蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞，上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆，上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮，将乳糜粒吸出,留其余液体备用。3. 血清蛋白分离：除去球蛋白，白蛋白及其它蛋白质。5000rpm 10°C离心1h,密度梯度离心梯度.液配置：管容量1/3为血清，2/3为1。31g/ml,NaCl+NaBr,搅拌后终密度为1。21g/ml .管上部1/6容积为血清脂蛋白，下部5/6为其它蛋白。4.取2ml下部5/6血清于小试管中,加0.9％氯化钠溶液2.0ml，边搅拌混匀边缓慢滴加饱和硫酸铵溶液乙4.0ml，加入PBS洗脱液2ml,混匀后于室温中放置10min，此步骤可重复......阅读全文
蛋白质的基本结构
蛋白质是以氨基酸为基本单位构成的生物高分子。蛋白质分子上氨基酸的序列和由此形成的立体结构构成了蛋白质结构的多样性。蛋白质具有一级、二级、三级、四级结构，蛋白质分子的结构决定了它的功能。一级结构（primary structure）：氨基酸残基在蛋白质肽链中的排列顺序称为蛋白质的一级结构，每种蛋白质都
蛋白质纯度测定实验
实验步骤在评价样品纯度之前，首先需要鉴定待测杂质的类型，如核酸、碳水化合物、脂质、无关蛋白质、同工酶类、失活蛋白质，进而确定在特定溶液条件中, 能够区分假定杂质和目标蛋白质的理化特性 (化学分析或物理特征）。而纯度则是指待测杂质含量低于某个特定水平。需要注意的是，上述说明中并没有要求描述杂质的性质。
蛋白质密度是多少
和水差不多。1×10的三次方
蛋白质沉淀浓缩方法
在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂： 1．盐析法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2．有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。 3．等电点沉淀法 用于氨基酸、
蛋白质水解的介绍
蛋白质水解是指蛋白质在水解酶（protease,proteinase）的催化作用下水解过程的统称。这一过程所形成的水解产物在人体内要比自由氨基酸和没有水解的蛋白质更易于吸收。
蛋白质定量分析
实验概要Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG) 可与蛋白质结合而变色的特性来定量；若试样中的蛋白质量较多，则结合到蛋白质而变色的CBG 也多，因而呈色较深。本实验是以一组标准蛋白质为对象，制作一条
蛋白质(二）相关计算
相关计算原子数由m个氨基酸，n条肽链组成的蛋白质分子，至少含有n个—COOH，至少含有n个—NH2，肽键m-n个，O原子m+n个。分子质量设氨基酸的平均相对分子质量为a，蛋白质的相对分子质量=ma-18（m-n）基因控制基因中的核苷酸6信使RNA中的核苷酸 3蛋白质中氨基酸 1
蛋白质电泳技术
Serum Protein Electrophoresis Tricine/Polyacrylamide Gel ElectrophoresisUsed for pilin processing analysis but generally useful for resolution of smal
如何理解蛋白质电泳？
定义电泳是分离某些大分子的过程,因此可以更轻松地对其进行检查。该词本身源自希腊语,“电”是指将能量添加到分子原子电子中的电流,“电导”是指粒子的运动。电泳仪通常用于胶体或大分子颗粒(由多个简单分子结构制成的大颗粒),例如蛋白质或复杂的核酸。处理这些分子通过通常通过凝胶传递的电流分离。这种凝胶通常是二
蛋白质检测概述
蛋白提取蛋白样品提取是蛋白定量和分析的基础。天然蛋白质分子结构、化学性能各异，选择适当的细胞裂解液制备蛋白样品至关重要。选择细胞裂解液时，除了要考虑蛋白产量，还要考虑所选择的一抗的是否能识别线性的抗原表位。一些含有十二烷基硫酸钠（SDS）和强离子去污剂（如脱氧胆酸钠等）的蛋白质裂解液能够从组织或细胞
球状蛋白质的特点
（1）球状蛋白质分子含多种二级结构元件；(2)球状蛋白质三维结构具有明显的折叠层次，多肽链主链在熵驱动下折叠成借氢键维系的α-螺旋、β-折叠等二级结构，在一级序列上相邻的二级结构往往在三维折叠中彼此靠近并相互作用形成超二级结构；(3)球状蛋白质分子是紧密的球状或椭球状实体；(4)球状蛋白质分子疏水侧
蛋白质沉淀技术（二）
(4) 小心倒出上清液，并测量其体积。依据表 20.1 所示的以百分饱和度从低到高的顺序加入 AS 以确定所需 AS 的质量。继续伴以快速的搅拌并缓慢加入 AS，以避免局部形成较高盐浓度，之后静置 30 min, 使其形成沉淀。(5) 如步骤 (3) 中所示进行离心。尽量去除上清液, 若之前已经仔细
结合DNA的蛋白质
结构蛋白可与DNA结合，是非专一性DNA-蛋白质交互作用的常见例子。染色体中的结构蛋白与DNA组合成复合物，使DNA组织成紧密结实的染色质构造。对真核生物来说，染色质是由脱DNA与一种称为组织蛋白的小型碱性蛋白质所组合而成；而原核生物体内的此种结构，则掺杂了多种类型的蛋白质。DNA可在组织蛋白的表面
蛋白质的检测方法
分别向甲、乙两支试管加入3毫升蛋清稀释液和清水，再依次向两支试管中加入双缩脲试剂A液和B液。观察甲、乙两试管中溶液发生的颜色变化。上述的演示实验结果表明，双缩脲试剂与蛋白质呈现紫色反应。
蛋白质组研究系统
4700 TOF/TOF蛋白质组分析系统4700TOF/TOF蛋白质组分析系统是全球第一台TOF/TOF 串联飞行质谱仪，它作为目前的最新质谱技术，它一问世即被世界各大蛋白组研究中心和著名蛋白质实验室所争相采用。它由两级TOF和高能碰撞池组成，其工作原理是离子在MALDI源中产生并被加速和聚焦；对于
怎样储存纯化蛋白质
一般来说蛋白都放在-20℃冰箱里，有必要的话甚至要放到-80摄氏度，因为你在提纯的过程中没法做到无菌，因此提纯的蛋白液里肯定共有细菌的存在。而细菌在4°C中仍然是会活动的，这样它就会去水解蛋白质，辛辛苦苦提的蛋白也就质量下降。不信你可以把蛋白放在4度里过一个星期，拿出来绝对臭了，臭了就说明降解了。蛋
蛋白质合成的概念
蛋白质合成是指生物按照从脱氧核糖核酸 （DNA）转录得到的信使核糖核酸（mRNA）上的遗传信息合成蛋白质的过程。蛋白质生物合成亦称为翻译（Translation），即把mRNA分子中碱基排列顺序转变为蛋白质或多肽链中的氨基酸排列顺序过程。
蛋白质提取与制备
1蛋白质提取与制备蛋白质提取与制备蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的，大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合
蛋白质沉淀技术（三）
3.策略 C 的基本操作程序(1) 配制 10%(V/V)[5%(m/V)] 的 PEI 储存液。PEI(WV) 常以 50%(m/V) 的黏稠液体状态存在（来自于 MPBiochemicals 的 PEI, 其相对分子质量 Mw=50000?100000, 也可采用其他来源，如 Sigma 和
临床常见的蛋白质
纤维蛋白（fibrous protein）：一类主要的不溶于水的蛋白质，通常都含有呈现相同二级结构的多肽链许多纤维蛋白结合紧密，并为单个细胞或整个生物体提供机械强度，起着保护或结构上的作用医学`教育网搜集整理。 球蛋白（globular protein）：紧凑的，近似球形的，含有折叠紧密的多肽链的
蛋白质的时空特性
可通过抑制蛋白了解新发现蛋白的功能，在空间和时间上更为完整地描绘了蛋白质组学在个体细胞中的变化，为测量和解释单个细胞和亚细胞水平之间的蛋白质组变异提供了基础
蛋白质芯片的原理
蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质，其原理是对固相载体进行特殊的化学处理，再将已知的蛋白分子产物固定其上（如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等），根据这些生物分子的特性，捕获能与之特异性结合的待测蛋白（存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等），经洗涤、纯化，再进行确认和生
蛋白质的研究方法
蛋白质是被研究得最多的一类生物分子，对它们的研究包括“体内”(in vivo)、“体外”(in vitro)、和“在计算机中”(in silico)。体外研究多应用于纯化后的蛋白质，将它们置于可控制的环境中，以期获得它们的功能信息；例如，酶动力学相关的研究可以揭示酶催化反应的化学机制和与不同底
怎么使蛋白质析出
加盐 注意不要是重金属盐 K Na之类为好利用蛋白质溶解度的方法 叫盐析法
蛋白质抽取(protein－extraction)
蛋白质在细菌中表现后，以反复的冷冻-解冻方法打破细胞，再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来，此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。仪器用具：恒温震荡培养箱37℃；高速冷冻离心机及离心管 （使用20,000 rpm离心陀）使用高速离心机要注意： 离心机及离心陀的温度要预冷完全，相对位置的两只离心管要平衡好
蛋白质如何提纯呢
1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内，达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。 用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时，除个别成分外，极难将某一抗原成分分离出来，故只用于少数大
IEF分离蛋白质方法
实验试剂样品提取液（8M尿素、2％非离子型去污剂NP－40、2％Ampholin，pH3.5-10、2％DTT）胶母液 （30％的29/1的Acr/Bis），两性电解质阳极缓冲液 1M磷酸阴极缓冲液 1M氢氧化钠固定液（10％的三氯乙酸、1％的磺基水杨酸）染色液（35％乙醇、10％冰醋酸、0.15%
蛋白质的分离纯化
蛋白质的分离纯化方法如下：一、根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析法：中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析。2、等电点沉淀法：蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电
蛋白质测序的概念
当前，所谓蛋白质测序，主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure) 包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。 蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.Sang
蛋白质分离提纯方法
1、盐析法：盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法：有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二：其一、与盐溶液一样具有脱