佐剂与抗原乳化介绍

(1)研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。(2)注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作,抗原损失少,适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全,个别抗原,用塑料注射器根本推不动,而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化完全,为合格的油包水剂。(3)超声:实验室条件好点的,比如说有超声破碎仪的,一定要控制超声频率和时间,超声容易激发一些自由基,对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定......阅读全文

佐剂与抗原乳化介绍

(1)研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。(2)注射器混合法:将等量的

佐剂与抗原乳化

(1)研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。(2)注射器混合法:将等量的

多抗制备动物免疫

制备好抗原后,就要进行动物免疫了,免疫这一步除了动物自身的因素外,实验者也要有良好的计划才能得到更好的免疫效果。这里就几个常见的问题作一下简单的讨论。 动物的选择。常见的可以用来制备抗体的动物有:小鼠(Mouse)、大鼠(Rat)、豚鼠(Guinea pig)、仓鼠(Hamster)、兔(Rab

多克隆抗体的乳化作用介绍

  将抗原与佐剂混合的过程称为乳化。乳化的方法很多,可采用研钵乳化;可直接在旋涡振荡器上乳化;可用组织捣碎器乳化。少量时,特别是弗氏佐剂与抗原乳化时,常采用注射器乳化,用两个注射器,一个吸入抗原液,一个吸入佐剂,两注射器头以胶管连接,注意一定扎紧,然后来回抽吸。当大量乳化时,可采用胶体磨进行。  乳

什么是乳化作用?

将抗原与佐剂混合的过程称为乳化。乳化的方法很多,可采用研钵乳化;可直接在旋涡振荡器上乳化;可用组织捣碎器乳化。少量时,特别是弗氏佐剂与抗原乳化时,常采用注射器乳化,用两个注射器,一个吸入抗原液,一个吸入佐剂,两注射器头以胶管连接,注意一定扎紧,然后来回抽吸。当大量乳化时,可采用胶体磨进行。乳化好的标

佐剂(adjuvant)的制备和作用

一、概念  佐剂(adjuvant)是指能够增强免疫应答或改变免疫应答类型的物质,应用时可与抗原同时或预先注射于机体。佐剂本身可以有免疫原性,也可以没有免疫原性。 应用佐剂的目的是为了提高抗原对机体的免疫原性,从而提高抗体的效价。颗粒性抗原(如细菌、细胞)因具有较强的免疫原性,一般情况下不使用佐剂即

免疫佐剂的种类都有哪些?

  1. 化合物:包括氢氧化铝、矿物油、吐温-80、弗氏不完全佐剂(羊毛脂与液状石蜡的混合物)以及人工合成的多聚肌苷酸:胞苷酸、脂质体等。  2. 生物制剂:①经处理改造的细菌及其代谢产物,如卡介苗、脂多糖(LPS)和类脂A、源于分枝杆菌的胞壁酰二肽等;②细胞因子及热休克蛋白等。  最常用于免疫动物

抗体抗原稳定性有什么稳定剂比较好选择的

(1)抗原:免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异,—次注射小鼠可以少至几个微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加,从几百μg/次至几mg/次。〔2)佐剂及乳化:佐剂可

多克隆抗体技术概述2

(3)脂质体:是人工制备的类脂质的小球体,由一个或多个酷似细胞膜的类脂双分子层组成,这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两性物质,他们被包裹在脂质体内部的水相中,或插入类脂双分子层或吸附、联接在脂质体的表面,起到明显的免疫增强作用。 (4)油佐剂:采用植物油和矿物油均可,包括豆油、花生油、油菜油

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针

免疫球蛋白IgG的提取1

一、目的及要求了解和掌握免疫球蛋白的提取方法。 二、概 念 抗体是在抗原物质刺激下,人或脊椎动物免疫系统的浆细胞产生的,能与抗原发生特异性反应的免疫球蛋白,主要存在于人和动物的血清及其体液中。 三、免疫血清的制备 (一)动物的选择 实验室常用的动物是家兔和羊,有时也用豚鼠或鸡,大

