关于离子交换层析的基本信息介绍
离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。 离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基氨基乙基纤维素(DEAE纤维素)。前者为阳离子交换剂,后者为阴离子交换剂。......阅读全文
关于离子交换层析的基本信息介绍
离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。 离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基
关于离子交换层析的内容介绍
离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。 离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基
关于离子交换层析的发展介绍
1848年,Thompson等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换现象。上世纪40年代,出现了具有稳定交换特性的聚苯乙烯离子交换树脂。50年代,离子交换层析进入生物化学领域,应用于氨基酸的分析。离子交换层析是生物化学领域中常用的一种层析方法,广泛的应用于各种生化物质如氨基酸、蛋白、糖类、核
离子交换层析的基本信息
离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有负电荷的称之阳离子交换树脂;而带有正电荷的称之阴离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过
关于离子交换层析的加样相关介绍
层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷能力。柱的负荷能力可用交
关于离子交换层析法提取IgG的介绍
常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素,以QAE-Sephadex最为理想,DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸盐缓冲液中平衡,将水分抽干,称湿重Ig加于10ml血清中,在室温30min后,离心或过滤
阳离子交换层析介绍
中文名称阳离子交换层析英文名称cation exchange chromatography定 义利用不同分子在所设计的条件(如pH、离子强度等)下,携带电荷情况不同,与阳离子交换剂结合的强度不同,可以用不同的条件洗脱出不同的组分的一种层析法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二
阴离子交换层析介绍
中文名称阴离子交换层析英文名称anion exchange chromatography定 义一种含阴离子交换剂的层析系统,根据样品混合物中各成分所含负电荷数量的不同,从而对阴离子交换剂结合的强度不同而得以分离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
离子交换层析的应用介绍
离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基氨基乙基
关于离子交换层析法的基本内容介绍
离子交换层析法(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。常用的离子交换剂有:离子交换纤维素、离子交换葡聚糖和离子交换树脂 。 离子交换层析法中
关于凝胶层析的基本信息介绍
凝胶过滤层析是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行洗脱分离的一项技术。 [1] 凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称为排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化
关于吸附层析的基本信息介绍
指混合物随流动相通过固定相时,由于吸附剂对不同物质的不同吸附力,而使混合物分离的方法。它是各种层析技术中应用最早的一类,至今仍广泛应用于各种天然化合物和微生物发酵产品的分离、制备。 吸附是表面的一个重要性质,任何两相都可以形成表面,其中一个相的物质或溶解在其中的溶质在此表面的密集现象称为吸附。
离子交换层析法基本介绍
离子交换层析法(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。常用的离子交换剂有:离子交换纤维素、离子交换葡聚糖和离子交换树脂 。 离子交换层析法中
离子交换层析实验离子交换层析技术
离子交换层析实验可应用于:(1)分离纯化蛋白质;(2)分离氨基酸;(3)分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。实验方法原理离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的
关于层析技术的基本信息介绍
层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量比)不同,且随流动相向前移动,各组分不断地在两相
关于亲和层析的基本信息介绍
亲和色谱也称为亲和层析,是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离的物质有一定结合能力的分子,并且它们的结合是可逆的,在改变流动相条件时二者还能相互分离。亲和色谱可以用来从混合物中纯化或浓缩某一分子,也可以用来去除或减少混合物中某一分子的含量。
关于气相层析的基本信息介绍
气相层析也称气相色谱。它与一般层析法的区别主要在于用气体代替液体作为扩展剂或洗脱剂,因此也同样有吸附气体层析法(气固层析法)和分配气体层析法(气液层析法)两种操作形式。实际应用中以后者为常用。 背景:气液层析法自1952年发表以来发展迅速,目前已形成了一门独立的分离分析技术,其应用范围自石油化
关于免疫层析法的基本信息介绍
免疫层析法(immunochromatography)的原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金或免疫酶染色可使
关于高压液体层析的基本信息介绍
又称高效液相层析(或色谱)。其分离分析原理和经典的液体层析基本相同,但它采用了特有的固定相液体,加上在高压下工作,又与自动分析仪器相结合,成为一种高效的分析方法。广泛用于药物、杀虫剂、高分子量芳香族化合物、增塑剂、抗生素、各种有机试剂以及核酸、核苷酸类物质的分离分析。 高压液体层析特点是采用长
关于电子捕获层析的基本信息介绍
电子捕获检测器是分析痕量电负性较强的有机化合物最有效的检测器,也是放射性离子化检测器中应用最广的一种检测器。电子捕获层析的作用机理是:利用电负性化合物对放射性电子射线的不同电子俘获能力。外加一定场强时,放射源的初级电子在电场作用下向正极(收集极)移动,经与载气分子碰撞,产生更多的次级电子与正离子
关于离子交换层析的发展介-绍
1848年,Thompson等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换现象。上世纪40年代,出现了具有稳定交换特性的聚苯乙烯离子交换树脂。50年代,离子交换层析进入生物化学领域,应用于氨基酸的分析。离子交换层析是生物化学领域中常用的一种层析方法,广泛的应用于各种生化物质如氨基酸、蛋白、糖类、核
离子交换层析
离子交换层析利用含有能与周围介质进行离子交换的不稳定离子的不溶 性基质来分离分离物质。 1、离子交换基质Adams 和Holnes 有1935 年通过酚、甲醛和磺酸缩 聚成不溶性树脂,制成了第一个人工合成的离子交换材料。从此以后,人工 合成的离子交换树脂日见增多(多数是从芳香族化合物合成
关于离子交换剂的基本信息介绍
离子交换剂指的是含有若干离子基团的不溶性高分子物质,是通过在不溶性高分子物质(母体) 上引入若干可解离基团(活性基团) 而制成。根据活性基团的性质不同,离子剂可分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。根据母体的不同,离子交换剂可分为离子交换树脂、离子交换纤维素和离子交换凝胶等。
离子交换层析实验离子交换层析介质和层析柱的选择
实验步骤1. 离子交换凝胶的选择依据:(1)根据蛋白质的pH只稳定范围。蛋白质在等电点pI以上pH稳定时选择阴离子交换凝胶介质,在pI以下pH的稳定时,则选用阳离子交换凝胶介质。(2)根据特分离蛋白质的分子大小。分子量在10 000~100 000 0 Da 的蛋白,选用如DEAE-Sephace
关于离子交换层析的操作—-预处理和装柱介绍
对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使
离子交换层析技术的应用介绍
离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。
离子交换层析的用途和过程介绍
支持物是人工交联的带有能解离基团的有机高分子,如离子交换树脂、离子交换纤维素、离子交换凝胶等。带阳离子基团的,如磺酸基(—SO3H)、羧甲基(—CH2COOH)和磷酸基等为阳离子交换剂。带阴离子基团的,如DEAE—(二乙基胺乙基)和QAE—(四级胺乙基)等为阴离子交换剂。离子交换层析只适用于能在水中
离子交换层析的洗脱相关信息介绍
已结合样品的离子交换前,可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱,也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全,往往需要逐步改变pH或离子强度,其中最简单的方法是阶段洗脱法,即分次将不同pH与离子强度的溶液加入,使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大,使许多洗
离子交换层析技术的应用介绍
离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。
离子交换层析洗脱时的要求介绍
①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不至于太拥挤。 ②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。 ③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。 洗脱馏份的分析按一定体积(