皮肤成纤维细胞和THP1细胞如何传代
养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长，所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底，也就是细胞与细胞之间没有间隙时，就可以传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液，用D-Hanks液洗 两遍，再加入0.25%的胰酶，加入的量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底，然后静置两分钟左右，最好是能在显微镜下观察，当细胞之 间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可。吸去胰酶，加入含血清培养液，摇晃瓶子使培养液覆盖瓶底就行了。因为血清可以终止胰酶的消化。然后吹打瓶底各处 使细胞脱落。再分瓶补加培养液。THP-1细胞的传代就比较简单了。可以有两种传代方法。如果镜下观察细胞状态很好，没有其它杂质即细胞裂解物之类的，就可以采用直接传代法。传代 前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉。吸弃上层少量培养液约三分之一，将余下......阅读全文
研究破解艾滋病毒入侵机体免疫第一防线谜团
近日，中科院昆明动物研究所张华堂研究组的郭彦等人研究发现，决定艾滋病1型病毒感染和致病能力的调控蛋白Nef，对广泛分布于黏膜下的树突状细胞有抑制作用。 据郭彦介绍，首批艾滋病患者自1981年发现以来，历经30多年的研究。但是，艾滋病1型病毒(HIV-1)导致免疫缺陷的细胞和分子机理，特别是
益母草碱抗动脉粥样硬化新机制获揭示
南方医科大学第五附属医院全科医学科教授尹凯/副研究员朱肖团队研究揭示益母草碱抗动脉粥样硬化新机制。相关成果近日发表于《植物医学》（Phytomedicine）。动脉粥样硬化作为一种炎症反应启动的脂质沉积性疾病，是多种心脑血管疾病的共同病理基础。益母草碱，一种源自益母草的天然生物碱，对心血管具有保护作
益母草碱抗动脉粥样硬化新机制获揭示
南方医科大学第五附属医院全科医学科教授尹凯/副研究员朱肖团队研究揭示益母草碱抗动脉粥样硬化新机制。相关成果近日发表于《植物医学》（Phytomedicine）。动脉粥样硬化作为一种炎症反应启动的脂质沉积性疾病，是多种心脑血管疾病的共同病理基础。益母草碱，一种源自益母草的天然生物碱，对心血管具有保护作
昆明动物所在HIV1调控蛋白Nef的研究中取得进展
自1981年发现首批AIDS患者以来，虽然历经了30多年的研究，在HIV-1导致免疫缺陷的细胞和分子机理中，仍有诸多的关键问题有待明晰。其中，能够决定HIV-1感染和致病能力的调控蛋白Nef对树突状细胞(dendritic cells, DC)功能的影响，一直是一个有争议和悬而未解的基本问题
这个研究团队发现2′3′cGAMP新的结合蛋白
近日，中国科学院上海有机化学研究所蒋洪课题组在Cell Chemical Biology杂志上在线发表题为“A Photoaffinity Labeling Strategy Identified EF1A1 as a Binding Protein of Cyclic Dinucleotide
新进展！郑大发现空气污染PM2.5诱导肺纤维化的形成机制
生活在大气细颗粒物（PM2.5）含量较高地区的人们，患缺血性心脏病、中风、肺纤维化和肺癌等疾病的风险明显较高，2017年中国因空气污染导致的死亡人数接近100万。因此，澄清空气污染引起肺纤维化的机制对于防治肺纤维化及肺癌具有重要的意义。 2021年5月15日，郑州大学附属郑州中心医院曹巍及夏天
细胞冻存中的常见问题解答
我们都知道，细胞如果要长期保存，需要冻存起来放液氮保存。那怎么样冻存细胞才能保证细胞能正常复苏，不至于冻存死亡呢？下面我们就来讲讲细胞冻存应该注意的一些地方。1. 保持冻存前细胞状态良好冻存前一定要保证细胞状态良好，细胞处于对数生长期，否则不管后面怎么处理，冻存后的细胞状态必然有影响。若细胞密度偏高
ELISA试剂盒的选择方法（三）
第三步：检测什么样本？试验周期多长？ 如需要检测的是尿液，柠檬酸盐血浆样本，需在订购前仔细查看ELISA试剂盒说明书中的验证样本。简单的说，如果ELISA试剂盒是没有用过试剂盒检测尿样，柠檬酸盐血浆，使用该试剂盒检测尿样会存在极大的风险；而且很多ELISA试剂盒中还会特别说明“不能检测柠檬酸盐血浆”
《自然—遗传学》：科学家搭建基因“鸟巢”
新技术有望加速拆解基因间相互作用 根据一项新技术绘制的有关基因相互作用及其如何影响细胞成熟的复杂图谱。 从指引干细胞的命运到决定我们能长多高，人们体内的基因作用于一个非常复杂的网络。而拆解这些相互作用则是一项艰苦而繁重的工作。如今，一个国际合作计划开发出的一种更为有效的综合处理方
上海巴斯德所等发现手足口病毒免疫调控新机制
6月24日，国际学术期刊Cell Reports 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所孟广勋课题组和中国医学科学院病原生物学研究所王健伟课题组合作的最新科研成果“Reciprocal Regulation between Enterovirus 71 and the NLRP3 Inflamma
NALP3炎性体与非感染性炎症疾病及其通路研究工具（一）
一、NALP3炎性体的结构和分布 NALP3炎性体是一类分子量约为700kDa的大分子蛋白复合体，由核苷酸结合寡聚化结构域样受体（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors，NLRs）家族成员NALP3、衔接蛋白ASC（a
PNAS：天然免疫受体阻断剂研发进展
TLR是一类I型的跨膜蛋白，可以特异性识别微生物特异性的抗原物质（PAMPs）。TLR-2与TLR-6或TLR-1聚合形成异源二聚体可以分别识别二酰脂多肽或三酰脂多肽。当配体物质与聚合后的TLR1/2以及TLR2/6结合后，会招募下游的接合蛋白MyD88。TLR-2信号的缺陷会导致许多免疫疾病（
peprotech细胞因子注意事项（三）
五、细胞培养和刺激的基本方法细胞活化的最终结果是产生细胞因子，根据检测指标和标本的不同，研究人员需要选择不同的刺激剂和刺激时间，以获得最佳的实验结果。下表提供了检测一些常用细胞因子的推荐的活化方法。表1、细胞内细胞因子流式检测推荐的阳性对照活化方法检测细胞因子阳性对照刺激方法人IFN-g方法2 (4
细胞，大鼠胰岛细胞瘤细胞
INS-1细胞大鼠胰岛细胞瘤细胞1） 来源：传秋生物细胞库2） 形态：贴壁 多角形3） 含量：>1x106 个/mL4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装6） 运输：顺丰发货培养条件：培养基：RPMI1640+10%FBS+0.05mM 2-巯D基D乙
胞外RNA实现跨物种转移exRNA（二）
