蛋白质的纯化方法有哪些?原理是什么

蛋白质分离纯化常用方法有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析:a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。b.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出。5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开。......阅读全文

蛋白质染色实验

考马斯亮蓝染色 银染法 非氨盐银染法 快速银染法             实验方法原理 1. 凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便

蛋白质纯化原则

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分

蛋白质分离纯化

蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。

蛋白质合成实验

实验步骤 材料无菌细胞培养,如 1X104~ 1X106 个细胞,24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要,因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定)非无菌SLS 或 SDS,1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH

蛋白质组成成分

单纯蛋白质的元素组成为碳50~55%、氢6%~7%、氧19%~24%、氮13%~19%,除此之外还有硫0~4%.有的蛋白质含有磷、碘。少数含铁、铜、锌、锰、钴、钼等金属元素。各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%.由于体内组织的主要含氮物是蛋白质,因此,只要测定生物样品中的氮含量,就可以按下式推算出

IEF分离蛋白质

实验概要等电点聚焦电泳(IEF)就是在电泳胶中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质在此体系中泳动时,不同的蛋白质即聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开,由于I

蛋白质类药物

  15日,亿帆医药宣布,其高度差异化长效重组人生长激素F-899在中国获批临床,有望成为一种更安全便捷有效的生长激素缺乏症(GHD)替代疗法。

蛋白质如何提取

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶.(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利

蛋白质纯化仪

蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),

蛋白质的变性

  蛋白质变性是指当天然蛋白质受到物理或化学因素的影响时,使蛋白质分子内部的二、三、四级结构发生异常变化,从而导致生物功能丧失或物理化学性质改变的现象。  常见的引起蛋白质变性的因素有:物理因素:热作用、高压、剧烈震荡、辐射等;化学因素有:酸、碱、重金属离子、高浓度盐、有机溶剂等。  变性对蛋白质功

结合蛋白质(2)

重要的结合蛋白质血红蛋白血红蛋白(hemoglobin)是主要存在于脊椎动物红细胞中的一种色蛋白,它的主要功能是在人体内运载氧气和二氧化碳。正常人体的100ml全血中,含血红蛋白质12~16g。人类血红蛋白含铁约为0.33%~0.34%,其相对分子质量约为67 000。血红蛋白由珠蛋白和辅基血红

蛋白质水解原理

蛋白质分裂是形成多肽,多肽才能说是水解!水解只发生在蛋白质的一级结构上,也就是肽链的水解!形成氨基酸!

结合蛋白质(1)

   结合蛋白质的分子中除氨基酸组分之外,还含有非氨基酸物质,后者称为辅因子,二者以共价或非共价形式结合,往往作为一个整体从生物材料中被分离出来。单纯蛋白质是指分子组成中,除氨基酸构成的多肽蛋白成分外,没有任何非蛋白成分称为单纯蛋白质。自然界中的许多蛋白质属于此类。而结合蛋白质是单纯蛋白质和其他化合

蛋白质分离实验

分离未知 pI 蛋白质 分离已知pI 的蛋白质             实验方法原理 实验材料 含10

蛋白质沉淀技术

在过去的 100 年里,虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法,但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用,尤其对于酸性蛋白质。此外,PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来,将会对这两种方法进行详细的讨论, 随后对其他几种沉淀方法做简单概述,并针对沉淀过程中沉淀的处理和纯化效率的最大化提出一般性建议。实

血浆蛋白质(二)

  一、白蛋白  人血浆白蛋白(albumin)是人血浆含量最多的蛋白质,约45g/L,占血浆总蛋白的60%。肝脏每天合成12g白蛋白,占肝脏分泌蛋白的50%。人血浆白蛋白基因位于第4号染色体上,其初级翻译产物为前白蛋白原(preproalbumin)。在分泌过程中切除信号肽,生成白蛋白原(proa

蛋白质鉴定方法

最简单的方法,也是人们最耳熟能详的方法,就是对物体进行灼烧,看是否能问到烧焦的羽毛味,如果可以问到烧焦的羽毛味,那么证明有蛋白质的存在。2中学的化学课上也教过我们不少的方法,比如说吧蛋白质和浓HNO3进行反应,如果能够变性产生黄色不溶性物质,那么该物体是蛋白质。3还有一种方法就是把含有蛋白质的屋子磨

