皮肤成纤维细胞和THP1细胞如何传代

养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长,所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底,也就是细胞与细胞之间没有间隙时,就可以传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液,用D-Hanks液洗 两遍,再加入0.25%的胰酶,加入的量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底,然后静置两分钟左右,最好是能在显微镜下观察,当细胞之 间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可。吸去胰酶,加入含血清培养液,摇晃瓶子使培养液覆盖瓶底就行了。因为血清可以终止胰酶的消化。然后吹打瓶底各处 使细胞脱落。再分瓶补加培养液。THP-1细胞的传代就比较简单了。可以有两种传代方法。如果镜下观察细胞状态很好,没有其它杂质即细胞裂解物之类的,就可以采用直接传代法。传代 前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉。吸弃上层少量培养液约三分之一,将余下......阅读全文

细胞癌变与细胞凋亡

只有可以分裂增殖的细胞才有细胞周期所以说细胞凋亡谈不上什么周期癌细胞的细胞周期不比正常细胞的短,但是它分裂增殖的比正常细胞快

细胞疗法的细胞分类

   【DC细胞】  即树突状细胞,发现于1973年。它是机体中功能最强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原。DC细胞与肿瘤的发生、发展有着密切关系,是激活机体免疫系统、激发抵御癌症侵袭最有效的途径之一。通过大量体外活化培养负载肿瘤抗原的DC细胞,在细胞数量达到规模化后回输给病人,

干细胞污染常见细胞

   细胞污染是一件非常令人头痛的事情,很多同学平时实验过程中只知道细胞污染了但是并不知道到底是什么污染了细胞,当然处理方法也只有丢掉了,可怕的是有的时候丢掉细胞并不是一种完全的方法,只有清楚的了解污染的种类才能有的放矢的解决污染问题,下面小编就和大家分享一下常见的细胞污染。  1、细菌:细菌在普通

细胞疗法的细胞分类

【DC细胞】  即树突状细胞,发现于1973年。它是机体中功能最强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原。DC细胞与肿瘤的发生、发展有着密切关系,是激活机体免疫系统、激发抵御癌症侵袭最有效的途径之一。通过大量体外活化培养负载肿瘤抗原的DC细胞,在细胞数量达到规模化后回输给病人,可诱导

血细胞分析红细胞

  红细胞也称红血球,在常规化验英文常缩写成RBC,是血液中数量最多的一种血细胞,同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介,同时还具有免疫功能。成熟的红细胞是无核的,这意味着它们失去了DNA。红细胞也没有线粒体,它们通过葡萄糖合成能量。  形状呈双凹圆盘状,中央较薄。周缘较厚,故在血涂片标

血细胞分析白细胞

  白细胞有五种,按照体积从小到大是:淋巴细胞(人体自身产生的抗体),嗜碱粒细胞,中性粒细胞,单核细胞和嗜酸细胞。  白细胞计数增多见于急性感染、尿毒症、严重烧伤急性出血、组织损伤、大手术后白血病等。  白细胞计数减少见于伤寒及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血急性粒细胞缺乏症、脾功能亢进,X线放射性核素

Treg细胞是什么细胞

调节性T细胞(Regulatory cells,简称Tregs )是一类控制体内自身免疫反应性的T细胞亚群,早期亦称做suppressor T cells。调节性T细胞可分为天然产生的自然调节性T细胞(n T-regs)和诱导产生的适应性调节性T细胞(a T-regs或i T-regs),如Th3、

免疫细胞:抗原递呈细胞

  1.抗原递呈细胞的概念  在机体的免疫应答过程中,能摄取、加工、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞的辅佐细胞,称为 抗原提呈细胞(APC)。  2.抗原递呈细胞的种类  抗原提呈细胞分专职性递呈细胞和非专职性递呈细胞两类。单核/巨噬细胞、树突状细胞(DC)和B淋巴细胞等能表达MHC Ⅱ类分子的

ctl细胞是什么细胞

CTL(CytotoxicTLymphocyte,Tc细胞)是细胞毒性T淋巴细胞,也称杀伤性T细胞,是在效应阶段的效应T细胞。它能特异性杀伤带抗原的靶细胞,如移植细胞、肿瘤细胞及受微生物感染的细胞等。Tc细胞的杀伤力较强,可反复杀伤靶细胞,而且在杀伤靶细胞的过程中本身不受损伤。

