[淋巴细胞]杂交瘤的定义
中文名称[淋巴细胞]杂交瘤英文名称hybridoma定 义肿瘤细胞与正常来源淋巴细胞融合产生的杂种细胞。实际上多指T或B淋巴细胞与骨髓瘤细胞系融合成的杂交瘤细胞。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)......阅读全文
[淋巴细胞]杂交瘤的定义
中文名称[淋巴细胞]杂交瘤英文名称hybridoma定 义肿瘤细胞与正常来源淋巴细胞融合产生的杂种细胞。实际上多指T或B淋巴细胞与骨髓瘤细胞系融合成的杂交瘤细胞。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
杂交瘤细胞系的定义
骨髓瘤细胞与产生抗体的B细胞融合而构成的细胞,可在培养液中生长繁殖的细胞系,用于单克隆抗体的制备等方面的研究。
淋巴细胞的定义
淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞,由淋巴器官产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,可分为T淋巴细胞(又名T细胞)、B淋巴细胞(又名B细胞)和自然杀伤(NK)细胞。T细胞和B细胞都是抗原
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术 实验方法原理 1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术
实验方法原理1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术
实验方法原理 1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术(一)
实验方法原理 1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术(二)
2. HAT选择杂交瘤 一般在融合24 小时后,加HAT选择培养液。HT和HAT均有商品化试剂50×贮存,用时1 ml加入50 ml20 %小牛血清完全培养液中。 因为在培养板内已加入饲养细胞、融合后的细胞,200 μl/孔。所以在加选择培养液时应加3倍量的HAT。我们认为,融合后最初补加的量可用
淋巴细胞再循环的定义
淋巴细胞再循环是指定居在外周免疫器官的淋巴细胞,由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环;经血液循环到达外周免疫器官后,穿越HEV,重新分布于全身淋巴器官和组织的反复循环过程。
淋巴细胞再循环的定义
淋巴细胞再循环是指定居在外周免疫器官的淋巴细胞,由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环;经血液循环到达外周免疫器官后,穿越HEV,重新分布于全身淋巴器官和组织的反复循环过程。
淋巴细胞再循环的定义
淋巴细胞再循环是指定居在外周免疫器官的淋巴细胞,由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环;经血液循环到达外周免疫器官后,穿越HEV,重新分布于全身淋巴器官和组织的反复循环过程。
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备方法
制备单克隆抗体包括动物免疫、细胞融合、选择杂交瘤、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆化、冻存以及单克隆抗体的大量生产,要经过几个月的一系列实验步骤,下面按照制备单克隆抗体的流程顺序,逐一介绍其实验方法。一、细胞融合前准备(一) 免疫方案选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功,获得高质量的McAb至关重要。
淋巴细胞杂交瘤(hybridoma)单克隆抗体技术2
(三) 骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞系应和免疫动物属于同一品系,这样杂交融合率高,也便于接种杂交瘤细胞在同一品系小鼠腹腔内产生大量 McAb。 常用骨髓瘤细胞系有:NS1、SP2/0、X63 Ag8.653 等。 骨髓瘤细胞的培养适合于一般的培养液,如RPMI1640,DMEM培养基。小牛血清的浓度
淋巴细胞杂交瘤(hybridoma)单克隆抗体技术1
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫
淋巴细胞计数定义及原理
成人淋巴细胞约占白细胞的1/4,为人体主要免疫活性细胞。淋巴细胞同样丰收源于多能干细胞,在骨髓、脾、淋巴结和其它淋巴组织生成中惊讶发育成熟者称为B淋巴细胞,在积压液中占淋巴细胞的20-30%.B细胞寿命较短,一般仅3-5天,经抗原激素活后分化为浆细胞,产生特异性抗体,参与体液免疫。在胸腺、脾、淋
淋巴细胞计数定义及原理
淋巴细胞计数 成人淋巴细胞约占白细胞的1/4,为人体主要免疫活性细胞。淋巴细胞同样丰收源于多能干细胞,在骨髓、脾、淋巴结和其它淋巴组织生成中惊讶发育成熟者称为B淋巴细胞,在积压液中占淋巴细胞的20-30%.B细胞寿命较短,一般仅3-5天,经抗原激素活后分化为浆细胞,产生特异性抗体,参与体液免疫。在
淋巴细胞介导的细胞裂解的定义
中文名称淋巴细胞介导的细胞裂解英文名称lymphocyte-mediated cell lysis定 义即细胞毒性T细胞或NK细胞可通过颗粒胞吐而分泌穿孔素和颗粒酶等效应分子,损伤靶细胞膜并使之裂解。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
淋巴细胞介导的细胞裂解的定义
中文名称淋巴细胞介导的细胞裂解英文名称lymphocyte-mediated cell lysis定 义即细胞毒性T细胞或NK细胞可通过颗粒胞吐而分泌穿孔素和颗粒酶等效应分子,损伤靶细胞膜并使之裂解。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术3
抗体的制备方法与原理一、抗血清的制备 有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术4
(二)细胞融合 1.细胞融合前准备 (1)骨髓瘤细胞系的选择:骨髓瘤细胞应和免疫动物属于同一品系,这样杂交融合率高,也便于接种杂交瘤在同一品系小鼠腹腔内产生大量McAb。常用的骨髓瘤细胞系见表2-4。表2-4用于融合试验的主要骨髓瘤细胞系名 称来 源耐 受 药 物Ig链H LP3/X63-Ag
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术1
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术5
免疫组化染色方法 SP法1)脱蜡、水化;2)PBS洗2~3次各5分钟;3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟;4)PBS洗2~3次各5分钟; 5)抗原修复;6)PBS洗2~3次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗50μl,室温静置1小
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术2
检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同,选择不同的筛选方法,一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。 常用的方法有: 1. ELISA用于可溶性抗原蛋白质、细胞和病毒等McAb的检测。 2. RIA用于可溶性抗原、细胞McAb的检测。 3. FACS荧光激活细胞分类仪用于检查细胞
混合淋巴细胞试验的定义和原理
中文名称混合淋巴细胞试验英文名称mixed lymphocyte test定 义检测同种异体间组织相容性程度的试验。即将两个不同个体淋巴细胞混合培养,淋巴细胞增殖强度与个体间组织相容性呈负相关。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
淋巴细胞细胞毒试验的定义和方法
中文名称淋巴细胞细胞毒试验英文名称lymphocytotoxicity test;LCT定 义通过细胞毒性T细胞与靶细胞直接接触而测定其特异性杀伤活性。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
淋巴细胞细胞毒试验的定义和目的
中文名称淋巴细胞细胞毒试验英文名称lymphocytotoxicity test;LCT定 义通过细胞毒性T细胞与靶细胞直接接触而测定其特异性杀伤活性。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
杂交瘤细胞的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死,用75
杂交瘤细胞的筛选
杂交瘤细胞的筛选 在细胞融合后,要从上述五种细胞中筛选出杂交瘤细胞,一般使用HAT培养进行筛选,HAT培养基中含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶(T)三种成分。细胞的DNA合成有内源性途径(主要途径)和外源性途径(旁路途径)两种方式。内源性途径就是利用谷氨酰胺或单磷酸尿苷酸在二氢叶酸还原