核小体的监测方法

许多不同的技术已被用于检测AnuA,除了LE细胞试验以外,还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验,以及免疫沉淀(用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品,但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预备品,并能分析凝胶电泳后的蛋白质和DNA的组成。染色质的类型分析以及阴、阳性判断对于辅助诊断SLE患者而获取高敏感性和特异性是非常重要的。第一种研究用于以变性的H2A和H2B作为抗原进行DNA再造,由血清结合上组织蛋白的变性区域,即天然染色质非暴露部分;第二种研究用于整条染色质作为抗原,剩余的Scl70蛋白引起抗Scl70,血清在此情况下产生弱阳性;第三种研究用于一个阴、阳性的弱的(低的)判断(硬皮患者血清呈现弱阳性)。第一代与第二代核小体检测技术的比较通过对SLE组(96例)、患者对照组(73例)、正常对照组(47例)进行AnuA和......阅读全文

核小体的概念和结构特点

核小体是由DNA和组蛋白形成的染色质基本结构单位。每个核小体由146bp的DNA缠绕组蛋白八聚体1.75圈形成。核小体核心颗粒之间通过50bp左右的连接DNA相连。H1结合在盘绕在八聚体上的DNA双链开口处,核小体的形状类似一个扁平的碟子或一个圆柱体,此时DNA的长度压缩7倍,称染色质纤维。染色质就

核小体的基本单位

核小体是染色体的基本单位,是染色质的基本结构亚基。生物学意义揭示了DNA作为遗传物质稳定性的结构特征;确认了碱基互补配对原则。

关于核小体的实验研究介绍

  早在1956年为双螺旋模型提供X衍射证据的Wilkins和另一位科学家Vittorio Luzzati对染色质进行了X衍射研究,发现染色质中具有间隔为10 nm的重复性结构。蛋白质和DNA本身的结构从来不会表现出这种重复性。推测可能是组蛋白和DNA的结合方式迫使DNA折叠或缠绕成具有10 nm周

细胞化学词汇核小体装配

中文名称:核小体装配英文名称:nucleosome assembly定  义:在核小体装配因子调节下,由DNA链和组蛋白组装成核小体的过程。装配先以两分子H3/H4组蛋白构成的四聚体与DNA结合,再结合上两分子H2A/H2B组蛋白构成的四聚体,形成核小体核心颗粒,再与H1组蛋白连接形成核小体。应用学

什么是核小体核心颗粒?

中文名称核小体核心颗粒英文名称nucleosome core particle定  义由长度为146 bp的DNA区段与各两分子的H3/H4/H2A/H2B组蛋白八聚体组成。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

核小体的研究进展的介绍

  国内已有少数医院开展了AnuA的检测,也已发表了数篇相关报道。有文献报道,以核小体多肽特异性抗原治疗鼠狼疮模型的研究发现,核小体多肽特异性抗原可以抑制TH细胞和B细胞的激活,从而为研究SLE的发病机制治疗带来了新的曙光[20]。但需要指出的是:AnuA的检测对SLE的诊断有重要意义,不同的核小体

关于核小体的检测技术的介绍

  许多不同的技术已被用于检测AnuA,除了LE细胞试验以外,还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验,以及免疫沉淀(用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品,但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定

用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验

实验方法原理 实验材料 牛胸腺 DNA放射性标记的 DNA纯化的天然核心组蛋白试剂、试剂盒 NaClTE 缓冲液仪器、耗材 MWCO 透析管实验步骤 1. 准备如下的重组混合液:约 8 ug 未标记的超声破碎的牛胸腺 DNA (作为载体 DNA; 加自 1~2 mg/ml 储液)200 000~40

用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验

实验材料牛胸腺 DNA放射性标记的 DNA纯化的天然核心组蛋白试剂、试剂盒NaClTE 缓冲液仪器、耗材MWCO 透析管实验步骤1. 准备如下的重组混合液:约 8 ug 未标记的超声破碎的牛胸腺 DNA (作为载体 DNA; 加自 1~2 mg/ml 储液)200 000~400 000 cpm 单