​抗体佐剂的类型介绍

佐剂的类型 实践中常应用的佐剂有氢氧化铝胶、明矾、弗氏佐剂、脂质体和石蜡油等。也有采用结合杆菌等分枝杆菌、白喉杆菌以及细小棒状杆菌等。

弗氏佐剂的配制方法

按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成"油包水"乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性

弗氏佐剂的配制方法

按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成"油包水"乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性

弗氏佐剂的配制方法

按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成"油包水"乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性

弗氏佐剂的使用方法

(1)研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。(2)注射器混合法:将等量的

免疫血清制备方法

免疫血清的制备可用于:(1)制备免疫标记抗体等;(2)供特异性免疫治疗用等。实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗

QuickAntibody免疫佐剂使用中已经遇到的问题以及答复

使用中已经出现的问题:1、有客户没有仔细阅读说明书,使用QuickAntibody佐剂时按照弗式佐剂方法与抗原进行乳化等操作,并在4度冰箱放置过夜,第二日取出直接免疫,结果造成效价不理想。答复:QuickAntibody佐剂无需乳化,而且无论是佐剂本身还是与抗原混合后,长时间静置均易产生沉淀,因此均

概述抗原抗体反应的应用

  (1)抗原:免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异,—次注射小鼠可以少至几个微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加,从几百μg/次至几mg/次。  〔2)佐剂及乳化

关于抗原抗体反应的应用介绍

  (1)抗原:免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异,—次注射小鼠可以少至几个微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加,从几百μg/次至几mg/次。  (2)佐剂及乳化

抗原抗体反应的免疫动物的相关介绍

  (1)抗原:免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异,—次注射小鼠可以少至几个微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加,从几百μg/次至几mg/次。  〔2)佐剂及乳化

免疫血清制备方法(二)

五、结果鉴定 以双相琼脂扩散试验测定所获免疫血清的抗体效价,并用琼指免疫电泳鉴定免疫血清中抗体的质量,应产生单一的沉淀弧线。鉴定方法的具体步骤参见有关部分。 六、材料 (一) 动物:健康成年家兔,雄性,体重2~3公斤。 (二) 器材:剪刀、镊子、注射器(2ml、50ml)附针头(9号、6号)、称量瓶

弗氏佐剂的功能特点

弗氏体即弗氏佐剂是动物实验中最常用的佐剂,分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成,组分比为1~5:1,可根据需要而定,通常为2:1。不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2~20mg/ml)或死的结核分枝杆菌,即为完全弗氏佐剂(FCA)。一般首次注射时用1/2体积FCA

弗氏佐剂的概念和作用

弗氏体即弗氏佐剂是动物实验中最常用的佐剂,分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成,组分比为1~5:1,可根据需要而定,通常为2:1。不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2~20mg/ml)或死的结核分枝杆菌,即为完全弗氏佐剂(FCA)。一般首次注射时用1/2体积FCA

多克隆抗体的免疫方法介绍

(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③

乳化泵与乳化机有什么区别?

  乳化机:乳化机类似于搅拌机,安装于罐体顶盖或吊于料液的上方乳化。乳化机的定子头有圆孔定子头、长孔定子头、组合定子头等形式,不同的定子型会有不同的乳化效果,乳化机的时间长乳化效果好。乳化泵:乳化泵(乳化机)是一种泵体,安装于管道上对管道的料乳化,连续的生产。乳化泵可装于生产管路上连续乳化或连接与罐

关于多克隆抗体的免疫方法介绍

  可以采用以下各种方法之一进行免疫。  (1)淋巴结注射法:  ①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;  ②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1

关于疫苗佐剂的概念介绍

  佐剂(Adjuvant)又称免疫调节剂或免疫增强剂(Immunepotentiator),起源于拉丁文“Adjuvare”,是辅助或者增强的意思。佐剂是疫苗的一种添加剂,当它先于抗原或与抗原混合注入机体后,能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型,属于非特异性的免疫增强剂,而其本身无抗

上海巴斯德所等开发新型抗原/佐剂共递送纳米技术

  6月28日,国际学术期刊Nano Letters 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所钱志康课题组的最新研究论文“Versatile Functionalization of Ferritin Nanoparticles by Intein-Mediated Trans-Splicing for

单克隆抗体的制备(二)

3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的,很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原,都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中,产生的抗体量会增加,总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主,特异性抗体