病毒载体的基本信息介绍
可供利用的病毒可分为逆转录病毒、慢病毒与腺病毒。 1.分为: 噬菌体载体、杆状病毒载体、动物病毒载体、植物病毒载体 2. 优点:转导效率高、复杂的装配过程由细胞完成、不同病毒载体具有不同表达特点 3.根据病毒载体在主细胞中的存在情况分为瞬时表达病毒载体和稳定表达病毒载体 3-1瞬时表达病毒载体包括: 乳多空病毒载体、腺病毒载体、疱疹病毒载体、痘病毒载体、RNA病毒载体 3-2稳定表达病毒载体包括:牛乳头瘤病毒载体和EB病毒载体、逆转录病毒载体、腺联病毒载体(AAV)载体。......阅读全文
腺病毒载体的分类
第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所
LITMUS39载体载体载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS39载体载体基本信息载体名称LITMUS39载体抗性Ampicillin载体长度2817 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number5'引物M13
腺病毒载体综述
腺病毒的一般特性 腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。腺病毒基因组是一个线性的双链D
病毒包装技术——病毒与非病毒载体
基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,一般实验方向
病毒包装技术——腺病毒载体的制备
1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄
关于慢病毒载体的包膜蛋白介绍
采用表达水疱性口炎病毒(VSV)糖蛋白G的质粒和双嗜性小鼠白血病病毒(MLV)包膜蛋白Env的质粒,分别取代表达HIV本身包膜蛋白Env的质粒,使HIV-1载体颗粒包上了VSV或双嗜性MLV的 包膜。这样做的结果至少具有三个方面的积极意义: ①包膜的更换进一步降低了慢病毒载体恢复成野生型病毒的
病毒包装技术3——慢病毒载体构建及包装流程介绍
1 菌液的准备 1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。 1.2. 将单
腺病毒的基本信息介绍
腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈20面体 [2] 排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含4.7kb,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103D
亚病毒的基本信息介绍
亚病毒(subviruses)是一类比病毒更为简单,仅具有某种核酸不具有蛋白质,或仅具有蛋白质而不具有核酸,不具有完整的病毒结构的一类微生物,主要包括类病毒、拟病毒和朊病毒。近年来,朊病毒已被证实能引起人和动物的传染性海绵状脑病( transmissible spongi-form enceph
关于病毒的基本信息介绍
病毒是病原微生物中最小的一种,在细胞内繁殖,其核心是核糖核酸(RNA)或脱氧核糖核酸(DNA),外壳是蛋白质,不具有细胞结构。 病毒寄生于宿主细胞内,依赖宿主细胞代谢系统进行增殖复制。 病毒复制过程如下: ①病毒识别并吸附到宿主细胞的表面; ②通过宿主细胞膜穿入易感细胞; ③脱壳;
腺相关病毒的载体特点
安全性好对肌肉、肝脏、神经组织等感染效率高载体自身免疫原性低长期表达比较稳定,易于保存和运输缺点:容量较小
腺相关病毒载体的简介
腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染
腺病毒载体综述2
其他疗法 随着高龄人口的增加,对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒,因其可以感染有丝分裂后的细胞,同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区(immunologically privileged site)中的低病原性,因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。
关于逆转录病毒载体的优点介绍
(1)逆转录病毒结构基因gag、env和pol的缺失不影响其他部分的活性; (2)包装好的假病毒颗粒易于分离制备; (3)逆转录病毒携带的遗传物质高效地进入靶细胞; (4)前病毒通过LTR高效整合至靶细胞基因组中,有利于外源基因在靶细胞中的永久表达。
关于生物病毒的基本信息介绍
病毒(Biological virus)是一种个体微小,结构简单,只含一种核酸(DNA或RNA),必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。 病毒是一种非细胞生命形态,它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成,病毒没有自己的代谢机构,没有酶系统。因此病毒离开了宿主细胞,就成了没有任何生命活动、
EB病毒抗体的基本信息介绍
