诱变育种的概念
是人为的措施诱导植物遗传基因产生变异,然后在产生变异的植株中按照需要选育出新的优良品种。诱变育种常用的有物理因素和化学因素,物理因素如各种射线、微波或激光等处理诱变材料,习惯上称之为辐射育种;化学因素是运用能导至遗传物质改变的一些化学药物——诱变剂处理诱变材料促使变异,常称之为化学诱变。......阅读全文
USE-诱变实验
实验材料 带 mutS 表型(例如 BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态 带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态 试剂、试剂盒
诱变-PCR-实验
试剂、试剂盒 氯仿 异戊醇 乙醇 矿物油或者一个蜡珠 3mol L NaOAc 5 mmol L MnCl2 突变 PCR 缓冲液
USE-诱变实验
实验材料 带 mutS 表型(例如BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态试剂、试剂盒 退火缓冲液贮存液合成缓冲液噬菌体 T4DNA 连接酶噬菌体 T4DNA 聚合酶或测序酶单一位点的限制性内切核酸酶琼脂糖凝胶诱变引物选择引物质粒 DNA仪器、耗材 70°C
USE-诱变实验
本方法中,两条寡核苷酸引物杂交到变性重组质粒 DNA 双链的同一条链上。一条引物(诱变引物)携带一个拟引进靶 DNA 序列的突变,第二条引物携带一个能破坏质粒单一限制酶位点的突变。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料带 mutS 表型(
盒式诱变的简介
盒式诱变(cassette mutagenesis)是一种定点诱变技术,其方法是利用一段人工合成的具有突变序列的双链寡核苷酸片段,取代野生型基因中相应序列。这种诱变的双链寡核苷酸片段是由两条人工合成的寡核苷酸链组成的,当它们退火时,会按照设计要求产生出克隆需要的粘性末端。这些合成的寡核苷酸片段就
饱和诱变的定义
对基因的某一小区域内碱基进行所有形式或所有可能存在形式的诱变。
种猪育种
种猪是繁殖的基础,种猪的质量直接影响整个猪群的生产水平,所以,种猪的选择必须符合生产目标,只有将种猪选好才能生产出优良的后代,因此种猪的选择又是繁殖技术中关键的第一步。它包括外形选择、繁殖性能、生长发育和胴体瘦肉率的选择。 (1)毛色、皮色 毛色、皮色虽然没有直接经济价
关于诱变的化学诱变剂抗生素的介绍
如平阳霉素(PYM),PYM是一种抗生素,属于博莱霉素的一类。目前主要作为抗肿瘤药应用于临床,对多种癌症具有较好的疗效。抗生素具有高度选择性,能抑制细胞的生长,其中的大多数对维持生命有重要意义。作为一种新的诱变剂,平阳霉素能直接作用于DNA,高浓度时可使DNA链断开,低浓度时能抑制连接酶,阻止胸
关于基因诱变的室温等离子体诱变剂的介绍
常压室温等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma)的简称,(缩写为ARTP)能够在大气压下产生温度在25-40 °C之间的、具有高活性粒子(包括处于激发态的氦原子、氧原子、氮原子、OH自由基等)浓度的等离子体射流。按照热力学平衡状态,等离子体可分为
定点诱变实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE寡核苷酸引物质粒dNTPDNA聚合酶氯仿石蜡油无水乙醇仪器、耗材 离心管热循环仪离心机实验步骤 1. 利用突变区两侧的限制性内切酶位点将待诱变的DNA片段亚克隆进高拷贝数的载体中。 2. 用小量制备的质粒提取模板DNA,用TE缓冲液重悬100 ng DNA至终浓
定点诱变实验
基本方案 利用PCR引物点突变 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
关于基因诱变的化学诱变剂烷化剂的介绍
烷化剂通常带有1个或多个活性烷基,此基团能够转移到其它电子密度高的分子上去,使碱基许多位置上增加了烷基,从而在多方面改变氢键的能力。例如EMS被证明是最为有效而且负面影响小的诱变剂。与其他烷化诱变剂类似,是通过与核苷酸中的磷酸、嘌呤和嘧啶等分子直接反应来诱发突变。EMS诱发的突变主要通过两个步骤
花药及花粉培养
一、 概念及意义 1.概念 花药培养其外植体是植物雄性生殖器官的一部分,就培养方法和技术来讲,属于器官培养的范畴。 花粉培养的精确定义是:将处于一定发育阶段的花粉从花药中分离出来,再加以离体培养。有时花粉培养也称为小孢子培养(microspore culture)
诱变物质的微核测定
实验概要1、了解微核测定的方法与意义 2、寻找新的测试系统及新的更安全有效的植物诱变剂实验原理微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学
DNA的接头分区诱变实验
实验材料 DNA 试剂、试剂盒 雾水乙醇 EDTA T4 DNA连接酶 TE
DNA的接头分区诱变实验
Linker scanner mutations (接头分区突变):体外在限制性片段加上位点,使两个DNA分子发生重组产生,结果在重组的位点加上连接序列。实验材料DNA试剂、试剂盒雾水乙醇EDTAT4 DNA连接酶TENaCl仪器、耗材培养箱水浴锅实验步骤1. 用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核
插入诱变技术的作用机理
