蛋白质的纯化方法有哪些?原理是什么

蛋白质分离纯化常用方法有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析:a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。b.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出。5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开。......阅读全文

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验

ATP储存液的配制依赖环核苷酸的蛋白质激酶蛋白质激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝胶蛋白质激酶分析试剂、试剂盒ATP储存液                                                          实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多

完全蛋白质和半完全蛋白质等简介

  完全蛋白质  所含必需氨基酸种类齐全,数量充足,相互之问比例也适当,不但能够维持成人的健康,也能够促进人体的生长发育,如乳中的酪蛋白、蛋类中的卵白蛋白、大豆球蛋白、小麦中的麦符蛋白等。   半完全蛋白质  所含各种必需氨基酸种类齐全,但各种氨基酸含量多少不匀,互相之间比例不合适。在膳食中作为唯一

蛋白质分离实验_分离已知pI-的蛋白质

实验材料含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒缓冲液(pH>pI)仪器、耗材50 μm 内径的未包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤1. 用 pH 高于蛋白质的pI的 5 mmol/L 缓冲液 1/10 (V/F) 稀释蛋白质样品,使蛋白质(终浓度 = 1.0 mg/ml) 产生电荷

蛋白质测定仪用于羊奶蛋白质测定

      研究表明,羊奶是最接近母乳的奶,分子结构与母乳最相似,含有大量的乳清蛋白,婴儿对羊奶的消化率可达94%以上。因此在现代的很多奶制品生产企业,羊奶的生产频率很高,而在这些企业的品控中心,一般都配备有蛋白质测定仪这样的检测仪器,用于测定羊奶中的蛋白质含量,从而保障产品的质量。     

蛋白质根据蛋白质分子的外形进行分类

1.球状蛋白质分子形状接近球形,水溶性较好,种类很多,可行使多种多样的生物学功能。2.纤维状蛋白质分子外形呈棒状或纤维状,大多数不溶于水,是生物体重要的结构成分,或对生物体起保护作用。3.膜蛋白质一般折叠成近球形,插入生物膜,也有一些通过非共价键或共价键结合在生物膜的表面。生物膜的多数功能是通过膜蛋

关于蛋白质工程融合蛋白质的介绍

  脑啡肽(Enk)N端5肽线形结构是与δ型受体结合的基本功能区域,干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒抗肿瘤的细胞因子。黎孟枫等人化学合成了EnkN端5肽编码区,通过一连接3肽编码区与人α1型IFN基因连接,在大肠杆菌中表达了这一融合蛋白。以体外人结肠腺癌细胞和多形胶质瘤细胞为模型,采用3H-胸腺嘧啶

蛋白质的结构及蛋白质的功能(一)

   蛋白质为生物高分子物质之一,具有三维空间结构,因而执行复杂的生物学功能。蛋白质结构与功能之间的关系非常密切。在研究中,一般将蛋白质分子的结构分为一级结构与空间结构两类。  一、蛋白质的一级结构  蛋白质的一级结构(primary structure)就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序(

球状蛋白质和纤维状蛋白质区别

  以长轴和短轴之比为标准,球状蛋白质小于10,纤维状蛋白质大于10 [2] 。纤维状蛋白多为结构蛋白,是组织结构不可缺少的蛋白质,由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构,成为各种组织的支柱,如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白;球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质,

球状蛋白质和纤维状蛋白质区别

以长轴和短轴之比为标准,球状蛋白质小于10,纤维状蛋白质大于10。纤维状蛋白多为结构蛋白,是组织结构不可缺少的蛋白质,由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构,成为各种组织的支柱,如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白;球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质,如酶、转运蛋白

蛋白质的结构及蛋白质的功能(二)

   (二)蛋白质空间橡象与功能活性的关系  蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关,蛋白质的空间构象是其功能活性的基础,构象发生变化,其功能活性也随之改变。蛋白质变性时,由于其空间构象被破坏,故引起功能活性丧失,变性蛋白质在复性后,构象复原,活性即能恢复。  在生物体内,当某种物质

蛋白质定量/蛋白质含量的测定(LOWRY法)

实验概要运用LOWRY法测定蛋白质的含量。实验原理Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展,其原理是:蛋白质溶液用碱性铜溶液处理,形成铜-蛋白质的络合盐,再加入酚试剂后,除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此,Lowry法的显色效果比单独使用

蛋白质及蛋白质含量测定的几种方法

蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。蛋白质主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。 蛋白质含量测定的几种方法  1紫外分光光度法 蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范围内,蛋白质溶

蛋白质测定仪测定粗蛋白质的应用

凯氏定氮法是目前国家测定粮食、油料、饲料等粗蛋白质含量的标准方法。是先测定出样品中的含氮量,再乘以蛋白子换算系数。在测定过程中需用已知含氮量的标准物质做对照试验经常用无水硫酸按,其含氮量为21.19%,但由于系统误差的存在, 测定值与实际含氮量之间总是要存在一些误差。通过多年的试验对比,计算氮的回收

