荧光标记杂交信号的检测方法
使用荧光标记物的研究者最多，因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物，并具有很好的空间分辨率和热分辨率，特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时，分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率，而在传统的显微镜是很难做到的，这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在入射照明式荧光显微镜（epifluoescence microscope）基础上发展起来的，包括激光扫描荧光显微镜、激光共焦扫描显微镜、使用了CCD相机的改进的荧光显微镜以及将DNA芯片直接制作在光纤维束切面上并结合荧光显微镜的光纤传感器微阵列。这些方法基本上都是将待杂交对象 以荧光物质标记，如荧光素或丽丝胶（lissamine）等，杂交后经过SSC和SDS的混合溶液或SSPE等缓冲液清洗。......阅读全文
荧光标记杂交信号的检测方法
使用荧光标记物的研究者最多，因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物，并具有很好的空间分辨率和热分辨率，特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时，分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率，而在传统的显微镜是很难做到的，这便为D
荧光标记杂交信号的检测方法
使用荧光标记物的研究者最多，因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物，并具有很好的空间分辨率和热分辨率，特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时，分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率，而在传统的显微镜是很难做到的，这便为D
荧光标记杂交信号的检测方法
由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在
杂交信号的放大实验——地高辛标记探针的信号
实验材料杂交信号试剂、试剂盒地高辛SSCBSA荧光素仪器、耗材加湿盒水浴锅培养箱实验步骤1. 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片（见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤1~6）。 2. 加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上，盖以22 mm2 大小的Parafilm 膜，
荧光素FITC标记抗体的方法
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键（thiocarbmide）结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般zui多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FI
荧光原位杂交的方法介绍
荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术，是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。
共聚焦荧光探针标记方法
（一）BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入BCECF-AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。PBS（含Ca2+、M
荧光原位杂交的荧光原位杂交
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子（reporter molecule）结
荧光原位杂交检测领域发展
鉴于FISH 起始阶段的发展主要是探针类型和检测位点的扩展，荧光检测技术将来的发展可能包括检测领域的扩展。荧光图像临床诊断应用需要在检测体系上进一步提高，如探针的结合，照相和分析的自动化，因此避免了不同操作间的误差。样品厚度是荧光显微镜检测样品类型的一个限制因素。近来的激光共聚焦显微镜和光学X射
荧光原位杂交（FISH）和用引物介导的原位标记（PRINS）...
荧光原位杂交（FISH）和用引物介导的原位标记（PRINS）操作规程设备 1、 医用微波炉； 2、 水浴锅； 3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜； 4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂 （1）1×PBS：由10×PBS溶液稀释而成，储存
细胞骨架的荧光探针标记方法
细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT)，微丝(microfilament, MF)，中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组
杂交信号的放大实验
实验材料 杂交信号试剂、试剂盒 生物素SSC荧光素亲和素仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 1. 用生物素酰化探针与切片进行杂交、洗涤，进行第一轮杂交信号检测。 2. 如切片已承加盖玻片并密封。可用一针头或解剖刀片划开密封的指甲油，移去盖玻片， 并除去载玻片上指甲油。将玻片浸于0.1%Trit
荧光原位杂交实验方法
荧光原位杂交实验方法，实验原理荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色
无需荧光标记也能检测基因
美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料，开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法，有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。 科学家称，他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症，还能探测出在组织中存在的病毒，同时可用于法医
无需荧光标记也能检测基因
据物理学家组织网近日报道，美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料，开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法，有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。 科学家称，他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症，还能探测出
关于Southern杂交的探针标记简介
用于Southern印迹杂交的探针可以是纯化的DNA片段或寡核苷酸片段。探针可以用放射性物质标记或用地高辛标记，放射性标记灵敏度高，效果好；地高辛标记没有半衰期，安全性好。人工合成的短寡核苷酸可以用T4多聚核苷酸激酶进行末端标记。探针标记的方法有随机引物法、切口平移法和末端标记法。
原位杂交组织化学杂交体检测
杂交体检测又称杂交体显示，是指通过一定方法使杂交反应形成的杂交体（杂交信号）成为在显微镜下可识别的产物。对原位杂交反应信号进行显示的方法因探针标记物不同而异。 （一）放射性核素标记探针的检测 *个原位杂交实验（1969年）以’H作为核酸探针的标记物，杂交信号用放射自显影术检测。随着
美开发出无需荧光标记的新型DNA和RNA检测方法
据物理学家组织网近日报道，美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料，开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法，有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。科学家称，他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症，还能探测出在组织中存在
基因芯片检测原理
杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法，如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、化学发光、荧光各向异性等等，但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质，需要确定杂交信号在芯片上的位置，尤其是大规模DNA芯片由于
生物芯片的检测原理
杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法，如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、 化学发光、荧光各向异性等等，但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质，需要确定杂交信号在芯片上的位置，尤其是大规模DNA芯
荧光原位杂交实验——荧光原位杂交技术
荧光原位杂交可应用于：（1）动植物基因组结构研究；（2）染色体精细结构变异分析；（3）病毒感染分析；（4）肿瘤遗传学和基因组进化研究。实验方法原理用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵
基因芯片的检测原理
杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法，如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、化学发光、荧光各向异性等等，但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质，需要确定杂交信号在芯片上的位置，尤其是大规模DNA芯片由于
原子荧光检测时无信号的原因以及解决方法
一、 无载气或无屏蔽气检查气路是否打开，确保压力表主表压力在2.0MPa以上，分压表在0.2~0.3MPa之间。屏蔽气与载气接错或炉芯破裂，两气混合。二、 氢化物反应没有发生确保泵管路连接正确，压管阀压紧，泵管无破损漏液现象，硼氢化钾要现用现配，仔细观察反应块内会有气泡生成。三、
非同位素探针进行原位杂交实验地高辛标记探针信号放大
试剂、试剂盒10μg ml 羊抗地筒辛抗体 Fab 片段 溶于 4×SSC 1% m VBSA (组分V)地高辛信号放大溶液：3. 5〜7. 0 ug ml荧光素标记的兔抗羊IgG (Sigma) 溶于 4×SSC 1% m V BSA (组分 V)仪器、耗材Parafilm 膜玻片实验步骤1) 用
基因芯片检测原理（二）
1．荧光标记杂交信号的检测方法使用荧光标记物的研究者最多，因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物，并具有很好的空间分辨率和热分辨率，特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时，分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率，而在传统
细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病，
基因芯片检测原理（一）
基因芯片的基本原理同芯片技术中杂交测序（sequencing by hybridization, SBH）。即任何线状的单链DNA或RNA序列均可被分解为一个序列固定、错落而重叠的寡核苷酸，又称亚序列（subsequence）。例如可把寡核苷酸序列TTAGCTCATATG分解成5个8 nt亚
荧光原位杂交和用引物介导的原位标记（PRINS）操作规程
仪器设备 1、 医用微波炉； 2、 水浴锅； 3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜； 4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂 （1）1×PBS：由10×PBS溶液稀释而成，储存于4℃； （2）20×SSC（pH7.0）； （
荧光原位杂交和用引物介导的原位标记（PRINS）操作规程
仪器设备 1、 医用微波炉； 2、 水浴锅； 3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜； 4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。 FISH试剂 （1）1×PBS：由10×PBS溶液稀释而成，储存于4℃； （2）20×SSC（pH7.0
LSCM的荧光标记
传统应用于荧光标记的染料如异硫氰酸荧光素(fluorescin isothiocyanate，FITC，ex 490 nm/em520 nm)、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC，ex 550 nm/em 620 nm)、罗丹明(Rhodamine，ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)