抗核小体抗体检测的原理

  将高度纯化的核小体靶抗原固定于微孔板上,患者血清中的抗核小体抗体可与之结合,通过辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体(抗人IgG)反应及酶底物/色原显色,即可检测此抗体。

核小体模型的建立基础和研究

人们接着用化学交联、高盐分离组蛋白,以及X衍射等方法进一步研究组蛋白多聚体的结构、排列以及怎样和DNA结合的,从而建立了核小体模型。1984年Klug和Butler进行了修正。核小体的构造可用图表示:每一个核小体结合的DNA总量为200bp左右,一般在150~250变化范围(micrococcal

抗核小体抗体的检测及应用

  凋亡细胞是核小体的重要来源,当SLE患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低,导致核小体在患者体内大量存积,多聚核小体与活化的单核细胞结合后被抗原递呈细胞呈递给CD4+Th2细胞,Th2细胞增殖活化,激活B细胞产生抗核小体抗体(AnuA)。  AnuA特异性高,与SLE病情活动性相关,通常采

核小体核心颗粒的基本概念

中文名称核小体核心颗粒英文名称nucleosome core particle定  义由长度为146 bp的DNA区段与各两分子的H3/H4/H2A/H2B组蛋白八聚体组成。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇核小体核心颗粒

中文名称:核小体核心颗粒英文名称:nucleosome core particle定  义:由长度为146 bp的DNA区段与各两分子的H3/H4/H2A/H2B组蛋白八聚体组成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

关于核小体的注意事项的介绍

  AnuA被定义为与组织蛋白暴露在染色质的部分发生反应的抗体,在染色质内找到的DNA结构,或者一个由天然组织蛋白?DNA复合物构成的表位,特别要排除的是抗体与非组织蛋白的反应和隐藏在染色质内的组织蛋白表位的反应,以及与DNA结构如A、C以及Z构型的反应。这些在染色质中均不存在,因此,并不是所有组织

关于核小体染色体的基本介绍

  染色体是一个独立行动的结构单位,在细胞分裂时传递给子细胞一份染色体拷贝。因此每条染色体必须能复制,所复制的拷贝最后分离并被正确地分配到两个子细胞中。这些基本功能是由真核生物染色体三种特定的DNA序列所控制,即DNA复制起点、着丝粒和端粒。  从DNA到染色体不论是形态还是长度都相差很大。人类最长

核小体识别和泛素化机制,有助开发更好的癌症治疗方法

  在一项新的研究中,来自美国梅奥诊所的研究人员利用先进的成像技术,对BRCA1-BARD1蛋白复合物有了前所未有的了解,该复合物在乳腺癌或卵巢癌患者中经常发生突变。这项研究确定了BRCA1-BARD1功能的多个方面,为未来的转化研究、癌症预防工作和药物开发提供了支持。相关研究结果于2021年7月2

临床化学检查方法介绍中性粒细胞核鼓槌小体介绍

中性粒细胞核鼓槌小体介绍:  中性粒细胞核鼓槌小体是细胞上的一种球形或椭圆形突起。其检查方法是采周围血做涂片,甲醇液固定,吉姆萨染色,油镜下观察。一般女性多核白细胞的核鼓槌出现率为2%-3%,而男性几乎没有。中性粒细胞核鼓槌小体正常值:  男性:1.5%中性粒细胞核鼓槌小体临床意义:  鉴别两性畸形

临床化学检查方法介绍嗜中性粒细胞核鼓槌小体

嗜中性粒细胞核鼓槌小体介绍:  鼓槌小体,在成熟中性粒细胞(杆状或分叶)核之一端(或其他部位),可见有一直径2-4μm向外伸出之突起,其头部(顶端)椭圆或更似鼓锤状,故而得名。一个细胞中通常含有一个,有时含有两个,染色与胞核一致。有人以此来鉴别男性与女性。正常成人,中性粒细胞含性染色体者,女性占5%

单聚及二聚核小体的纯化实验

实验材料寡聚核小体中等或大的寡聚核小体成分试剂、试剂盒CaCl2MgCl2微球菌核酸酶EDTA甘油梯度缓冲液仪器、耗材超速离心机聚异质同晶管梯度制备装置实验步骤1. 解冻约 1 ml 寡聚核小体(约 1~2 mg/ml 比较理想),预热到 30℃。2. 加入 100 mmol/L CaCl2 至终浓

