常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种

常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等1.离子交换色谱:蛋白质和氨基酸一样会两性解离,所带电荷决定于溶液ph。ph小于pi时蛋白质带正电,ph大于pi时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中,表面电荷情况不同。离子交换就是利用不同蛋白质在同一溶液中表面电荷的差异来实现分离的。2.亲和色谱:生物大分子有一个特性,某些分子或基因对它们有特异性很强的吸附作用。如镍柱中ni可以与his标签的蛋白结合,这种只针对一种或一类物质的吸附就是亲和色谱的原理。3.电泳:sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳,sds能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的sds溶液中,与sds分子按比例结合,形成带负电荷的sds-蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的sds,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,从而降低或......阅读全文

常用的纯水的检验方法有哪几种

从学术角度讲,纯水又名高纯水,是指化学纯度极高的水,其主要应用在生物、化学化工、冶金、宇航、电力等领域,但其对水质纯度要求相当高,所以一般应用最普遍的还是电子工业。例如电力系统所用的纯水,要求各杂质含量低达到“微克/升”级。在纯水的制作中,水质标准所规定的各项指标应该根据电子(微电子)元器件(或材料

蛋白质的分离纯化(一)

  蛋白质的分离纯化是生物化学技术中的重要内容,在科研和生产中都有重要作用。蛋白质纯化的流程大致包括选材及预处理、细胞破碎及抽提、初步提取和精制纯化等部分,根据具体的纯化目的和要求可以有所不同。  选材的主要原则是原料易得,蛋白含量高,最好便于纯化。蛋白质的主要来源包括动物、植物和微生物。由于种属差

蛋白质提取纯化的方法有哪些?

  蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。图片来源于网络  根据蛋白质溶解度不同,蛋白质的分离纯化可分为盐析法和等电点沉淀法。盐析一般是指溶液中加入无机盐类而

提取挥发油常用方法有哪几种

挥发油的提取方法主要有1、水蒸气蒸馏法 2、浸取法 3、冷压法 在应用上各有特点:1、水蒸气蒸馏法的特点: ①混合物的沸点比任一单一液体的沸点低; ②分馏比不变; (即:蒸出油的质量与水蒸汽用量成正比) ③沸点高的可被水蒸气蒸馏出来.2、浸取法的特点;防止氧化、热解及提高品质; 所得芳香挥发油气味与

常用的蠕形螨检查方法有哪几种?

常用的蠕形螨检查方法有3种:①透明胶纸粘贴法 用透明胶纸于晚上睡前,粘贴于面部的鼻、鼻沟、额、颧及颏部等处,至次晨取下贴于载玻片上镜检。检出率与胶纸的粘性,粘贴的部位、面积和时间有关。②挤刮涂片法 通常采用痤疮压迫器刮取,或用手挤压,或用沾水笔尖后端等器材刮取受检部位皮肤,将刮出物置于载玻片上,加1

仪器分析中常用的测定方法有哪几种

内标法,外标法,面积归一法,校正面积归一法,标准加入法

常用的流体流速测量方法有哪几种

各种流量计原理及分类利用容积积分原理的流量计:(容积式)这类流量计的测量原理和使用一个小量杯经过多次测量得到大容器内液体的容量相类似.它是通过使流体在流动过程中进入一个固定大小的空间,并推动这个空间沿流体运动方向运动到一定位置后流出.当这个过程连续进行时,统计通过的空间的数量即可得到流量.根据这个原

实验室常用的染色方法有哪几种

实验室常用的染色方法有如下几种:(1)瑞氏染色法染色结果使组织细胞的胞浆和核染成不同颜色,菌体呈蓝紫色,易于识别。(2)革兰氏染色法可用于鉴别革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。革兰氏阳性菌不易被酒精脱色而染成蓝紫色,革兰氏阴性菌则易被酒精脱色,经复染呈红色。(3)美蓝染色法多色性美蓝染色液可染细菌荚膜,使

蛋白质分离纯化的四种方法

1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱

蛋白质分离纯化的四种方法

1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱

蛋白质分离方法有哪些

1.根据分子大小不同进行分离纯化蛋白质是一种大分子物质,并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质和小分子物质分开,并使蛋白质混合物也得到分离.根据蛋白质分子大小不同进行分离的方法主要有透析、超滤、离心和凝胶过滤等.透析和超滤是分离蛋白质时常用的方法.透析是将待分离的混合物放

蛋白质分离方法有哪些

1.根据分子大小不同进行分离纯化蛋白质是一种大分子物质,并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质和小分子物质分开,并使蛋白质混合物也得到分离.根据蛋白质分子大小不同进行分离的方法主要有透析、超滤、离心和凝胶过滤等.透析和超滤是分离蛋白质时常用的方法.透析是将待分离的混合物放

蛋白质沉淀有哪几种方法

你说的蛋白质的沉淀有两种,加轻金属盐(如氯化钠)之后会凝固,不过是可逆的,加足量的水后就变得澄清了.另一种是在加热,加入重金属盐(如醋酸铅),浓酸,或加入甲醛、乙醇等有机物之后会变性产生固态沉淀,这是不可逆的.

