斑点印迹法的技术方法介绍

中文名称斑点印迹法英文名称dot blotting定 义将点状样品吸印到特定的膜上进行检测的方法。如用硝酸纤维素膜吸印固体培养基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌体后,与特定的标记探针杂交,从而直接从转化的DNA文库或噬菌体文库中筛选所需要的克隆;将不同稀释度的蛋白质吸附在膜上进行显色反应,可以进行微量蛋白质的半定量。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

斑点印迹法的技术方法介绍

中文名称斑点印迹法英文名称dot blotting定  义将点状样品吸印到特定的膜上进行检测的方法。如用硝酸纤维素膜吸印固体培养基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌体后,与特定的标记探针杂交,从而直接从转化的DNA文库或噬菌体文库中筛选所需要的克隆;将不同稀释度的蛋白质吸附在膜上进行显色反应,

斑点印迹技术的技术特点

中文名称斑点印迹英文名称dot blot定  义一种定性检测核酸或蛋白质的技术。即将待测核酸或蛋白点样于固相载体上,以同位素或非同位素标记探针与之杂交,通过显影或显色而进行检测。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

斑点印迹技术的技术特点

中文名称斑点印迹英文名称dot blot定  义一种定性检测核酸或蛋白质的技术。即将待测核酸或蛋白点样于固相载体上,以同位素或非同位素标记探针与之杂交,通过显影或显色而进行检测。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

细胞斑点印迹法的原理和应用

应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接

电印迹法的技术方法介绍

中文名称电印迹法英文名称electroblotting定  义将经凝胶电泳分离的蛋白质、DNA或RNA条带通过电泳按原位转移到另外的固体支持物上形成印迹的方法。此法比靠毛细管作用的印迹法效率高,速度快。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

Southern印迹法的技术方法介绍

Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或

斑点印迹的定义

中文名称斑点印迹英文名称dot blot定  义一种定性检测核酸或蛋白质的技术。即将待测核酸或蛋白点样于固相载体上,以同位素或非同位素标记探针与之杂交,通过显影或显色而进行检测。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

色谱法常见的技术方法介绍

色谱法常见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。

膜分离技术法提取果胶的方法介绍

膜技术(Membrane Technology)是用天然或人工合成的高分子薄膜,以外界能量或化学位差为推动力,对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。可用于液相和气相,对于液相分离,可用于水溶液体系、水溶胶体系以及非水溶液体系等。膜技术是一种分子水平上的分离技术。近年来,国外已

基于-PCR-的-DNA-斑点印迹实验

实验方法原理 dNTP ,PCR 缓冲液,聚合酶混合液,嵌套引物,LB-氨苄液体培养基,溶液NaOH,SSC,Tris-HCl,PCR 产物微量滴定板,尼龙膜,紫外交联装置,96 孔或 384 孔复制器,热循环仪,PCR 管或反应板试剂、试剂盒 dNTP PCR 缓冲液聚合酶混合液嵌套引物LB-氨苄

基于-PCR-的-DNA-斑点印迹实验

            实验方法原理 dNTP ,PCR 缓冲液,聚合酶混合液,嵌套引物,LB-氨苄液体培养基,溶液NaOH,SSC,Tris-HCl,PCR 产物微量滴定板,尼龙膜,紫外交联装置,96 孔或 384 孔复制器,热循环仪,PCR 管或反应板

基于-PCR-的-DNA-斑点印迹实验

对于高通量的筛选,推荐使用几个热循环仪厂家提供的 96 孔或 384 孔 PCR 板,或者使用单个的管子。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验方法原理dNTP ,PCR 缓冲液,聚合酶混合液,嵌套引物,LB-氨苄液体培养基,溶液NaOH,SSC,Tris-HCl,PCR

柱层析法的技术介绍

柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。

色谱法常见的技术方法

色谱法常见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。

定量蛋白质斑点印迹实验

            试剂、试剂盒 鼠抗-σ32 单克隆抗体 辣根过氧化酶共价标记的羊抗鼠免疫球蛋白 G ECLTM#1 和#2 试剂 十二烷基肌氨酸钠 Tris-缓冲盐溶液

快速蛋白质斑点印迹试验

试剂、试剂盒 Tris缓冲盐溶液(TBS)TBS+1%牛血清白蛋白TBS+0.1%Tween-20(TBST)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮蓝四唑(BCIP NBT)显色试剂鼠抗σ32单克隆抗体3RH2(MAb 3RH2)兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)~碱性磷酸酶缀合物仪器、耗材 硝酸纤维素膜

