RNAi具有的特征
①RNAi是转录后水平的基因沉默机制;②RNAi具有很高的特异性,只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA;③RNAi抑制基因表达具有很高的效率,表型可以达到缺失突变体表型的程度,而且相对很少量的dsRNA分子(数量远远少于内源mRNA的数量)就能完全抑制相应基因的表达,是以催化放大的方式进行的;④RNAi抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限,在不同细胞间长距离传递和维持信号甚至传播至整个有机体以及可遗传等特点;⑤dsRNA不得短于21个碱基,并且长链dsRNA也在细胞内被Dicer酶切割为21 bp左右的siRNA,并由siRNA来介导mRNA切割。而且大于30 bp的dsRNA不能在哺乳动物中诱导特异的RNA干扰,而是细胞非特异性和全面的基因表达受抑和凋亡;⑥ATP依赖性:在去除ATP的样品中RNA干扰现象降低或消失显示RNA干扰是一个ATP依赖的过程。可能是Dicer和RISC的酶切反应必须由ATP提供能量。......阅读全文
RNAi基因沉默方法
大约在十年前,2006年诺贝尔生理/医学奖得主CraigMello和AndrewFire发现,他们能够将短RNA 分子插入到线虫中并沉默特定基因的表达。今天,研究人员也常常使用这种强大的RNA 干扰方法来研究哺乳动物系统中的特定基因功能。为了进行这种基因沉默实验,研究人员通常需要依赖化学合成的RNA
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够
RNAi放大效应机制
由于在一些生物中RNAi的影响格外显著,有人提出在RNAi 途径中可能存在某个(信号)扩增的步骤。这种扩增可能是复制外源注入的dsRNA从而产生更多的siRNA ,也可能是直接扩增siRNA本身。这种扩增可能在RNA诱导沉默复合物(RISC)形成过程进行,作为RISC形成的补充,或者独立于R
BLOCKiT-RNAi-Designer
Allows you to design synthetic siRNA, Stealth RNA, or shRNA molecules from nucleotide target sequences, or convert an siRNA molecule sequence into a S
RNAi原理图解
The Mechanism of RNA Interference (RNAi)Long double-stranded RNAs (dsRNAs; typically >200 nt) can be used to silence the expression of target genes in
汽车检具如何保养
随着汽车检具设计、精度的不断提高。很多的汽车检具都需要做更充分的保养来延长其使用寿命。下面,介绍一下汽车检具保养的基本步骤与方法: 1.保证汽车检具本身环境因素的干燥:存放温度保证在零下10摄氏度到60摄氏度之间;湿度一定要在60%以下;微粒不能超过2%。 2.汽车检具基本维护:保
光具座,支架,配件
光具座,支架,配件 OPM-SMAOPM-SMA是一个用于固定74系列准直透镜和SMA905接头光纤的装置。OPM-SMA包括了外径为1.5英寸的盘面,3/8-24螺纹可以用于透镜和SMA 905接头光纤的适配器。包含的一种特制适配器,可以固定SMA 905接头的光纤,使其跟OPM-SMA的
具支试管的外形
具支试管是一种实验室玻璃器皿,是在普通的试管的基础上安一个支管,一个密封的具支试管相当于一个有单孔塞的普通试管。 实验室常用气体通过多个具支试管与液体同时反应,可以清楚地看到液体与气体发生的化学变化,从而判定气体的化学性质。
具支试管的作用
具支试管 具支试管 1.一个密封的具支试管相当于一个有单孔塞的试管。 2.洗气。 3.组装简易的启普发生器。 使用注意事项 (1)装溶液时不超过试管容量的1/2,加热时不超过试管容量的1/3。 (2)用滴管往试管内滴加液体时应悬空滴加,不得伸入试管口。 (3)取块状固体要用镊子夹
为什么每个人的血液颜色不同,有的深而有的浅
血液对于人体而言就像黄金一样,虽然它只占你身体重量的很小一部分,但却发挥着物质传递和保持身体正常运转的重要作用。而你在医院里抽血的时候,可能会发现两次抽血的血液颜色会有所不同,它们有时候颜色偏深红,但有时候颜色偏浅红。这是为什么呢?下面就让我来为大家讲一下其中的缘由。一、身体不同部位的血液颜色有很大
RNAi:制备siRNAs的方法
越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA,这个过程就是RNA干扰途径(RNA interference p
Cell头条:内源RNAi信号
来自加拿大麦吉尔大学的Mathieu Flamand 和Thomas F. Duchaine在7月20日《细胞》(Cell)杂志上发表了一篇题为“SnapShot: Endogenous RNAi Pathways”的文章。文章以概略图加上主题内容简介并推荐了10篇文献,简明扼要地概述了
-默沙东退出RNAi研究领域
尽管最近罗氏公司、赛诺菲两个制药巨头宣布重返RNAi疗法研究领域,默沙东公司却做出相反的决定,宣布撤出这一研究领域。公司最近宣布将相关的 Sirna公司以1亿7千5百万美元的价格出售给Alnylam公司。这也是默沙东公司宣布进行研发部门重组后的又一个大动作。 公司于2006年以