蛋白质含量测定

应该是问蛋白质含量测定的方法吧。方法有以下几种:1、直接测定UV法。2、凯氏定氮法。3、双缩脲法。4、酚试剂法。5、紫外吸收法。6、BCA法。7、Lowry法。8、考马斯亮蓝法。9、Bradford法测定试剂盒。蛋白质含量增高,常见于多发性骨髓瘤患者,主要是异常球蛋白增加;血浆浓缩也可使蛋白质含量增

蛋白质纯化-程序

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。前处理分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染,油料种子最好先用低沸点

蛋白质的复性

  蛋白质的复性  蛋白质复性的最大问题,是在复性过程中形成中间体和多聚体,中间体阻碍作用大的使蛋白质正确折叠困难,复性就困难;阻碍小或无阻碍的容易复性。降低蛋白浓度可以减少中间体形成提高复性率。减少中间体的形成,可选用添加小分子物质,又叫分子伴侣,如精氨酸、甘油、PEG等小分子物质帮助蛋白质正确折

蛋白质试纸说明

【用 途】  适用于牛奶(不包括酸奶和奶饮料)、奶粉中蛋白质含量的快速检测。【测 量 范 围】   0%~3%(牛奶)。【检 测 步 骤】   1. 样品前处理:1)牛奶样品:无需处理,直接取少量奶样于离心管中,待检。2)奶粉样品:称取1g奶粉于离心管中,用蒸馏水溶解并定容至10mL,待检。2.检验

蛋白质的单位

蛋白质的基本单位是氨基酸蛋白质是以氨基酸为基本单位构成的生物大分子。一级结构:蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序,以及二硫键的位置。二级结构:蛋白质分子局区域内,多肽链沿一定方向盘绕和折叠的方式。三级结构:蛋白质的二级结构基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的空间构象。四级结构:多亚基蛋白质

蛋白质分离实验

实验方法原理 实验材料 含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒 硼酸钠仪器、耗材 50 μm 内径的包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤 1. 用 50 mmol/L 硼酸钠缓冲液 1/10(V/V) 稀释蛋白质样品,使终浓度 1.0 mg/ml,也可在 50 mmol/L 硼酸钠缓

食物蛋白质含量

食物蛋白质含量食物蛋白质含量,蛋白质的来源非常广泛,我们曰常生活中的许多食物都含有蛋白质。各种各样的食品中都含有丰富的蛋白质。以下是我为大家精心准备的食物蛋白质含量,快来看看吧食物蛋白质含量11、含蛋白质的食物,先说牛奶,牛奶是比较常见的一种食物,而且不少青少年日常会饮用,牛奶中的蛋白质含量是每一百

蛋白质保存

蛋白保存的溶液选择前提是:他们不与蛋白质发生作用而保证蛋白质的空间结构的完整性,一般保存蛋白质都是用甘油或者DMSO(二甲基亚砜)。蛋白质保存的必要条件是避免蛋白质变性。变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响,改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏,都是

蛋白质离心转速

  提取蛋白质的时候一般是选择用硫酸铵沉淀的方法,离心转速一般在10000rpm左右,太低的话离心效果不好。

蛋白质回收实验

实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材电泳仪透析膜实验步骤1.  凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2.  切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri培养皿中

蛋白质(protein)概述

蛋白质是一种复杂的有机化合物,旧称“朊”。蛋白质这一概念最早是由瑞典化学家永斯·贝采利乌斯于1838年提出,但当时人们对于蛋白质在机体中的核心作用并不了解。1926年,詹姆斯·B·萨姆纳揭示尿素酶是蛋白质,首次证明了酶是蛋白质。第一个被测序的抗原肽蛋白质是胰岛素,由弗雷德里克·桑格完成,他也因此获得

蛋白质检测

·         Protein detection (Aberdeen's Lab)The method used to locate the proteins following 2D-PAGE depends on the nature of the original sample.

蛋白质回收实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