单聚及二聚核小体的纯化实验

实验材料寡聚核小体中等或大的寡聚核小体成分试剂、试剂盒CaCl2MgCl2微球菌核酸酶EDTA甘油梯度缓冲液仪器、耗材超速离心机聚异质同晶管梯度制备装置实验步骤1. 解冻约 1 ml 寡聚核小体(约 1~2 mg/ml 比较理想),预热到 30℃。2. 加入 100 mmol/L CaCl2 至终浓

单聚及二聚核小体的纯化实验

实验方法原理 实验材料 寡聚核小体中等或大的寡聚核小体成分试剂、试剂盒 CaCl2 MgCl2 微球菌核酸酶EDTA甘油梯度缓冲液仪器、耗材 超速离心机聚异质同晶管梯度制备装置实验步骤 1. 解冻约 1 ml 寡聚核小体(约 1~2 mg/ml 比较理想),预热到 30℃。2. 加入 100 mmo

抗核小体抗体检测的临床意义

  1.抗核小体抗体近年来已成为系统性红斑狼疮(SLE)的标志抗体,其敏感性高、特异性强,对SLE诊断有越来越重要的意义。AnuA对SLE的敏感性为60%~80%,特异性为97%~99%。2.AnuA多见于活动性狼疮,特别是狼疮肾,尤其对抗dsDNA抗体、抗DNP抗体、抗Sm抗体、抗组蛋白抗体阴性的

去-H1-的寡聚核小体的离心实验

实验材料精核微球菌核酸酶试剂、试剂盒MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA无蔗糖的 HSBSDS透析缓冲液仪器、耗材匀浆器冷冻超速离心机MWCO 透析袋梯度制备装置(用于离心)针头管子实验步骤1. 用 40 ml MSB 重悬约 2 ml 精核。4℃,10 000 g 离心 10 min(用

抗核小体抗体的检测及应用是什么?

  凋亡细胞是核小体的重要来源,当SLE患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低,导致核小体在患者体内大量存积,多聚核小体与活化的单核细胞结合后被抗原递呈细胞呈递给CD4+Th2细胞,Th2细胞增殖活化,激活B细胞产生抗核小体抗体(AnuA)。  AnuA特异性高,与SLE病情活动性相关,通常采

酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定的步骤

  1、将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体;  2、在微定量板上吸附组蛋白体;  3、加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合;  4、加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合;  4、加酶的底物,测光吸收制。

人类遗传物质中首次发现前核小体

  据美国物理学家组织网8月18日报道,美国科学家在人类遗传物质中发现了一种新物质并将其命名为“前核小体”。科学家们认为,这种新物质是位于染色质和核小体之间的中间物质,新发现有望让生物教科书小小地“变脸”。相关研究发表在8月19日的《分子细胞》杂志上。  染色质是细胞周期间期细胞核内能被碱性染料染色

去-H1-的寡聚核小体的凝胶过滤实验

实验材料精核微球菌核酸酶试剂、试剂盒MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA无蔗糖的 HSBSDS透析缓冲液仪器、耗材匀浆器冷冻超速离心机MWCO 透析袋梯度制备装置(用于离心)针头管子实验步骤1. 用 40 ml MSB 重悬约 2 ml 精核。4℃,10 000 g 离心 10 min(用

抗核小体抗体检测的原理及临床意义

  原理  将高度纯化的核小体靶抗原固定于微孔板上,患者血清中的抗核小体抗体可与之结合,通过辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体(抗人IgG)反应及酶底物/色原显色,即可检测此抗体。  临床意义  1.抗核小体抗体近年来已成为系统性红斑狼疮(SLE)的标志抗体,其敏感性高、特异性强,对SLE诊断有

华人科学家Nature公布核小体分布图

  来自美国西北大学分子生物学系,统计系等处的研究人员发表了题为“A map of nucleosome positions in yeast at base-pair resolution”的文章,通过建立了一种新方法,在全基因组范围内分析核小体分布的位置,这将有助于揭示体内与转录相关的核