简述蛋白质结构在蛋白质设计中的应用

  蛋白质设计的目标是通过计算机辅助的算法以生成符合目标蛋白质三维结构的氨基酸序列,经过漫长的进化,自然界已经筛选出了数量众多的蛋白质,但天然蛋白质只有在自然条件下才发挥最佳功能,这使得人们利用这些蛋白质受到了限制,因此需要对蛋白质进行改造使其能适应特定条件发挥特定的功能。蛋白质分子的设计分为3类:

蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类

食品蛋白质测定的利器—蛋白质测定仪

  目前食品中蛋白质含量的测定主要采用凯氏定氮法,但是操作烦琐,试剂用量大,耗时较长。而新型仪器蛋白质测定仪具有简单、方便、快速,试剂用量少等优点。本文使用蛋白质测定仪和电位滴定仪检测食品中的蛋白质含量,对消化条件和测定条件进行了摸索,并与凯氏定氮法进行了比对,结果报告如下:    材料与方法  1

蛋白质及蛋白质含量测定的几种方法

   蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。蛋白质主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。    蛋白质含量测定的几种方法   1紫外分光光度法   蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具

蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类

蛋白质分离方法根据蛋白质溶解度不同

1、蛋白质的盐析中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力,可夺取蛋白质分子的水化层,使之

蛋白质纯化仪

蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),

蛋白质的传送

在细胞质中合成的新生肽链,有相当一部分被传送并定位到细胞内的不同细胞器上,或被分泌到细胞外。折叠成为特定空间构象的肽链,表面带有大量的亲水基团,虽然在细胞质中很容易被传送,但是不能通过脂质构成的细胞器膜。因此,定位在一些细胞器(例如线粒体)上的蛋白质,其新生肽链合成后,往往是和某种蛋白质伴侣结合,以

食物蛋白质含量

食物蛋白质含量食物蛋白质含量,蛋白质的来源非常广泛,我们曰常生活中的许多食物都含有蛋白质。各种各样的食品中都含有丰富的蛋白质。以下是我为大家精心准备的食物蛋白质含量,快来看看吧食物蛋白质含量11、含蛋白质的食物,先说牛奶,牛奶是比较常见的一种食物,而且不少青少年日常会饮用,牛奶中的蛋白质含量是每一百

蛋白质能否储存

我是学生物出生。我们补充的是氨基酸而非蛋白质,氨基酸被吸收进体内后在肝脏合成新蛋白质,转运到各处,老的,被解雇的蛋白质有些通过脱氨基作用被分解,脱氨基作用是一种蛋白的代谢途径。

关于蛋白质简介

  蛋白质是生命的第一要素,是构成一切细胞和组织结构必不可少的成分,并以不同形式参与维持生命的重要化学反应。生命的产生、存在与消亡,无不与蛋白质有关,故有人称蛋白质为“生命的载体”。恩格斯说:“蛋白质是生命的物质基础,生命是蛋白质存在的一种形式。”  构成蛋白质的基本单位是氨基酸,就像26个英文字母

蛋白质组成成分

单纯蛋白质的元素组成为碳50~55%、氢6%~7%、氧19%~24%、氮13%~19%,除此之外还有硫0~4%.有的蛋白质含有磷、碘。少数含铁、铜、锌、锰、钴、钼等金属元素。各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%.由于体内组织的主要含氮物是蛋白质,因此,只要测定生物样品中的氮含量,就可以按下式推算出

蛋白质分离纯化

蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。

蛋白质(六)病症

病症过量表现蛋白质如果摄取过量的话也会在体内转化成脂肪,造成脂肪堆积。肾脏要排泄进食的蛋白质,当分解蛋白质时会产生大量的氮素这样会增加肾脏的负担。蛋白质,尤其是动物性蛋白摄入过多,对人体同样有害。首先过多的动物蛋白质的摄入,就必然摄入较多的动物脂肪和胆固醇。其次蛋白质过多本身也会产生有害影响。正常情

蛋白质组成成分

单纯蛋白质的元素组成为碳50~55%、氢6%~7%、氧19%~24%、氮13%~19%,除此之外还有硫0~4%.有的蛋白质含有磷、碘。少数含铁、铜、锌、锰、钴、钼等金属元素。 各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%.由于体内组织的主要含氮物是蛋白质,因此,只要测定生物样品中的氮含量,就可以按下式推

蛋白质抽取实验

蛋白质在细菌中表现后,以反复的冷冻-解冻方法打破细胞,再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来,此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。仪器用具:恒温震荡培养箱37℃;高速冷冻离心机及离心管 (使用20,000 rpm离心陀)使用高速离心机要注意: 离心机及离心陀的温度要预冷完全,相对位置的两只离心管要平衡好

蛋白质回收实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材 电泳仪透析膜实验步骤 1.  凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2.  切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri