蛋白质定量分析

实验概要Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG) 可与蛋白质结合而变色的特性来定量;若试样中的蛋白质量较多,则结合到蛋白质而变色的CBG 也多,因而呈色较深。本实验是以一组标准蛋白质为对象,制作一条蛋白质量与吸光度的标准校正线。主要试剂Buffer A-0BSA标准品 (Bio-Rad, bovine serum albumin, 100 μg/mL)未知浓度样本 (unknown BSA, 0.8 mL)Dye Reagent (Bio-Rad 500-0006) 先以水稀释四倍备用。以染料Coomassie brilliant blue G-250 配制的溶液,勿与胶体电泳染色用的CBR-250 混淆,各有其使用上的特色,不要互用。标准品及样本:标准品系列:使用小试管准备一组BSA (b) 标准......阅读全文

蛋白质定量分析

实验概要Bradford  的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG)  可与蛋白质结合而变色的特性来定量;若试样中的蛋白质量较多,则结合到蛋白质而变色的CBG  也多,因而呈色较深。本实验是以一组标准蛋白质为对象,制作一条

蛋白质纯化胶体过滤法

实验概要本实验介绍了蛋白质纯化胶体过滤法,不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离。主要试剂1. 胶体Sephacryl S-300 (Pharmacia):a. 预先以缓冲液buffer A-150 平衡好,并且使完全沉降后的胶体体积,占全部体积的七至八成;要先预估好胶体

蛋白质纯化胶体过滤法

蛋白质纯化胶体过滤法仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;分划收集器 (fraction collector, 需准备干净试管约100 支);浓缩用离心机 (低速5,000 rpm);浓缩用离心管Centriprep-30 (Ami

蛋白质纯化胶体过滤法

仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;分划收集器 (fraction collector, 需准备干净试管约100 支);浓缩用离心机 (低速5,000 rpm);浓缩用离心管Centriprep-30 (Amicon 4322)

定氮仪检测稻米蛋白质含量

  生命起源就是单细胞生物的出现,单细胞是蛋白质的组成,所以,蛋白质对生命的起源与进化是密切相关的,蛋白质是细胞做功的工具。食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份主要标志。食品中蛋白质的多少已经不是单单表示食品品质了,更是关系着人体的健康。    稻米是人类的常见主食之一,稻米蛋白质因其较为合理的蛋

凯氏常量定氮法测定蛋白质

  一 凯氏定氮法  这种方法是1883年Kjeldahl发明,当时凯氏只使用H2SO4来分解试样,来定量谷物中的pro,他只知用H2SO4分解试样,而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程,所以只使用H2SO4分解试样,需要较长时间,后来由Gunning加入改进,他改进的办法是在消化时

定氮仪测定稻米中蛋白质含量

  蛋白质是食品中最重要的一种元素,对生命活动有非常重要的作用。所以所以食品中蛋白质的多少,不仅关系到食品的质量,也关系着人体健康。食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份的主要指标之一。稻米是人类重要的粮食作物,稻米蛋白质因其较为合理的蛋白及氨基酸组成而表现出优良的营养品质,蛋白质含量不仅影响其营养

用凯氏定氮法测定蛋白质

条件缺吧,HCl体积多少?0.1 * 0.05- 0.1150*0.02675= 0.001924 (吸收NH3的HCl)0.001924 *14/ 16% =0.16816.8%?不过有点疑惑,NaOH反滴定的时候要不要考虑NH4+的弱碱性,

自动定氮仪测定稻米中蛋白质

蛋白质是生物体中含量最高,功能最重要的生物大分子,细胞和生物体在完成由基因编码的生命活动过程中需要许多不同的蛋白质协同作用,蛋白质是细胞做功的工具,与生命的起源和进化都密切相关。所以食品中蛋白质的多少,不仅表示食品的质量,也关系着人体健康。食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份的主要指标之一。稻米是

自动定氮仪测定稻米中蛋白质

  蛋白质是生物体中含量最高,功能最重要的生物大分子,细胞和生物体在完成由基因编码的生命活动过程中需要许多不同的蛋白质协同作用,蛋白质是细胞做功的工具,与生命的起源和进化都密切相关。所以食品中蛋白质的多少,不仅表示食品的质量,也关系着人体健康。食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份的主要指标之一。稻

蛋白质的测定凯氏定氮法

1)原理样品与硫酸和催化剂一同加热后消化,使蛋白质分解,其中的碳和氢分别被氧化成二氧化碳和水蒸气逸出,而有机氮转化成氨后与硫酸结合生成硫酸铵,然后在碱性条件下蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再用硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即得蛋白质含量。以甘氨酸为例,该过程的反应方程式如下:消化 

自动定氮仪测定稻米中蛋白质

蛋白质是生物体中含量高,功能重要的生物大分子,细胞和生物体在完成由基因编码的生命活动过程中需要许多不同的蛋白质协同作用,蛋白质是细胞做功的工具,与生命的起源和进化都密切相关。所以食品中蛋白质的多少,不仅表示食品的质量,也关系着人体健康。食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份的主要指标之一。稻米是人类

K氏微量定氮仪法测定蛋白质

  2 K氏微量定氮仪法  3 K氏半微量定氮仪法 (2 、 3原理一样)  操作方法大同小异,半微量法消化后,定容100ml,然后吸25ml蒸馏吸收液吸收。  N(V2-V1)0.014  W*10/100  计算总氮%=(N(V2-V1)×0.014)/(W×10/100)×100  对于微量定