小鼠纤维肉瘤细胞-WEHI-164细胞

小鼠纤维肉瘤细胞 WEHI 164细胞  在艾滋病(AIDS)面前,啮齿动物似乎比人类更为强大。大鼠和小鼠对人体免疫缺损病毒(HIV)具有天生的抵抗能力——这一情况也导致研究人员寻找一种AIDS小型动物模型的夙愿一直无法实现。然而科学家zui近发现,一种经过基因改造的小鼠很容易感染HIV,这就为AI

曹雪涛课题组:m6A介导的细胞代谢重编程抑制病毒感染

  病毒感染可以调节宿主细胞的代谢,从而影响病毒的存活或清除。RNA修饰,特别是最为常见的哺乳动物mRNA修饰---N6-甲基腺苷(m6A)---能够调节基因表达和病毒感染。比如,m6A甲基转移酶复合物组分METTL3/14限制寨卡病毒产生,而m6A去甲基酶ALKBH5和FTO增强这种病毒的产生。在

STAP细胞丑闻:STAP细胞或为胚胎干细胞

今年4月,调查委员会宣布STAP细胞丑闻初步结论。  虽然一个长时间运行的干细胞研究惨败,但日本理化学研究所(RIKEN)另一个调查委员会近日在东京发布了新报告。报告称,所谓的刺激触发采集功能(STAP)干细胞以及可能衍生自这些细胞的嵌合体小鼠和畸胎瘤,“都来源于受污染的(胚胎干)细胞培养,这个真相

什么是浆细胞?浆细胞是B细胞吗?

  浆细胞又称效应B细胞。浆细胞大多见于消化管和呼吸道固有膜的结缔组织内。细胞较小,圆形或卵圆形,核圆但偏于细胞一侧,染色质粗,沿核膜呈辐射状排列成车轮状。细胞质呈嗜碱性,染为蓝色。在靠近核处,有一着色浅的区域。近细胞核处有一色较浅而透明的区域。电镜下可见细胞质内含大量密集的粗面内质网,浅染区是高尔

细胞株、细胞系、原代细胞的概念

细胞株(cell strain)是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞系(cell line)是原代细胞经首次传代成功后即为

细胞组分和细胞器——细胞器分离

Labeling Microtubules (Molecular Dynamics Inc.  )Microtubules are involved in many aspects of cell motion including propulsion, mitosis, growth, and o

什么是原代细胞、细胞株、细胞系?

原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进

细胞毒性T细胞杀伤靶细胞的过程

  CTL杀伤靶细胞是一个连续过程,可分为三个阶段,主要研究内容如下:  1、效应靶细胞结合:CTL是通过其膜上的受体TCR,即Ti-CD3分子与靶细胞结合,此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ,又称细胞内粘附分子相互作用,即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低,为非特异性的,但可

细胞凋亡、细胞坏死和细胞焦亡如何鉴别?

细胞凋亡的检测方法有很多,下面给大家介绍常用的形态学检测方法。光学显微镜和倒置显微镜凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE染色的组织切片中细胞体积缩小,胞质致密、嗜酸性染色增强,并可形成凋亡小体。在组织中凋亡细胞常以分散单个形式存在,凋亡细胞与周围细胞分离,不引起炎症

Th细胞和Tc细胞到底是什么细胞

(1)Th细胞全称辅助性T细胞(外文名helper T cell),能分泌多种细胞因子。Th均表达CD4,通常所称的CD4+T细胞即指Th。HIV能特异性地破坏Th细胞,导致患者免疫系统瘫痪。(2)Tc 亦称杀伤T细胞(killer T cell,TK),具有杀伤靶细胞活性的T细胞亚群。其表面标志为

