免疫金染色方法的特点及应用
中文名称免疫金染色英文名称immuno-gold staining定 义将用胶体金(直径大于20 nm)标记的间接抗体或A蛋白再与特异性抗体结合,在光镜下就可见红色的反应物出现,不需进行呈色反应的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)......阅读全文
染色质免疫沉淀技术的应用
随着人类基因组测序工作的基本完成,功能基因组学逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领域,要想提供蛋白因子直接调控的证据,需要直接检测蛋白质-DNA的相互作用,而染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)就是一种研
免疫组化方法免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶
免疫组化染色有哪些应用?
病理学诊断:免疫组化染色可以用于检测组织中的特定蛋白质,帮助医生确定病变的性质和类型。例如,在癌症诊断中,可以通过检测肿瘤细胞中的某些蛋白质来确定肿瘤的类型和分级。 神经科学研究:免疫组化染色可以用于研究神经系统中的蛋白质表达情况。例如,在研究阿尔茨海默病时,可以通过检测大脑组织中β-淀粉样蛋
染色体分选的方法特点
染色体分选(chromosome sorting),用流式细胞计分选特定的染色体,基本过程与细胞分选相似。不同的是,要用带有荧光标记的DNA探针同特异染色体结合,使待分选的染色体带上标记。
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中取
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2.
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2.
金标免疫斑点法检测肺炎支原体感染及应用
张化涛 (胜利石油管理局临盘医院 山东 临邑 251507) 肺炎支原体(Mp)是引起呼吸道感染的致病微生物,它除了引起非典型肺炎外,还可以引起上呼吸道感染。由于MP对一般治疗肺炎、上呼吸道感染的药物有耐药性,因此及时进行支原体抗体检测有助于明确诊断和治疗。我们采用金标免疫斑点法检测患
免疫荧光染色原理及步骤
免疫荧光又称免疫荧光抗体。免疫荧光实验原理是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少,相对使用标记抗体用量偏大。利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。下面详细介绍免疫荧光染色步骤:1. 滴加 0.01mol/L,pH7.4 的PBS于待
常用免疫组化染色方法
常用免疫组化染色方法,真空负压免疫荧光染色法染细胞培养片。1. 将细胞爬于载玻片或盖玻片的片子用生理盐水浸洗数次,彻底洗去蛋白液。2.纯丙酮固定5-10分钟。3.PBS浸洗3次,每次1分钟。4.加入选用的第一抗体孵育真空负压处理15分钟。5.PBS洗3次,每次2分钟。6.加入荧光抗体孵育真空负压处理
免疫荧光细胞化学染色方法
一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30
免疫荧光细胞化学染色方法
免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体
常见的几种细菌染色方法及细菌染色方法的改良
细菌是一类原核细胞型微生物。因菌体小半透明,要想更清楚地观察其大小和形态,需经染色和显微镜放大后才能看到。常用的细菌染色法有单染法和复染法。复染法是用两种以上的染料染色,可将细菌染成不同颜色,除可观察细菌的形态外还能鉴别细菌。主要有革兰染色法、抗酸染色法、特殊染色法[1] 。笔者为了克服传统染色
免疫胶体金原理及结果说明
原理:抗体包被:单克隆抗体包被在检测线处,抗金标抗体包被在对照线处,金标抗体吸附在固相载体无纺纱上。利用抗原抗体特异性结合的免疫反应原理,在检测线处形成抗体-待测抗原-金标抗体复合物,在对照线处形成抗金标抗体-金标抗体复合物。结果说明阳性:测试条上下两端先后出现红色反应线。在吸水材料的牵引下,待测抗
胶体金的稳定性因素及免疫胶体金贮存
胶体金有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性
四唑氮法方法的特点及应用
中文名称四唑氮法英文名称tetrazolium method定 义以四唑盐作为氧化酶活性的定性标志,在组织切片中显示酶活性定位的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
细菌鞭毛染色方法及其应用
细菌鞭毛纤细,直径只有10~30nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态。由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述。一、细菌鞭毛染色方法 目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂的不同,可分为碱性复红法、副品红法、结
细菌鞭毛染色方法及其应用
细菌鞭毛纤细,直径只有10~30nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态。由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述。一、细菌鞭毛染色方法 目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂的不同,可分为碱性复红法、副品红法、
细菌鞭毛染色方法及其应用
细菌鞭毛纤细,直径只有10~30nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态。由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述。 一、细菌鞭毛染色方法 目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂
免疫亲和层析的应用特点
免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。
免疫荧光技术的应用特点
该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广。国外生产的TDM用试剂盒,有相当一部分
免疫毒素的主要应用特点
免疫毒素因其具有杀伤肿瘤细胞的独特作用,已成为肿瘤免疫治疗研究领域的热点之一。它具有高效、低毒、高特异性等特点,是抗肿瘤研究领域的一个独特分支。主要应用于抗肿瘤、抗移植排斥反应和治疗自身免疫性疾病等领域。肿瘤导向治疗迄今为止,还没有发现一种肿瘤细胞表面能表达与正常细胞有真正差异的肿瘤特异性细胞表面标
彩色免疫金银染色的原理及操作步骤
实验概要本文介绍了彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步骤。实验原理彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基础上,根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的,即IGSS后,在抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的
彩色免疫金银染色的原理及操作步骤
实验概要本文介绍了彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步骤。实验原理彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基础上,根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的,即IGSS后,在抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的
免疫组化非特异性染色及控制方法
一、非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合多见于冰冻切片(特别是淋巴造血组织,淋巴细胞,单核细胞,组织细胞表面多),主要是和二
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐
免疫组织化学染色方法
实验概要免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