RNAi技术的应用特点
由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。
RNAi实验原理与方法
RNAi实验原理与方法近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(
RNAi有哪些高效性
RNAi的高效性:dsRNA在Dicer作用下形成siRNA,siRNA解链与RISC形成复合物,这些RISC可专一性地与靶向的mRNA特异性结合。siRNA也有可能不与RISC结合,而是通过解链直接靶向结合mRNA。根据RISC结合位点或单链siRNA结合位点在RdRP作用下可形成新的dsRNA,
RNAi表达载体构建(二)
(2)、序列同源性分析: 将潜在的序列和相应的基因组数据库(人,或者小鼠,大鼠等等)进行比较,排除那些和其他编码序列/EST同源的序列.例如使用BLAST( www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)选出合适的目标序列进行合成.并非所有符合条件的siRNA都一样有效,其原因还不清楚
RNAi的机理与应用
RNAi 技术的机理与应用 关于 RNAi 技术 RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。 RNAi 受到追捧的
RNAi片段siRNA设计原则
RNAi target selection rules:Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG).S
RNAi表达载体构建(一)
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分
RNAi的生物特性介绍
1、RNAi抑制转座子活性两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关 ① 发现蠕虫mut-7 基因参与RNAi 并且与转座子的转座抑制有关; ② 在果蝇中,参与RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。 2、R
RNAi引起的基因敲除
RNAi引起的基因敲除:由于少量的双链RNA就能阻断基因的表达,并且这种效应可以传递到子代细胞中,所以RNAi的反应过程也可以用于基因敲除。
RNAi实验原理与方法
实验概要进行RNAi实验实验原理通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs
RNAi的发现和起源
首次发现dsRNA能够导致基因沉默的线索来源于线虫Caenorhabditis elegans的研究。>1995年,康乃尔大学的Su Guo博士和>Kemphues在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断
RNAi及基因沉默原理
RNA 干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA (double-strandedRNA,dsRNA) 引发的转录后基因静默机制。其原理是:RNaseIII 核酶家族的Dicer,与双链RNA 结合,将其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干扰RNA (small
RNAi:制备siRNAs的方法
越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA,这个过程就是RNA干扰途径(RNA interference pat
为什么有的电容充电快,而有的电容充电相对慢一点
电容充电快慢与电路的时间常数有关。时间常数一般用希腊字母“τ”来表示,τ=RC, R是充电电阻,C是充电电容,R和C越大,充电越慢,R和C越小,充电越快。τ在电路中反映电路中响应变化的快慢,时间常数越小,则电路响应变化越快,反之则越慢。 时间常数表示过渡反应的时间过程的常数。指该物理量从最大值衰减
韩国召回镍超标锅具
6月26日,韩国食品药品安全处(MFDS)发表消息称:株式会社EUGENETOSCO(位于仁川市南洞区)生产销售的食品用器具类“火锅(小号)”产品中检出镍超标,命令其停止销售并召回该产品。 该产品中检出镍1.4mg/L,在韩国,该类产品中的标准为0.1mg/L以下。 召回对象:2016年6月
所有的菌都能保存吗
菌种保存的原理是预防或减缓DNA 复制时自发突变导致菌种退化,因此要创造代谢不活泼的状态,而菌种保存时使菌种进入休眠态(孢子、芽孢),并创造干燥、低温、缺氧、缺营养的环境,创造的环境越接近此状态,所保存的菌种的时间就越长,所以从原理上讲,所有菌种都可用这种方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感
电动法兰闸阀具有的优点
电动法兰闸阀动作力距大,电动阀门开关动作速度可以调整,结构简单,易维护,动作过程中因气体本身的缓冲特性,不易因卡住而损坏,电动法兰闸阀响应灵敏,安全可靠,很多对控制要求高的厂专为气动仪表控制元件设置压缩空气站。电动的就是要电,并能控制其流量的装置。 电动法兰闸阀具有以下优点: 一、阀