02 胞外miRNA进入外泌体的方式对miRNA进行包装并非是随机发生的，而是特定类型的miRNA可能会被优先分配到微泡中。有研究发现，血液细胞和单核淋巴瘤细胞THP1能够主动地、选择性地将miRNA包装到微泡中，响应各种不同的刺激将其分泌到机体循环中。神经酰胺依赖性分泌机制可以诱导核内体转移至胞外
贺福初院士Cell－Res解析细胞增殖调控
来自北京蛋白质组研究中心研究人员在新研究中证实，CKIP-1通过抑制TRAF6介导的Akt激活调控了巨噬细胞增殖。 国际著名细胞生物学家、遗传学家贺福初（Fuchu He）院士和北京蛋白质组研究中心的张令强（Lingqiang Zhang）教授是这篇论文的共同通讯作者。贺福初院士主要从事基因组
贺福初院士Cell－Res解析细胞增殖调控
来自北京蛋白质组研究中心研究人员在新研究中证实，CKIP-1通过抑制TRAF6介导的Akt激活调控了巨噬细胞增殖。 国际著名细胞生物学家、遗传学家贺福初（Fuchu He）院士和北京蛋白质组研究中心的张令强（Lingqiang Zhang）教授是这篇论文的共同通讯作者。贺福初院士主要从事基因组
细胞免疫细胞免疫
几乎所有的细胞表面都有MHC-I,CD8+T细胞能识别细胞表面的MHCI+抗原复合物，识别后进行攻击。 根据功能不同T细胞可分为三类，其表面均有相应的受体，具有抗原特异性：细胞毒性T细胞（Cytotoxic T cells，Tc）、辅助性T细胞(helper T cells,TH）、抑制性T细
自然杀伤细胞NK细胞的细胞功能
自然杀伤活性由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富，含有较大的嗜天青颗粒，颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞（包括部分细胞系）、病毒
细胞毒性T细胞的细胞试验
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞（CTL）测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递，以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞，这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠，也用于大型动物模型，但标准的临床
自然杀伤细胞NK细胞的细胞表型
与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-，部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体β链 （P75,CD122），CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一种稳定表达在
流式细胞术在免疫学中的应用
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是二十世纪70年代发展起来的，是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术，能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选，且能保持细胞及细胞器或微粒
细胞组分和细胞器——细胞膜
Isoelectric Focussing of Membrane Protein by Slab Gel Method (Hancock Lab) Isolation of Outer Membrane Protein from P.Aeruginosa with Octyl-Poe (Hanc
细胞组分和细胞器——细胞骨架
Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton (Mitchison Lab) Recycling Tubulin (Mitchison Lab) Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi
稀有细胞和少量细胞的单细胞分离
对于单细胞转录组学，单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言，高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具，但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外，细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路，从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失，就往往需要用到大量的
细胞培养——细胞生长和细胞毒性
Articles posted in the Method Froum Cell Viability AssayDye exclusion method Viable Cell Counts Using Trypan Blue (Gibco) Soft Agar Assay For Colo
《细胞—干细胞》推出“神经干细胞”专题
最新一期《细胞—干细胞》（Cell Stem Cell）杂志推出了神经干细胞专题“Neural Stem Cells”。这一专题收集了神经干细胞研究方面的综述和最新进展文章，就这一领域的发展进行了探讨。 神经干细胞(neuralstemcell，NSCs)是一类具有分裂潜能和自更新能力的
稀有细胞和少量细胞的单细胞分离
对于单细胞转录组学，单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言，高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具，但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外，细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路，从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失，就往往需要用
血细胞分析红细胞
红细胞也称红血球，在常规化验英文常缩写成RBC，是血液中数量最多的一种血细胞，同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介，同时还具有免疫功能。成熟的红细胞是无核的，这意味着它们失去了DNA。红细胞也没有线粒体，它们通过葡萄糖合成能量。 形状呈双凹圆盘状，中央较薄。周缘较厚，故在血涂片标
细胞癌变与细胞凋亡
只有可以分裂增殖的细胞才有细胞周期所以说细胞凋亡谈不上什么周期癌细胞的细胞周期不比正常细胞的短，但是它分裂增殖的比正常细胞快