方法介绍

在贴壁细胞转化时,往往在培养瓶的细胞层中会出现分散的转化灶,转化灶区域细胞密集、排列规则,有明显生长趋势,与周边未能转化的细胞有明显的区域界限,此时即可用机械刮除法去除未转化细胞,也可用电烙筛选法烫死未转化细胞而保留转化灶细胞。其方法如下:(1)倒去旧液,并用记号笔划出转化灶的区域。(2)用加热的微

细胞人工纯化的电烙筛选法

  在贴壁细胞转化时,往往在培养瓶的细胞层中会出现分散的转化灶,转化灶区域细胞密集、排列规则,有明显生长趋势,与周边未能转化的细胞有明显的区域界限,此时即可用机械刮除法去除未转化细胞,也可用电烙筛选法烫死未转化细胞而保留转化灶细胞。其方法如下:  (1)倒去旧液,并用记号笔划出转化灶的区域。  (2

原代细胞常用纯化方法

  人工纯化是利用人为手段造成对某一细胞生长有利的环境条件,抑制其他细胞的生长从而达到纯化细胞的目的。   1、细胞时间差酶消化法:  酶消化法是比较常用的纯化方法,不仅对贴壁细胞可行,能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同,是两者分开,达到纯化的目的;另外对贴壁细胞与半贴壁细胞及黏附细胞

临床物理检查方法介绍宫颈刮片(TCT)介绍

宫颈刮片(TCT)介绍: 宫颈刮片是指从子宫颈部取少量的细胞样品,放在玻璃片上,然后在显微镜下研究是否异常。由于这项检验的提出,子宫颈癌的死亡率至少降低了70%。通过简单的宫颈抹片,医生可以侦测到子宫颈细胞微小的极早期变化,这使致命的癌症甚至在还没真正发生之前就被狙击了。宫颈刮片是目前广泛检查子宫颈

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

 原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。  在体外培养原代细胞时,为了保

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用

肿瘤细胞的培养(三)

三、成纤维细胞排除法 1.机械刮除法: 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝)、或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为: (1)标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位; (2)刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸

搔刮试验的介绍

  搔刮试验检查是用于检查腹部肝脏是否正常的一项辅助检查方法。此试验主要用于肝下缘触诊不清楚时,以协助定界。患者取仰卧位,医生以左手持听诊器膜式体件于右锁骨中线肋缘之上,右手指在右锁骨中线自下而上呈“Z”字形轻轻搔刮右上腹腹壁,或在上腹部半圆形等距离范围内由远处向膜式体件处轻轻搔刮腹壁,当其未达肝缘

电磁流量计电极脏了怎么办?

   仪器仪表作为工业生产中不可或缺的一类产品,在日常中获得了广泛的应用,然而流量计作为一种精密仪器,在使用跟日常的维护上有许多需要引起注意的地方。电磁流量计是一种智能型仪表,它的保养尤为重要。    电磁流量计如果测量的介质长期比较污浊,那么电磁流量计在工作一段时间后,电极上就会产生污垢。当结垢

细胞的纯化的两种方法

细胞的纯化的两种方法细胞的纯化一般分为两种,即自然纯化很人工纯化.常用的纯化方法有,酶消化法,细胞因子依赖纯化法,机械刮除法,反复贴壁法,电烙筛选法. 体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多

细胞的纯化的两种方法

细胞的纯化一般分为两种,即自然纯化很人工纯化.常用的纯化方法有,酶消化法,细胞因子依赖纯化法,机械刮除法,反复贴壁法,电烙筛选法. 体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有

纯化胶原蛋白的方法介绍

可用于胶原蛋白的纯化方法包括盐析法、透析法、离心法、电泳法和色谱法,其中盐析法、离心法和电泳法最为常用。由于单一方法难以完全分离纯化胶原蛋白,实际操作都是通过复合法来达到分离纯化胶原蛋白的目的。盐析法一般采用高浓度NaCl;离心法常选用制备型低温超速离心机;电泳法多采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电

原代微血管内皮细胞的体外分离培养

微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展,使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有:骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮

组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养2

2.培养基: 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用的 RPMIl640、  DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低,正常细胞培养不加血清不能生长,肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大,是因肿瘤细胞有自泌(Aut

如何清洗电磁流量计电极

电磁流量计广泛应用于各种工业现场,长期使用的电磁流量计电极容易受到介质的不同污染。下面由电磁流量计生产厂家天津凯隆技术人员为您介绍几种电磁流量计电极清洗的方法。  1.电化学方法  金属电极在电解质流体中存在电化学现象。根据电化学原理,电极与流体存在界面电场,电极与流体的界面是电极/流体相间存在的双

电磁流量计电极的维护和清洗方法

电磁流量计电极清洗方法有以下几种: 1.电化学方法 金属电极在电解质流体中存在电化学现象。根据电化学原理,电极与流体存在界面电场,电极与流体的界面是电极/流体相间存在的双电层所引起的。对于电极与流体界面电场的研究发现物质的分子、原子或离子在界面具有富集或贫乏的吸附现象,而且发现大多数无机阴离子是表面

新鲜组织分离原代细胞

  新鲜手术取得或冻存的组织于37 ℃ 快速复温,原代细胞培养工作液清洗3次,尽量修剪去除纤维组织,将组织块剪成约1 mm3大小的小块,弯头吸管吸取组织块均匀种植于75 cm2 培养瓶瓶底,瓶内加入少量原代细胞培养工作液,小心翻转培养瓶使组织块黏附于瓶底,置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养6-8

肿瘤细胞培养实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1.  机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝),或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为(1)标记镜下

综合型刮擦仪介绍

适用范围:主动检测汽车内、外饰件中平滑、纹路塑料饰件的耐磨性此仪器耐刮擦测试仪适用于各种汽车用内饰材料,如塑料、橡胶、皮革、织物、涂层材料、非涂层材料及其他复合材料等的耐刮擦性能检测。主动检测汽车内、外饰件中平滑、纹路塑料饰件的耐磨性仪器由两部分刮擦装置组成,左半部分可做五指/塑料指刮擦试验,右半部