细胞工程的技术方法介绍

植物细胞工程涉及诸多理论原理及实际操作技术,最重要的自然是培养技术,也就是将植物的器官、组织、细胞甚至细胞器进行离体地、无菌的培养。它是对细胞进行遗传操作及细胞保藏的基础。此类技术发展起步较早,相对而言已比较成熟,各种培养基制备及很多操作方法已经基本规范化。针对植物的培养主要有植物组织培养、植物细胞培养、花药及花粉培养、离体胚培养以及原生质体培养这几个大类,每一种都还可可以继续细分为更具体的小类。组织培养首先将外植体分离出来,然后在无菌及适当条件下培养以诱导出愈伤组织,另外在愈伤组织随外植体生长一段时间后还需要进行继代培养,以避免代谢产物积累及水分散失等因素的影响。细胞培养可分为悬浮细胞培养、平板培养、饲养层培养和双层滤纸植板几类,它们都是将选定的植物细胞于适当的条件下进行培养,以得到大量基本同步化的细胞,为遗传操作提供材料。花粉及花药培养主要是使花粉改变正常发育途径而转向形成胚状体和愈伤组织,从而产生单倍体植株。离体胚培养有幼......阅读全文

固相萃取技术的方法介绍

  1.选择SPE 小柱或滤膜首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品, 一般

灌流培养系统的技术方法介绍

中文名称灌流培养系统英文名称perfusion culture system定  义细胞接种于培养系统后,一方面新鲜培养液不断地进入反应器内,另一方面又将培养液连续不断地流出,将回收使用过的无细胞等量培养旧液,先经过第二容器,并在第二容器中经通气和pH校正处理后,形成“再生”的培养液,然后再反回进入

基因转移的化学技术方法介绍

有DNA-阳离子-二甲基亚砜法。基因转移的生物学方法包括细胞融合法、脂质体介导法、原生质体融合法等。除以上三种方法外,又出现了颗粒轰击技术,就是将外源DNA包被在金属上,在电场中包被DNA的金属颗粒获得能量并以高速度运动,穿入靶细胞组织或器官内,由于这种金属颗粒可以涂成薄膜状,所以可实现较多细胞的基

电印迹法的技术方法介绍

中文名称电印迹法英文名称electroblotting定  义将经凝胶电泳分离的蛋白质、DNA或RNA条带通过电泳按原位转移到另外的固体支持物上形成印迹的方法。此法比靠毛细管作用的印迹法效率高,速度快。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

细胞破碎技术的主要方法介绍

机械法高压匀浆破碎法(homogenization)高压匀浆器是常用的设备,它由可产生高压的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出阀(discharge valve)组成,排出阀具有狭窄的小孔,其大小可以调节。细胞浆液通过止逆阀进入泵体内,在高压下迫使其在排出阀的小

经皮穿刺技术的方法介绍

  1.根据目的和需要选择穿刺部位  ①股动脉穿刺,最为常用。适合造影的血管,包括胸腹主动脉及其分支、锁骨下动脉及其分支、髂内外动脉及其分支、四肢动脉、颈内外动脉及其分支、椎动脉、左心室及冠状动脉。②肱动脉穿刺。一般用于经股动脉逆行插管有困难,如动脉粥样硬化致髂动脉显著纡曲,或因病变禁忌导管通过患处

光调制技术的调制方法介绍

光调制的方法主要分为直接调制、腔内调制和腔外调制三种。直接调制法外加信号直接控制激光器的泵浦源(如控制半导体激光器的注入电流),从而使激光的某些参量得到调制。腔内调制法腔内调制是通过改变激光器的参数(如增益、谐振腔Q值或光程等)而实现的,主要用于Q开关、腔测空、锁模等技术。腔内调制又分为被动式与主动

关于睾丸活检技术的方法介绍

  睾丸活检是一个只需局麻的门诊小手术,下面介绍几种手术方法:  1)开放活检术  切口选在任一侧睾丸的中线,切开皮肤和被膜,暴露白膜,用刀锋将白膜切开,轻轻挤压睾丸后用小直剪切下组织,标本放入Bouin氏液中而不能使用福而马林。在这个手术中,附睾较活动可仔细评估其形态特征,以排除机械原因。就资料尚

基因转移的物理技术方法介绍

包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原生质膜发生融合,使外源DNA通过细膜上出现的瞬间小孔而进入细胞。

Southern印迹法的技术方法介绍

Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或

双向凝胶电泳的技术方法介绍

  双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的

萃取小柱技术的方法及特点介绍

使用萃取夹代替分液漏斗完成液 - 液萃取,将一种液相混合到一种惰性介质中并经过一会儿地渗滤,与色谱相类似的方式,不相容相进入不流动相。这些萃取小柱同固相萃取小柱一样,在聚乙烯管中填充经煅烧助溶的高纯硅藻土。这些管的体积从0.3-300ml( 有商品出售)。具有大表面的填充物可提高萃取效率、防止水溶液

擦镜纸培养的技术方法介绍

中文名称擦镜纸培养英文名称lens paper culture定  义以显微镜擦镜纸替代基质浮于培养液上,将拟培养的器官原基置于擦镜纸上,在器官原基上滴加1滴培养液,然后放到培养皿内,加盖后送入培养箱中培养的一种技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