快速蛋白质斑点印迹试验

试剂、试剂盒Tris缓冲盐溶液(TBS)TBS+1%牛血清白蛋白TBS+0.1%Tween-20(TBST)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮蓝四唑(BCIP NBT)显色试剂鼠抗σ32单克隆抗体3RH2(MAb 3RH2)兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)~碱性磷酸酶缀合物仪器、耗材硝酸纤维素膜实验步骤

量蛋白质斑点印迹实验

蛋白质印迹法,它是用免疫学方法来测量某一蛋白质的量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒鼠抗-σ32 单克隆抗体辣根过氧化酶共价标记的羊抗鼠免疫球蛋白 GECLTM#1 和#2 试剂十二烷基肌氨酸钠Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材硝酸纤维素膜斑点印迹装置ECLTMHYPER

定量蛋白质斑点印迹实验

试剂、试剂盒 鼠抗-σ32 单克隆抗体辣根过氧化酶共价标记的羊抗鼠免疫球蛋白 GECLTM#1 和#2 试剂十二烷基肌氨酸钠Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材 硝酸纤维素膜斑点印迹装置ECLTMHYPERFILM或柯达 X 光底片缓冲液 A实验步骤 材料与设备样品,由各步纯化操作所得硝酸纤维素膜 (0.

快速蛋白质斑点印迹试验

            试剂、试剂盒 Tris缓冲盐溶液(TBS) TBS+1%牛血清白蛋白 TBS+0.1%Tween-20(TBST) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮蓝四唑(BCIP NBT)显

斑点印迹——优化抗原和抗体浓度

斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超

同源重组法技术介绍

同源重组法:同源重组(homologous recombination)是将外源基因定位导入受体细胞的染色体上,在该座位因有同源序列,通过单一或双交换,新基因片段替换有缺陷的片段,达到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁组装一Neo基因,则在同源重组后,因有Neo基因,可在含有新霉素(neomyci

表面铺展法的方法介绍

中文名称表面铺展法英文名称surface-spread method定  义使切片铺展于玻片或载网上的操作技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

置换色谱法的技术介绍

样品加载到色谱柱上后,用含有一种比样品组分保留作用更强的化合物(顶替剂或置换剂)的流动相洗脱,而将样品组分置换流出色谱柱的分析方法。

酶的包埋法固定化技术凝胶包埋法介绍

  凝胶包埋法常用的载体有海藻酸钠凝胶、角叉菜胶、明胶、琼脂凝胶,卡拉胶等天然凝胶以及聚丙烯酰胺、聚乙烯醇和光交联树脂等合成凝胶或树脂。  天然凝胶采用溶胶状天然高分子物质在酶存在下凝胶化的方法,包埋时条件温和、操作简便,对酶括性的影响甚少,但强度较差。合成的高分子则采用合成高分子的单体或预聚物在酶

原子吸收光谱法进样技术的种类及方法介绍

进样方法直接影响原子化效率、检出限、精密度和准确度。一种好的进样方法应该能高效率、可重复地将有代表性的一部分样品引入原子化器,且没有严重的干扰效应。一、火焰原子吸收光谱法的进样技术气动雾化进样是火焰原子吸收光谱分析使用最广泛的进样方法,此外还有超声雾化等的进样方法。在火焰原子吸收光谱法(FAAS)中

基因转移技术的技术方法介绍

基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。

微波法提取果胶的方法介绍

微波是一种频率为300MHz~300GHz的电磁波,其对应的波长为1mm~1m,比可见光的波长长,属高频波段的电磁波。它具有电磁波的反射、透射、干涉、衍射、偏振以及伴随着电磁波的能量传输等波动特性,还具有高频特性、热特性及非热特性。它主要用于通讯、广播电视等领域。 20世纪60年代开始,人们逐渐将微

反复贴壁法纯化的方法介绍

成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞能在短时间内(大约10~30min)完成附着过程(但不一定完全伸展),而上皮细胞(大部分)在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,利用此差别可以纯化细胞。其方法如下:(1)将细胞悬液接种在一个培养瓶内(最好培养液内不含血清,此时上皮细胞贴壁更

免疫比浊法的方法介绍

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。