定氮仪对稻米蛋白质含量的检验

稻米是人类重要的粮食作物,稻米蛋白质因其较为合理的蛋白及氨基酸组成而表现出优良的营养品质,蛋白质含量不仅影响其营养品质,而且也对蒸煮品质有重要影响。在评价稻米品质的相关标准中蛋白质及其含量被认为是评价品质并为深加工行业生产提供工艺参数的重要指标之一。 凯氏定氮法适用样品范围广泛、测试结果准确、重现性

定氮仪对乳粉蛋白质的测定分析

  乳粉在现代生活中是常见的,其蛋白质含量十分丰富。蛋白质是含氮的有机物,乳粉与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与过量硫酸反应转变为硫酸铵,硫酸铵在碱性溶液中进行蒸馏。将蒸馏出来的氨用硼酸吸收,再用硫酸标准溶液滴定,根据硫酸的消耗量乘以换算系数,即可求出蛋白质的含量。利用定氮仪可以很

凯氏定氮仪可以测蛋白质含量

可以。凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量

自动定氮仪如何检测小麦蛋白质含量

      小麦中蛋白质的含量高低通常可以用来判定小麦的品质的好坏,所以在现在人们都比较注意品质的年代,通过测定小麦中蛋白质的含量来分析小麦品质高低也是很有必要的,而蛋白质的含量也是进行小麦加工的一个重要指标,通常小麦中蛋白质的含量低通过定氮仪来进行检测的。      蛋白质是比较复杂的含氮有机

如何用凯氏定氮法测定蛋白质

  一、原理  凯氏法测定试样含氮量,即在催化剂存在下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵,加入强碱(NAOH)并蒸馏使氨溢出,用硼酸吸收后,用标准盐酸溶液滴定测出含氮量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。  二、试剂  (1)、硫酸铜  (2)、硫酸钾  (3)、硫酸(密度为1.8

蛋白质定量检测方法——凯氏定氮法

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定

酶活性分析法检定蛋白质的方法步骤

表现出來的酶GUS可以水解其基质衍生物pNPG,所产生的黄色生成物p-nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986);仪器用具:ELISA光度计 (Dynatech);微量滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 4424

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适

半自动定氮仪检测明太鱼鱼骨蛋白质含量

  明太鱼与其他鱼类相比较,具有高蛋白、低脂肪及味道清爽等特点.本研究应用半自动定氮仪凯氏定氮法对明太鱼骨粉中蛋白质含量进行测定,旨在建立明太鱼骨粉的蛋白质含量监测方法。    分别取一定量的明太鱼骨及肉在105e条件下恒温干燥4h,置于室温冷却,粉碎,用3号筛过筛,备用.分别精密称取肉粉和骨粉样品

定氮仪测定样品中蛋白质的过程详解

定氮仪是测定样品中蛋白质含量的重要仪器,其测定过程主要包括样品消化、定氮仪的准备、样品测定、仪器的清洗和结果计算这几部,为了详细了解定氮仪测定样品中蛋白质的过程,下面我们就来一一进行说明:1、样品消化:100ml消化瓶中+样品(固体0.2~2.0g,液体10~20ml)+催化剂(硫酸钾6g、硫酸铜

定氮仪测定蛋白质含量时注意事项

    衡量食品的营养成分,一般是通过测定食品中蛋白质、维生素、微量元素等的含量,而又以蛋白质为重。蛋白质是人体细胞的必要组成部分,是人体每天必需摄入的营养物质,因此测定食品中蛋白质的含量,是非常有必要的。一般的,我们在测定蛋白质含量时,都采用凯氏定氮法,此法已成为蛋白质测定的标准方法。而根据凯氏定

测定蛋白质含量只有凯氏定氮法吗

当然不是一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so

蛋白质含量测定法凯氏定氮法

  本法系依据蛋白质为含氮的有机化合物,当与硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化时使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定,根据酸的消耗量算出含氮量,再将含氮量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。  本法灵敏度较低,适用于0.2~2.0mg氮的测定。氮

凯氏定氮仪分析稻米蛋白质的应用

  蛋白质是细胞做功的工具,与生命的起源和进化都密切相关。所以食品中蛋白质的多少,不仅表示食品的质量,也关系着人体健康。稻米是人类重要的粮食作物,稻米蛋白质因其较为合理的蛋白及氨基酸组成而表现出优良的营养品质,蛋白质含量不仅影响其营养品质,而且也对蒸煮品质有重要影响。    目前测定蛋白质含量的方法

全自动凯氏定氮仪测定种子蛋白质

  种子中的蛋白质含量的测定有一定的必要性,种子在发芽以及生产的过程,养分大部分来源是通过种子中吸收而来的,对于某些种子中的蛋白质含量在国家标准中均是由进行相关的要求的,最为明显的是豆类得蛋白质含量的监测,在相关的标准中也对其进行了要求,比如《GB 2905一82 谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定

蛋白质的测定方法之凯氏定氮法

一  凯氏定氮法这种方法是1883年Kjeldahl发明,当时凯氏只使用H2SO4来分解试样,来定量谷物中的pro,他只知用H2SO4分解试样,而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程,所以只使用H2SO4分解试样,需要较长时间,后来由Gunning加入改进,他改进的办法是在消化时加入K