斑点印迹法的技术方法介绍

中文名称斑点印迹法英文名称dot blotting定  义将点状样品吸印到特定的膜上进行检测的方法。如用硝酸纤维素膜吸印固体培养基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌体后,与特定的标记探针杂交,从而直接从转化的DNA文库或噬菌体文库中筛选所需要的克隆;将不同稀释度的蛋白质吸附在膜上进行显色反应,

膜片钳记录技术的方法介绍

中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定  义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住(钳住)细胞膜片表面,然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

超高压灭菌技术的方法介绍

  超高压水射流灭菌方法(西南交通大学药学院王盛民教授的发明ZL,ZL申请号:200410040040.5),该方法是一种利用超高压水射流瞬态卸压的膨化作用而使微生物破碎的灭菌方法,在研究的压力范围100~350 MPa内的杀菌效果随着压力的升高而提高,取得了较好的效果,显示了该灭菌方法的可行性,为

色谱法常见的技术方法介绍

色谱法常见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。

原位PCR技术的定义和方法介绍

1.概述:原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。原位PCR是Hasse等于1990年建立的,实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落细胞、血细胞等.2.其基本方法为   

关于细菌染色技术常用的方法介绍

  细菌染色技术常用方法有:  ①革兰氏染色法,是一种复染色方法,即选用结晶紫和石碳酸复红两种染液染色的方法,依此将细菌分成革兰氏阳性菌(记G+)和革兰氏阴性菌(记G-)。  ②简单染色法,是用一种染液染色的方法,如美兰或石碳酸复红等,此法只能显示细菌的形态及大小。  ③特殊结构染色法,是染色细菌细

免疫电镜术的技术方法介绍

中文名称免疫电镜术英文名称immunoelectron microscopy;IEM定  义一种与免疫化学方法相结合的电镜法。样品先作免疫化学染色,再用电镜观察。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

硝酸根的检测技术及方法介绍

目的:认识检验硝酸根离子的方法。用品:试管、试管架、试管夹、量筒。硝酸钾、硫酸亚铁、浓硫酸。原理:硝酸根离子有氧化性,在酸性溶液中能使亚铁离子氧化成铁离子,而自己则还原为一氧化氮。一氧化氮能跟许多金属盐结合生成不稳定的亚硝基化合物。它跟硫酸亚铁反应即生成深棕色的硫酸亚硝基铁:3Fe²﹢+NO₃⁻+4

细胞融合技术的融合方法介绍

同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0

基因转染技术的病毒方法转染介绍

  病毒作为基因转染是基因递送良好的工具,病毒载体的优点有:  (1)在转化的细胞中传播重组的DNA分子作为稳定的遗传成分;  (2)可能将有缺陷的或突变的基因置于病毒调节信号的控制下以进行研究;  (3)能将克隆的基因作为病毒微染色体的一部分 ,并能进行分离;  (4)转移效率较高。其主要缺点是病

临床化学检查方法介绍免疫浊度技术介绍

免疫浊度技术介绍:  免疫浊度技术早期主要用于血清、尿和脑脊液中蛋白质含量的测定。免疫浊度技术是利用可溶性抗原、抗体在液相中特异结合,形成一定大小的抗原抗体复合物,使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时,形成的复合物随抗原量增加而增加,反应液的浊度亦随之增加,与一系列的标准品对照,即可计算出样品

样品前处理方法ASE技术介绍

样品前处理的方法从根本上讲可分为两大类:物理法和化学法,其中物理法包括吸附、离心、蒸馏、升华、过滤、溶剂萃取等,而化学法包括衍生、沉淀、络合等。物理法中的溶剂萃取技术根据不同的机理可分为液-固萃取、柱色谱萃取和液-液萃取。液-固萃取的样品一般为固体形态,利用溶质在不同溶剂中溶解度不同,选择合适的溶剂

关于腹腔镜检查技术的方法介绍

  1.仰卧、消毒、铺无菌巾,按气腹常规在脐左或脐下2~5cm、左腹直肌外缘处,局麻后行人工气腹。注入1500~2000ml氧气或二氧化化碳。腹内压力达16~20mmHg即可。  2.按气腹部位或距肿瘤5cm处,局麻后作小切口,分离肌肉至腹膜,然后插入腹腔镜穿刺针,穿过腹膜后,拔出针芯,用左手拇指堵

膜分离技术法提取果胶的方法介绍

膜技术(Membrane Technology)是用天然或人工合成的高分子薄膜,以外界能量或化学位差为推动力,对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。可用于液相和气相,对于液相分离,可用于水溶液体系、水溶胶体系以及非水溶液体系等。膜技术是一种分子水平上的分离技术。近年来,国外已

粉尘含量检测仪的技术方法介绍

  主要有电容法、B射线法、光散射法、光吸收法、摩擦电法、超声波法、微波法等粉尘浓度在线测量方法。  电容法技术:电容法的测量原理简单,但电容测量值与浓度之间并非一一对应的线性关系,电容的测量值易受相分布及流型变化的影响,导致较大的测量误差;  B射线法技术:虽然测量准确,但需要对粉尘进行采样后对比

​-柱层析技术的装柱方法介绍

装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂

关于酶固定化技术的物理方法介绍

  1、吸附法  吸附法是最早出现的固定化方法,吸附法又可以分为两种,分别是离子交换吸附和物理吸附。这种方法条件比较温和,基本上不会很大程度地改变酶的构象,因此对酶的催化性就不会产生大的影响;但是酶和载体之间却有着比较弱的结合力,这样在一些特殊的条件下,比如有着较高的盐浓度、高温等,酶就很容易从载体