细菌、植物和动物的基因转化具有重要的研究和商业价值。定向的外源基因的导入可以鉴定原来内源基因的功能,因为导入的外源基因可以导致被插入内源基因的突变或表达改变。这种突变技术被称为插入诱变,通常使用逆转录病毒作为DNA传递的载体。这种插入突变多被用于肿瘤细胞特定位置癌基因的鉴定。
DNA的接头分区诱变实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 雾水乙醇EDTAT4 DNA连接酶TENaCl仪器、耗材 培养箱水浴锅实验步骤 1. 用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在质粒的目的区域产生一嵌套式的5’或3端'缺失突变体。首先在目的序列附近用一限制酶使质粒线性化,在用Bal 31消化时,应确定其切割效
关于诱变后代的基本介绍
经诱变处理产生的诱变一代,以M1表示。由于受射线等诱变因素的抑制和损伤,M1的发芽率、出苗率、成株率、结实率一般较低,发育延迟,植株矮化或畸形,并出现嵌合体。但这些变化一般不能遗传给后代。诱变引起的遗传变异多数为隐性,因此M1一般不进行选择,而以单株、单穗或以处理为单位收获。诱变二代(M2)是变
基因突变的应用介绍
诱变育种通过诱发使生物产生大量而多样的基因突变,从而可以根据需要选育出优良品种,这是基因突变的有用的方面。在化学诱变剂发现以前,植物育种工作主要采用辐射作为诱变剂;化学诱变剂发现以后,诱变手段便大大地增加了。在微生物的诱变育种工作中,由于容易在短时间中处理大量的个体,所以一般只是要求诱变剂作用强,也
单倍体育种
利用各种有效方法产生单倍体后,进行染色体人工或自然加倍,使植株恢复正常育性,迅速获得稳定的新品种的育种方法。单倍体是只具有配子体染色体组分的个体、组织或细胞。由这种细胞分化、生长出来的植株叫单倍体植物,此种植物不能生殖,必须使其染色体组分加倍,才能继续繁殖,获得稳定一致的后代。 通过单倍体形成
简述亚硝基胍的主要用途
医学上的应用 1.由于其具有诱发癌变的效果,所以,被医学界广泛用于研究癌症发生机制的研究中。 微生物育种方面的应用 2.用于诱变育种,是公认效果显著的化学超诱变剂。 用于诱变育种的主要原理为:亚硝基胍属烷化剂,而烷化剂是突变中一类相当有效的化学诱变剂,这类诱变剂具有1个或多个活性烷基,它
试管育种的技术方法
中文名称试管育种英文名称test-tube breeding定 义植株在体外培养的条件下,通过人工诱变进行新品种选育的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
倍性育种的特点
1.同源多倍体植物的特点①育性差,结实率低.②大多数同源多倍体是无性繁殖的,多年生的.③同源多倍体基因型种类比二倍体多纯显性:AAAA;三显性:AAAa;双显性:AAaa;单显性:Aaaa;无显性:aaaa④同源多倍体达到遗传平衡的时间长⑤器官的巨型性2.异源多倍体植物的特点染色体配对正常,植株雌雄
霉菌的杂交育种
准性生殖是一种类似于有性生殖但比它更原始的一种生殖方式。它可使同一种生物的两个不同来源的体细胞经融合后,不经过减数分裂,不产生有性孢子,仅通过低频率的基因重组并产生重组体细胞。(1)菌丝联结 常发生在一些形态上没有区别但在遗传性上却有差别的同一菌种的两个体细胞(单倍体)间,发生联结的频率极低。
分子遗传学词汇化学诱变
中文名称:诱变外文名称:mutagenic定义:是人为的措施诱导植物遗传基因产生变异,然后在产生变异的植株中按照需要选育出新的优良品种。诱变育种常用的有物理因素和化学因素,物理因素如各种射线、微波或激光等处理诱变材料,习惯上称之为辐射育种;化学因素是运用能导至遗传物质改变的一些化学药物——诱变剂处理
分子遗传学词汇化学诱变
中文名称:诱变外文名称:mutagenic定义:是人为的措施诱导植物遗传基因产生变异,然后在产生变异的植株中按照需要选育出新的优良品种。诱变育种常用的有物理因素和化学因素,物理因素如各种射线、微波或激光等处理诱变材料,习惯上称之为辐射育种;化学因素是运用能导至遗传物质改变的一些化学药物——诱变剂处理
枯草芽孢杆菌的紫外线诱变选育实验——紫外线诱变法
紫外线对微生物有诱变作用,主要引起是DNA的分子结构发生改变(同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体),从而引起菌体遗传性变异。将细胞计数后的平板,分别向菌落数在5-6个左右的平板内加碘液数滴,在菌落周围将出现透明圈。分别测量透明圈直径与菌落直径并计算其比值(HC值),并与对照平板进行比
定点诱变(DpnI法)
1、引物设计:每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。2、反应:使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循环次数少,一般为12个循环。反应体系:10x pyrobest Buffer 5 uldNTP Mixture(10mM) 1ul模板DN
定点诱变(DpnI法)
1、引物设计:每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。2、反应:使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循环次数少,一般为12个循环。反应体系:10x pyrobest Buffer 5 uldN