大规模细胞培养需要什么耗材和原料
免疫组化(包括冷冻切片和石蜡切片)免疫组化:免疫组化石蜡切片(ihc-p):石蜡包埋,优点是可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,常用。免疫组化冰冻切片(ihc-fr):优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。一定要存在-80度的低温冰箱中。要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片免疫组化:一抗+二抗试剂盒(三步法和两步法)+dab显色试剂盒(通用)抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:分析或应用的类型样本蛋白的结构性质样本的种属抗体宿主的种类抗体的标记和检测细胞培养实验需要用到的试剂有:血清,培养基耗材:细胞培养板,培养皿(可以考虑一下nest的性价比很高)细胞培养板细胞培养皿细胞培养瓶玻底......阅读全文
植物细胞大规模培养
植物细胞培养技术就是为了某种目的而在细胞水平上对离体植物细胞或原生质体进行的一系列生物工艺学操作。它包括分离、培养、再生以及一系列相关的操作。就有用化合物的生产来说,它主要是指在无菌条件下通过培养植物细胞生产有用化合物的过程。一、植物细胞培养的特性(1)植物细胞较微生物细胞大得多,有纤维素细胞壁.细
293细胞的大规模培养
293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤,心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞 293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶 1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善 293
植物细胞大规模培养技术
植物细胞培养技术就是为了某种目的而在细胞水平上对离体植物细胞或原生质体进行的一系列生物工艺学操作。它包括分离、培养、再生以及一系列相关的操作。就有用化合物的生产来说,它主要是指在无菌条件下通过培养植物细胞生产有用化合物的过程。一、植物细胞培养的特性(1)植物细胞较微生物细胞大得多,有纤维素细胞壁.细
293细胞的大规模培养
293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤、心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善293细胞的
动物细胞大规模培养介绍
所谓动物细胞大规模培养技术(large-scale culture technology)是指在人工条件下(设定pH、温度、溶氧等),在细胞生物反应器(bioreactor)中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍
动物细胞大规模培养方法
根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4.群体生
动物细胞大规模培养方法
根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应,贴壁生长(锚地依赖性) 5.培养过程产
大规模细胞培养的工艺类型
无论呈悬浮生长的细胞还是贴壁生长的细胞,按操作方式,将工艺类型可以分为以下四种:一、分批式培养是指将细胞和培养物一次性加入培养反应器内,在细胞生长和产物生成同时经行,经过一段时间反应后,将整个反应体系取出。这种培养方式,细胞生长的环境处在不断变化之中,如营养物质不断减少,乳酸等代谢抑制物增加,不能使
动物细胞大规模培养技术3
五、动物细胞无血清培养技术 动物细胞无血清培养是生物科学领域中的重要研究课题之一。由于无血清培养基可以是完全采用已知分子结构和构型组分的低蛋白或无蛋白培养基。因而它不仅为研究和阐明细胞生长、增殖和分化的调节机制提供了有力的工具,而且为现代生物技术,尤其是细胞工程的应用准备了更好的条件。下面就动物细
动物细胞大规模培养技术1
一、前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年,动物细胞培养规模开始扩大,发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法,利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等,动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市
动物细胞大规模培养技术2
2、固定化方法的选择 (1) 培养规模 由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度,且细胞的产率主要取决于细胞的扩散,因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作,但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。 (2) 培养方式 除了海藻酸钙包埋法外,其他固定化基质
动物细胞大规模培养的意义
动物细胞大规模培养是指在人工条件下(设定配合、温度、溶氧等)在细胞生物反应器中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍体细胞、虫(中华仓鼠卵巢)细胞、BHK-21(仓鼠肾细胞)Vero细胞(非洲绿猴肾传代细胞,是贴壁依赖
关于细胞的大规模培养技术形式
大规模细胞培养中的深层培养可分为分批式、流加式、半连续式、连续式和灌注式、细胞工厂5种技术形式。(一)分批式培养分批式培养是细胞规模培养发展进程中较早期采用的方式,也是其他操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器,将细胞扩大培养后,一次性转人生物反应器内进行培养,在培养过程中其体积不变,不添加
动物细胞大规模培养技术-(二)
第三节 大规模培养技术的操作方式深层培养可分为:分批式、流加式、半连续式、连续式、连续式和灌注式五种。一、分批式培养(batch culture) 是细胞规模培养发展进程中较早期采用的方式,也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器,将细胞扩大培养后,一次性转入生物反应器内进行培养,在培
