质粒获救的技术简介

中文名称质粒获救英文名称plasmid rescue定 义一种通过构建同源辅助质粒,使携带外源DNA的外来质粒能与之重组而被摄入细菌的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)......阅读全文

质粒获救的技术简介

中文名称质粒获救英文名称plasmid rescue定  义一种通过构建同源辅助质粒,使携带外源DNA的外来质粒能与之重组而被摄入细菌的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇质粒获救

中文名称:质粒获救英文名称:plasmid rescue定  义:一种通过构建同源辅助质粒,使携带外源DNA的外来质粒能与之重组而被摄入细菌的技术。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

关于质粒载体的简介

  质粒是小型环状DNA分子,大小为1~200kb(1kb=1000碱基对)。质粒不同于病毒,是裸露的DNA分子,没有外壳蛋白,在基因组中,也没有溶菌酶基因。质粒在宿主细胞内才能完成自身复制,同时将编码的一些非染色体控制的遗传性状进行表达,赋予宿主细胞一些额外的特性,包括抗性特性、代谢特性等,其中对

关于质粒载体的特点简介

  质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下:  是染色质外的双链共价闭合环形DNA  (covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,15kb的大质粒

质粒DNA提取技术

实验概要通过本实验,学习和掌握碱裂解法提取质粒的方法和技术。实验原理质粒是基因工程中常用的载体之一。质粒是染色体外小型双链环状的DNA,大小在1~200kb之间。碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们的。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线

关于黏性质粒载体的简介

  由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位

质粒提取简介及问题分析

一、导论 质粒提取的原理:转自复旦大学一位老师的帖子,后面是方法介绍 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实

标记获救法方法介绍

这是一种结合物理图谱制作和遗传学分析的基因定位方法,它适用于病毒等基因组较小的生物。以大肠杆菌噬菌体ΦX174为例,把野生型噬菌体的双链复制型DNA分子用限制性内切酶HindⅡ切为13个片段,把每种片段和突变型 amg的DNA单链在使DNA分子变性并复性的条件下混合保温,然后用各个样品分别转化受体细

2015年最热门的质粒技术

  无论是克隆和表达、还是基因组编辑,质粒都是我们必备的工具。常用的质粒,实验室一般都有,或者隔壁实验室有,那就你有我有大家有。不过,对于基因组编辑这种新的应用,手头的质粒肯定不合适。2015年有哪些热门的质粒技术出现?Addgene最近有统计。  分裂的Cas9系统  大家都知道,Cas9蛋白是由

用标记获救法进行基因定位

标记获救法这是一种结合物理图谱制作和遗传学分析的基因定位方法,它适用于病毒等基因组较小的生物。以大肠杆菌噬菌体ΦX174为例,把野生型噬菌体的双链复制型DNA分子用限制性内切酶HindⅡ切为13个片段,把每种片段和突变型 amg的DNA单链在使DNA分子变性并复性的条件下混合保温,然后用各个样品分别

分子遗传学词汇标记获救

中文名称:标记获救英文名称:marker rescue定  义:带突变标记的噬菌体和正常噬菌体感染宿主细胞,裂解产生的子代噬菌体中大多数为正常噬菌体,少数噬菌体则由于突变基因掺入了正常噬菌体的基因组而使突变标记得到保留,称为标记获救。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

标记获救法进行基因定位的方法介绍

这是一种结合物理图谱制作和遗传学分析的基因定位方法,它适用于病毒等基因组较小的生物。以大肠杆菌噬菌体ΦX174为例,把野生型噬菌体的双链复制型DNA分子用限制性内切酶HindⅡ切为13个片段,把每种片段和突变型 amg的DNA单链在使DNA分子变性并复性的条件下混合保温,然后用各个样品分别转化受体细