常用细胞的中英文名对照表

一、遗传变异细胞和正常细胞1.小鼠类3T3 胚胎成纤维细胞 L929 成纤维细胞 3T3/e 成纤维细胞 Mo-MuLV/3T3 Mo-MuLV感染的3T3 3T3TK 成纤维细胞 NIH3T3 NIH Swiss小鼠胚细胞 3T6 胚胎成纤维细胞 *PA317 胚胎成纤维细胞 Ana-1 巨噬细胞

流式细胞仪实验方法(三)

四、所需试剂1、细胞表面染色的荧光标记的单抗试剂依据实验需要选择特殊表面标志CD45圈定所有淋巴细胞CD3 圈定T淋巴细胞CD4 圈定T辅助淋巴细胞亚群CD8 圈定T抑制淋巴细胞亚群CD19/或CD20圈定B淋巴细胞CD56圈定NK淋巴细胞CD14圈定单核细胞2、荧光标记的细胞因子抗体:R&D提供F

母乳寡糖调节新生儿肠道粘膜免疫系统发育的生理机制

  母乳作为婴幼儿的天然食品,含有大量的营养物质,能够促进新生儿大脑、肠道和免疫系统的快速发育。母乳寡糖(HMOs)是牛奶中含量第三高的活性成分,已经发现并表征了200多种单独的寡糖,包括中性寡糖和酸性寡糖。初乳含有比成熟乳更多的活性寡糖。HMOs能够通过减少白细胞粘附和通过凝集素受体DC-SIGN

细胞诊断、肿瘤细胞分类要诀

细胞诊断要诀 镜下观察要周到,每个视野不漏掉; 看完背景看细胞,低倍高倍仔细瞧; 先看形态和大小,核浆比例有多少; 核的结构最重要,核质又多又粗糙; 核膜核仁均异常,病理分裂偶见到; 单个细胞不能断,足量细胞方有效; 只有成堆无分散,重复检查再报告。

设计“杀手细胞”消灭癌细胞

  最近,康奈尔大学的生物医学工程师,开发出一种专门的白细胞——被称为“超级自然杀伤细胞”,能够在淋巴结中找到癌细胞,并只有一个目的:摧毁它们。这一突破可停止癌症转移的发生,相关研究结果发表在本月的《Biomaterials》。本文资深作者、生物医学工程教授Michael R. King说:“我们希

人工原始细胞探索真实细胞

    人工原始细胞有一层蛋白质皮肤(蓝色),内涵独立的液滴(黄色),其功能类似于细胞器。图片来源:中科院化学研究所乔燕  中国科学院化学研究所研究员乔燕、北京化工大学教授林艺扬与合作者人工设计了一款原始细胞,这种由蛋白质构成的囊中,填充着类似于细胞子结构的微小液滴,与活细胞类似,可对环境的变化做出

巨噬细胞和单核白细胞

·         Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab)Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from antico

按细胞比重分离B细胞

按细胞比重分离B细胞1.将2~3ml含3×107纯化的B细胞(B细胞>90%)的细胞悬液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平离心1000×g 20分钟。2.吸去无细胞上清液,交界面的低密度B细胞和大部分Percoll溶液。由于此时细胞沉淀非常松散,需留下约0.2ml Percol

细胞因子活化免疫细胞

  细胞因子肿瘤治疗中的另一种方法是通过体外与免疫细胞共育,以使这些细胞活化,然后再回输入患者体内,进行过继免疫细胞疗法。在这方面研究得最多的是淋巴细胞激活的杀伤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞。LAK是从肿瘤患者外周血中分离的单个核细胞,在体与IL-2共育,使之活化并增殖后,回输入病人体内,可抑制肿瘤生长。

自然杀伤细胞的细胞来源

NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴结和骨髓中也有NK

细胞技术专题:细胞传代实验

根据细胞生长的恃点,传代方法有3种:悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代