WB一抗用什么稀释
建议起始浓度1:200开始（当然你也可以1:100，如果你的背景不高的话），倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下，可以溶解最多多少物质。 有机溶剂主要用于干洗（例如四氯乙烯）。作涂料稀释剂（例如甲苯、香蕉水、松香水、松节油），作洗甲水或去除胶水（例如丙酮，醋酸甲酯，醋酸乙酯），除锈（例如己烷），作洗洁精（柠檬精），用于香水（酒精）跟用于化学合成。溶剂：溶剂是一种可以溶解固体，液体或气体溶质的液体，继而成为溶液。在日常生活中最普遍的溶剂是水。而所谓有机溶剂即是包含碳原子的有机化合物溶剂。溶剂通常拥有比较低的沸点和容易挥发。或是可以由蒸馏来去除，从而留下被溶物。因此，溶剂不可以对溶质产生化学反应。它们必须为低活性的。溶剂可从混合物萃取可溶化合物，最普遍的例子......阅读全文
WB一抗用什么稀释
建议起始浓度1:200开始（当然你也可以1:100，如果你的背景不高的话），倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下，可以溶解
WB一抗用什么稀释
建议起始浓度1:200开始（当然你也可以1:100，如果你的背景不高的话），倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下，可以溶解
做wb时，一抗和二抗浓度是怎么确定的
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态
做wb时，一抗和二抗浓度是怎么确定的
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态
wb二抗怎么融化
wb 二抗融化，wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA （千分之一的TBST的溶液 )配置，可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合，这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。
wb二抗室温几小时
二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。
wb二抗室温几小时
二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或
做WB时羊抗鼠二抗的稀释比例一般是多少
【1】抗体的说明上，都给出了一个范围，可以以这个范围为根据摸索。开始的时候可以把膜剪成几小块，每一块用不同的一抗二抗浓度，这样就可以比较快的摸出适宜的浓度。有些时候也有一定的经验的：我用的是SANTA CRUZ的抗体，一抗建议的稀释比是1：200－1000，我用的是1：400效果挺好的。周围的人用的
做WB时羊抗鼠二抗的稀释比例一般是多少
【1】抗体的说明上，都给出了一个范围，可以以这个范围为根据摸索。开始的时候可以把膜剪成几小块，每一块用不同的一抗二抗浓度，这样就可以比较快的摸出适宜的浓度。有些时候也有一定的经验的：我用的是SANTA CRUZ的抗体，一抗建议的稀释比是1：200－1000，我用的是1：400效果挺好的。周围的人用的
WB检测中二抗的选择方法
WB检测之二抗 二抗选择 二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体，选择范围较窄，基本是商品化的，在不考虑二抗修饰类型的前提下，二抗的选择需要遵循以下原则：二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X，选择了鼠抗X一抗，则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二
WB检测中二抗的选择方法
WB检测之二抗二抗选择二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体，选择范围较窄，基本是商品化的，在不考虑二抗修饰类型的前提下，二抗的选择需要遵循以下原则：二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X，选择了鼠抗X一抗，则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗选择要考虑的问
WB中为什么封闭还有一抗孵育过夜时都要在四度冰箱
一抗在4度下最好放保存
一抗、二抗如何保存
工作液根据需要稀释在5%奶粉里，再加入少量叠氮化钠（大约0.01% w/v），4度保存。Alisa_lin(站内联系TA)分装，-20度保存。不要反复冻融，没有用过粉末的二抗，按说明书呗石头2011(站内联系TA)液体的一抗没加甘油的话尽量不要放在负二十，因为用的时候反复冻融不好。粉末状的二抗负二十
WB前一定要做蛋白浓度测定吗
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度； 二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的
wb电泳为什么不在一条线上
wb电泳不在一条线上的原因：1、样本本身含有高盐。2、积层胶长度不足，一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。3、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣，如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液，反之用3次就丢弃。4、上样量有关。5、电压不要太
一抗/二抗该选谁？
我们在生活中经常会面临做选择这样的一个难题，其实做选择本身并不是多么困难的事情，关键在于您是否了解自己内心真正需要的是什么。就好比我们的实验者在选择产品的品牌、质量、规格等，根据这些信息再去做相关的判断。比如zui简单的一个例子，不少的伙伴都对一抗、二抗的选择方面甚是苦恼，那如何选择呢，技术教
怎样稀释一抗和二抗
一抗的确比二抗贵，我们实验室1：500~1：1000稀释一抗体都可以，杂交袋尽量小，一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。 5%脱脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。 5%脱脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或
WB显影要多久
每个显影试剂盒都不一样，建议看说明书。实际情况视荧光强度而定，你看显出一点儿样子了，就赶紧捞出来，不然片子就太黑了。在加荧光剂后，反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移动膜，否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜，小心，铺展。将准备好的胶片放在膜上，放上去后也不要再移动了。然后压片。可
WB实验小问答
WB又称免疫印记法.是将生物大分子物质通过不同途径转移到固相载体的过程。其灵敏，可达ng级，用Ecl显色法理论上可达pg 级。方便，特异性高。今天给大家分析的是western blot实验中那些常见的问题，这份干货内容，请收好啦！ western blot 常见问题有那些？ 1.为什
WB实验问题总结
答：原因有很多：a) 你的细胞中不表达这种蛋白质，换一种细胞；b) 你的细胞中的蛋白质被降解掉了，你必需加入PMSF，抑制蛋白酶活性；c) 你的抗体不能识别目标蛋白，多看看说明，看是否有问题。答：a) 有沉淀可能因为你的蛋白没有变性完全，可以适当提高SDS 浓度，同时将样品煮沸时间延长；b) 也不排
WB操作规程
一、设备和试剂1．设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PRO
WB显影要多久
每个显影试剂盒都不一样，建议看说明书。实际情况视荧光强度而定，你看显出一点儿样子了，就赶紧捞出来，不然片子就太黑了。在加荧光剂后，反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移动膜，否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜，小心，铺展。将准备好的胶片放在膜上，放上去后也不要再移动了。然后压片。可
一抗的选择
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素： 分析试验应用的类型l 样本蛋白的结构性质l 样本的种属l 抗体宿主的种类l 抗体的标记和检测l1.分析试验应用的类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于W
ELISA如何选一抗与二抗
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般
一抗和二抗用什么稀释
一抗的确比二抗贵，我们实验室1：500~1：1000稀释一抗体都可以，杂交袋尽量小，一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以
WB电泳浓缩胶没压成一条线
第一、样本本身含有高盐。第二、积层胶长度不足，一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。第三、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣，如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液，反之用3次就丢弃吧！第四、上样量有关。dxylark已经叙述。第五、电
为什么一抗可以回收二抗不能
因为一抗我们是用BSA加叠氮钠稀释的，要回收，一般只要不长细菌就一直用，但是中间要补一些抗体，不然太稀了曝不出来，二抗是用脱脂奶粉稀释的，不回收。
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式：10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体（例如NC膜）上，通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同，只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易，转移效率高；而后者适用于大胶的蛋白