转化细胞大规模培养技术的操作方式
转化细胞深层培养可分为:分批式、流加式、半连续式、连续式、连续式和灌注式五种。一、分批式培养(batch culture) 是细胞规模培养发展进程中较早期采用的方式,也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器,将细胞扩大培养后,一次性转入生物反应器内进行培 养,在培养过程中其体积不变,
大规模细胞培养的工艺类型介绍
无论呈悬浮生长的细胞还是贴壁生长的细胞,按操作方式,将工艺类型可以分为以下四种: 一、分批式培养 是指将细胞和培养物一次性加入培养反应器内,在细胞生长和产物生成同时经行,经过一段时间反应后,将整个反应体系取出。这种培养方式,细胞生长的环境处在不断变化之中,如营养物质不断减少,乳酸等代
Biomaterials:新型水凝胶可大规模扩增T细胞
免疫治疗领域近年来有了不少新进展,比如改造T细胞用于过继细胞治疗。这些成果有望引入更有效的抗癌策略,但也存在许多限制。比如,T细胞在制造和操控上仍然具有挑战性,也就是说,人们很难在短时间内生产大量的治疗性T细胞。 西班牙的研究人员近日设计出一种新型的水凝胶(hydrogel),可大规模培养T淋
大规模细胞培养需要什么耗材和原料
免疫组化(包括冷冻切片和石蜡切片)免疫组化:免疫组化石蜡切片(ihc-p):石蜡包埋,优点是可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,常用。免疫组化冰冻切片(ihc-fr):优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。一定要存在-80度的低温冰箱中。要求做冰冻切片的不
抗癌树突状细胞实现大规模培养-推动癌症治疗
美法两国研究人员组成的团队14日在《细胞报告》杂志上发表论文称,他们开发出一种大规模培养多种类型树突状细胞的方法,或将推动多种类型癌症治疗的研究。 树突状细胞是一种专职抗原递呈细胞,能高效摄取、处理和传递抗原信息,将感知到的危险信号传递给淋巴细胞,诱发免疫反应。因树突状细胞处于人体免疫应答
悬浮液可用于大规模培育胚胎干细胞
以色列耶路撒冷哈德萨医学中心的科学家宣布,他们用悬浮液培育胚胎干细胞取得突破,向大规模培育胚胎干细胞用于医学治疗的目标前进了一步。 胚胎干细胞是人体的全能细胞,有发育为各种人体组织和器官的潜力,对治疗帕金森氏症等许多疑难疾病,以及修复和更换受损的细胞组织有重要意义。但由于胚胎干细胞来
动物细胞大规模培养的生物反应器
动物细胞培养技术能否大规模工业化、商业化,关键在于能否设计出合适的生物反应器(bioreactor)。由于动物细胞与微生物细胞有很大差异,传统的微生物反应器显然不适用于动物细胞的大规模培养。首先必须满足在低剪切力及良好的混合状态下,能够提供充足的氧以供细胞生长及细胞进行产物的合成。 一、生物反
大规模质谱法简介
目前,研究人员们正在通过各种方法使大规模质谱法变得更有效,而且将这一技术工具缩小化。 大规模质谱法对于药物的发现来说是一个无法比拟的有力工具,而且它在定性与定量分析的应用中有着很大的价值。虽然大规模质谱法的应用能力和敏感性被不断的改进,但是在药物发现研究里面的
动物细胞大规模培养用生物反应器(bioreactor)简介
动物细胞培养技术能否大规模工业化、商业化,关键在于能否设计出合适的生物反应器(bioreactor)。由于动物细胞与微生物细胞有很大差异,传统的微生物反应器显然不适用于动物细胞的大规模培养。首先必须满足在低剪切力及良好的混合状态下,能够提供充足的氧以供细胞生长及细胞进行产物的合成。一、生物反应器分类
Cell:-中国学者首次发布大规模肿瘤单细胞水平免疫图谱
2017 年 6 月 15 日,北京大学生命科学学院 BIOPIC 中心、北京未来基因诊断高精尖创新中心、北大 -清华生命科学联合中心张泽民研究组,首都医科大学附属北京世纪坛医院暨北京大学第九临床医学院肝胆胰外科彭吉润研究组,及美国 AMGEN 公司的欧阳文君研究组在《Cell》杂志发表了题为
cell-张泽民团队首次发布大规模肿瘤单细胞水平免疫图谱
2017年6月15日,北京大学生命科学学院 BIOPIC 中心、北京未来基因诊断高精尖创新中心、北大 -清华生命科学联合中心张泽民研究组,首都医科大学附属北京世纪坛医院暨北京大学第九临床医学院肝胆胰外科彭吉润研究组,及美国 AMGEN 公司的欧阳文君研究组在《Cell》杂志发表了题为“Land
动物细胞大规模培养有哪几种生物反应器
在过去几十年来,动物细胞大规模培养技术经有了很大发展,从使用转瓶(roller bottle) 、CellCube等贴壁细胞培养,发展为生物反应器(Bioreactor)进行大规模细胞培养。 自70年代以来,细胞培养用生物反应器有很大的发展,种类越来越多,规模越来越大,较常见的细胞培养生
我国大规模细胞培养生物反应器综述(二)
(4) 生物技术发展要求性能更高的生物反应器 为了适应各种生物技术的实验室成果向产业化转化的需要,对生物反应器的性能要求愈来愈高,目前主要表现为: l 用于基因工程高密度高表达,符合GMP标准的生物反应器以及一些新技术的应用等。其中关于供氧问题,快速升温、SIP自动灭菌、CIP自动清洗、机械密
我国大规模细胞培养生物反应器综述(四)
3.2.4生物反应器中试系统设计对于生产量大的传统生物技术产品,为了对已经通过前期研究(实验室研究和市场分析)的产品进行过程优化研究,在中试规模上达到高生产水平或质量,并进而为车间生产提供工艺放大依据和设备设计依据,必要时还可进行小批量生产,提供应用试验样品、或供市场销售的部分产品。为此,近年来许多
我国大规模细胞培养生物反应器综述(一)
文章比较全面的介绍了我国目前生物反应器的现状,各种品种发酵的特点.提出了反应器的设计要以代谢流分析为核心,要从系统生物学的角度出发.1、发展大规模细胞培养及其生物反应器借助于细胞培养进行各种产品生产已是我国生物技术产业化的重要组成部分,涉及医药、化工、轻工、食品、农业、海洋、环保等行业。培养的细胞不
我国大规模细胞培养生物反应器综述(三)
3.2国内生物反应器设计与制造发展趋势 3.2.1以代谢流分析为核心的生物反应器 长期来发酵过程优化与放大所依据的基本思想和方法是采用经典动力学为基础的最佳工艺控制点为依据的静态操作方法,实质上这只是化学工程宏观动力学概念在发酵工程上的延伸。例如,用氨水调节pH时,关心的是最佳pH值,却不注意