标记获救法进行基因定位的方法介绍

每一种转导噬菌体有一定的大小,只能携带一定长度的供体细菌的 DNA。例如大肠杆菌噬菌体PI的头部中只能包装大约分子量为5.8×10的DNA,大肠杆菌的染色体DNA的分子量是2.5×10,所以PI所能包装的 DNA至多相当于大肠杆菌的遗传学图上相距两分钟这样一段DNA分子。如果两个基因能同时被转导,这

美国PSS公司AccuSizer杂质粒度仪简介

AccuSizer780系列采用先进的SPOS单颗粒技术和带有ZL的自动稀释进样模块,能真实地测试出样品尾端大粒子的粒度分布和颗粒浓度,具有超高的辨析率和快速测试能力。最高计数可达到E11个/mL, 从而确保各种分散体系的稳定性和品质。单颗粒传感技术填补了其他技术在检测粒径分布中的重要不足——粒子数

质粒不相容性现象简介

同种的或亲缘关系相近的两种质粒不能同时稳定地保持在一个细胞内的现象,称为质粒不相容性。当一种新的质粒进入已经含有质粒的细胞中时,若两种质粒同源或近缘,它们就会竞争资源,而竞争的结果就是一个胜利另一个则被消除。但此过程需要几代或几十代或更长的细菌繁殖周期,而并不是一个快速的过程。质粒被分为两大组,同组

碱裂解法提取质粒实验技术分析

碱裂解法提取质粒实验技术分析[实验原理]羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会

质粒

Extrachromosomal Elements-Plasmids (Michael Blaber)What's plasmid? Find answer here. It provides background information on the features of plasmid

质粒的概念

质粒:原核、细菌、小环DNA。松弛型和严紧型2类。

质粒的制备

实验材料 大肠杆菌菌液试剂、试剂盒 LA培养基LB培养基75%乙醇仪器、耗材 摇床离心机超净台TE

质粒的制备

构建载体             实验方法原理 在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状

质粒的制备

实验方法原理 在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下,大部分染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀,而质粒DNA仍然为可溶状态

质粒的制备

质粒的制备可以用于(1)携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用;(2)质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。实验方法原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调

质粒的定义及质粒的生物学功能

定义:质粒是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子,主要存在于一些细菌和酵母菌中;生物学功能:有一些质粒携带的基因则可以赋予细胞额外的生理代谢能力,乃至于在一些细菌中提高它的致病力。一般来说,质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。

复旦中山医院突破黄疸禁区-巨型肝癌患者获救

   近日,一位伴有重度黄疸(总胆红素)高达411μmol/L、直径20厘米巨大肝肿瘤、生命垂危的女患者,奇迹般在复旦大学附属中山医院获救,经第二次介入治疗后,10月17日已出院。  来自内蒙56岁的王女士(化名)身体一直不错,近3年来从未参加过单位组织的体检。今年8月初突感无力,且愈来愈严重,食欲

酵母细胞中质粒的加工实验_穿梭质粒

实验材料带有一个非URA3选择标记YCp载体试剂、试剂盒缺失成分平板+Ura含有5-FOAYCp质粒选择性培养基的平板YPD平板YIP5载体仪器、耗材培养皿实验步骤1) 构建染色体上重要基因被破坏的单倍体菌株以及含有完整重要基因和URA3选择标 记的YEp或YCp质粒。2) 对于诱发突变,将重要基因

震区仍连着脐带的叙利亚新生儿,在废墟中获救

截至北京时间2月7日17时30分,土耳其东南部及其周边地区至少发生312次余震。据央视新闻2月8日早消息,地震已造成土耳其及其邻国叙利亚超7700人死亡。叙利亚一新生儿从废墟中获救:发现时仍连着脐带 父母均遇难据海外网2月8日电 据法新社2月7日报道,叙利亚一名新生儿日前从废墟中被人救出,她被发现时

质粒提取

一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA,这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载

质粒提取

一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA,这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载

质粒转化

[ 基本原理 ] 将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时间热冲

分子杂交技术的技术简介

  杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的,也可以在细胞内杂交, 即细胞原位杂交。探针必须经过标记,以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素, 但由于同位素的安全性,近年来发展了许多非同