EB病毒抗体它广泛存在于人群中,血清学、流行病学及分子生物学的研究表明EBV与人类的多种疾病密切相关,包括传染性单核细胞增多症、部分类型的淋巴瘤、鼻咽癌等疾病,具有嗜B淋巴细胞特性,能够在B淋巴细胞中建立起隐性感染。在感染过程中形成的特异抗原可以分为病毒衣壳抗原(VCA)、早期抗原(EA)、膜抗
细小病毒的基本信息介绍
细小病毒是一种无囊膜,单链,DNA病毒。可通过较小的抗原转移与自然突变而感染犬科动物。 犬细小病(CPV)毒病是由犬细小病毒感染幼犬所引起的一种急性传染病。临床上有两种表现型,出血性特征;心肌炎型则以突然死亡为特征。无论哪种类型的临床表现,均以发病率高、死亡率高和传染性强为特点。
慢病毒脑炎的基本信息介绍
新的人类海绵状脑病变异型的发现再次引起了国际医学界的极大重视。近年来发现其致病与朊蛋白(prion protein,PrP)有关,因此又将这一组疾病命名为朊蛋白病(prion病)。它是一种人畜共患、中枢神经系统慢性非炎症性致死性疾病。这组疾病具有潜伏期长,临床表现多种多样,致死率非常高等特点。
关于诺瓦克病毒的基本信息介绍
诺如病毒,又称诺瓦克病毒(Norwalk Viruses, NV [1] )是人类杯状病毒科(Human Calicivirus, HuCV)中诺如病毒(Norovirus, NV)属的一种病毒。是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒。 诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生
关于慢病毒的基本信息介绍
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
关于SARS病毒的基本信息介绍
SARS病毒属于套式病毒目、冠状病毒科、冠状病毒属,为β属B亚群冠状病毒。 [1] 病毒粒子多呈圆形,有囊膜,外周有冠状排列的纤突,分布于细胞浆中,呈圆形,病毒直径在80~120nm之间。 在广州地区和北京地区的尸解肺组织标本感染的Vero-E6细胞中均查见大量的病毒颗粒,多呈圆形,直径在80
关于HBV病毒的基本信息介绍
核心颗粒直径28纳米,呈二十面体立体对称,它的表面才是病毒真正的衣壳,由乙肝病毒的核心抗原(HBcAg)组成。通过强去垢剂或者酶处理的方法,还可以暴露出HBV的另一个主要的抗原e抗原,它的本质还不是十分清楚,但多数人认为是核心的断片。 Dane颗粒的中心部位就是环状并且有缺口的DNA双链,和依附
关于汉坦病毒的基本信息介绍
汉坦病毒归属布尼亚病毒科,是一种有包膜分节段的负链RNA病毒,基因组包括L、M、S 3个片段,分别编码L聚合酶蛋白、G1和G2糖蛋白、核蛋白。 汉坦病毒肾综合征出血热(HFRS)由汉坦病毒引起的一种自然疫源性疾病,是严重危害我国人民健康的病毒性疾病之一,为《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙
关于B病毒的基本信息介绍
Sabin等(1934)首次从被外观正常的恒河猴咬伤手指的B医生的脑和脾脏内分离出一种病毒。Sabin等称之为B病毒,又叫猴疱疹病毒(Herpesvirus simiae,HS)。B病毒同人的单纯疱疹病毒相近,它可使恒河猴引起呈良性经过的疱疹样口炎,于7~14天内自愈,可使人类产生致死性的脑炎或
关于拟病毒的基本信息介绍
拟病毒( virusoids)又称类病毒(viroid -like)或壳内类病毒,是指一类包裹在真病毒粒子中的缺陷类病毒。拟病毒极其微小,一般仅由裸露的RNA(300~ 400个核苷酸)所组成。拟病毒是一种环状单链RNA。它的寄生对象是病毒,被寄生的病毒称为辅助病毒(help-er virus
关于朊病毒的基本信息介绍
美国学者S.B.Prusiner因发现了羊瘙痒病致病因子——朊病毒(1982年)而获得了1997年的诺贝尔生理和医学奖。朊病毒( prion)又称蛋白侵染因子(proteinaceous infectiousagents),是一种比病毒小、仅含有疏水的具有侵染性的蛋白质分子。 纯化的感染因子称
关于类病毒的基本信息介绍
20世纪70年代初期,美国学者T.O.Diener团队在研究马铃薯纺锤块茎病病原时,观察到病原无病毒颗粒和抗原性,具有对酚等有机溶剂不敏感,耐热(70-75℃),对高速离心稳定(说明其分子质量小),对RNA酶敏感等特点。所有这些特点表明病原并不是病毒,而是一种游离的小分子RNA,从而提出了一个新
朊病毒蛋白的基本信息介绍
朊病毒蛋白(prion protein,PrP)是人和动物正常细胞基因的编码产物。朊病毒蛋白有两种构象:细胞型(正常型PrPc)和瘙痒型(致病型PrPSc)。两者的主要区别在于空间构象上的差异,PrPc是正常细胞的一种糖蛋白,仅存在α螺旋,而PrPSc有多个β折叠存在,溶解度低,且对蛋白酶表现抗
关于HIV病毒的基本信息介绍
人类免疫缺陷病毒又称艾滋病病毒,艾滋病(AcquiredImmune Deficiency Syndrome,AIDS)是人类免疫缺陷病毒感染的最后阶段 [1] 。进入艾滋病期,艾滋病病毒感染会引起各种机会性感染和肿瘤的发生,这些并发症会对人的健康生活带来影响,甚至可能会威胁生命,因此艾滋病病毒
质粒载体的载体大小的介绍
大的质粒(大于15kb)不会很好转化而且DNA产量通常很低。在设计实验时要考虑到加入插入片段的最终载体大小,尽量用更小的载体。 兼容性 当多于一个质粒载体必须同时存在于同一个细菌细胞中,这两个质粒的复制子必须是兼容的。当他们不能稳定地共存时,则认为这两个质粒是不兼容的。 选择/检测插入片段