分离蛋白质的方法有哪些

根据分子大小不同进行分离纯化蛋白质是一种大分子物质,并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质分离,要有透析、超滤、离心和凝胶过等.2.根据溶解度不同进行分离纯化影响蛋白质溶解度的外部条件有很多,比如溶液的pH值、离子强度、介电常数和温度等.达到分离纯化蛋白质的目的.常用的方

蛋白质除盐的方法有哪几种

蛋白质除盐的方法有哪些?如何做能够在除盐的过程中不过分的稀释蛋白质?答题思路:首先,当遇到分离纯化题目的时候,我们脑海中先归纳出分离纯化的各种方法以及依据。根据分子大小不同:透析、超过滤、密度梯度离心、凝胶过滤、SDS-PAGE凝胶电泳。根据溶解度差别:等电点沉淀、盐溶、盐析、有机溶剂分离沉淀。根据

蛋白质除盐的方法有哪几种

蛋白质在用盐析沉淀分离后 需要将蛋白质中的盐除去 常用的办法是透析 即把蛋白质溶液装入秀析袋内(常用的是玻璃纸)用缓冲液进行透析 并不断的更换缓冲液 因透析所需时间较长 所以最好在低温中进行 此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐 所用的时间就比较短2、等电点沉淀法蛋白质在静电状态时颗

自由流电泳分离纯化蛋白质有哪些特点

向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳,蛋白质带有电荷么电泳法分离蛋白质是根据蛋白质的什么原理:一般是通过生化方法吧蛋白提取出来,电泳时的正极与负极都会发生电解反应,是将混合样品中的蛋白质,其原理是第一向基于蛋白质 PI 不同用等电聚焦

常用的微孔滤膜有哪几种

(1) 水系微孔滤膜:一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜,以防滤膜被溶解,因为水系滤膜一般由纤维素类的材料制成。纤维素类膜材料的特点是亲水性好、成孔性好、来源广泛,但耐酸碱和有机溶剂能力差,抗蠕变性能差。水系滤膜系列包括:醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、混酯膜再生纤维

蛋白质分离纯化基本介绍

是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。

蛋白质分离纯化应用范围

1、 化学物质的分离、提纯、浓缩;2、染料、染料中间体的浓缩及脱盐3、超细粉体生产过程中的产品回收;4、生产废水中有用物质的提纯、回用;5、海洋生物提取物的浓缩、提纯6、氨基酸、蛋白质的浓缩、提纯

蛋白质分离纯化产品特点

1、处理过程为单纯物理过程,无任何相变。设备操作温度低,避免了传统工艺的种种弊端;2、系统采用先进的膜分离技术,工艺简单,运行稳定可靠,处理效率高;3、可以对生产废水中的有用物质进行提纯回用,实现经济、环保双赢;4、设备投资少,运行费用低。[1] 

蛋白质分离纯化技术详解

沉淀法沉淀法也称溶解度法。其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质,进而导致有效成分的溶解度发生变化。1、盐析法盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐

蛋白质分离纯化程序步骤

(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有,高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。2. 渗透破碎

蛋白质的表达、分离和纯化

目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,同时克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠杆菌是目前应用最广泛的蛋白质表达系

蛋白质的表达、分离、纯化实验

实验方法原理 携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在 37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸(NTA)使镍离子(Ni2+)固相化的层析介质加以提纯,实为金属熬合亲和层析(MCAC)。蛋白质的纯化程

蛋白质的表达、分离、纯化实验

基因重组—层析法             实验方法原理 携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在 37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转

蛋白质的分离纯化根据蛋白质带电性质进行分离

蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同,可将其分开。1、电泳法各种蛋白质在同一pH条件下,因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解质作为载体,电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度,当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时,

细胞免疫功能检测常用有哪几种方法

细胞免疫(CMⅠ)是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定,因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂,且很难标准化。一、迟发型过敏反应的体外检测方法皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应(DTH)的两

细胞免疫功能检测常用有哪几种方法

细胞免疫(CMⅠ)是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定,因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂,且很难标准化。一、迟发型过敏反应的体外检测方法皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应(DTH)的两

细胞免疫功能检测常用有哪几种方法

  细胞免疫(CMⅠ)是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定,因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂,且很难标准化。  一、迟发型过敏反应的体外检测方法  皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应(