真菌dna做pcr条带总是很浅该怎么办
首先是样品DNA质量，你应测下样品DNA的OD值，在1.8-2.0为宜，纯度或pH不对也会使PCR效果不佳。然后测下浓度，我们这用50-300ng/ul,PCR上样1-2微升，DNA浓度过高反而会抑制PCR反应。另外，最好跑个电泳，看看DNA的完整性，如果完整性不行（即无一条大片段条带)，则在进行较大片段扩增时条带很弱。我们这使用北京德曼特尔的快速无毒植物DNA提取试剂盒来提取真菌DNA，可以满足以上条件且快速无毒。其次是PCR Mix方面，我们这使用15-20微的体系，不同的PCR酶效果也可能不同，从而导致PCR效果不佳，我们这选用北京康为世纪或北京全式金的PCR Mix，都效果挺好的。另外是引物方面，如果引物设计的特异性差，或者是合成的纯度不够，也会造成PCR产物模糊，我们是使用华大或金斯瑞合成的引物，大片段用PAGE方式纯化。另外应避免使用反复冻融或长期液态保存的引物。......阅读全文
PCR条带微弱原因及解决方法
CDNA：0.5微升primer：1微升dNTP：2微升10*buffer：2微升TAG酶：0.25微升D.W.：14.25微升PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+)1、预变性（Initialdenaturation）．模板DNA完全变
如何对pcr扩增电泳条带分析
PCR扩增后一般进行琼脂糖凝胶电泳分析，电泳后一般有以下几种条带： 1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有，一般不呈现为细带，为发散状；如果目的扩增产物带和引物带都很亮，可以考虑适当降低引物量。 2、引物二聚体带。比引物跑得慢一点，条带清晰，但如果扩增产物小于100bp时，产
PCR扩增电泳后为什么没有条带
那就是你没有扩增产物，要是连模本带都没有，可以考虑是不是放置太久分解了
pcr之后电泳条带特别淡，怎么优化
可以考虑克隆测序,这样不容易产生结合.cindybrella(站内联系TA):tiger28:帮顶!我也不懂~哎:tiger19:jiaxinfish(站内联系TA)b保险点的话还是做个TAclone再测序,如果不想做TA,就用2个PCR引物直接测序,总会成功一个的吧blackrose8089(站内
PCR电泳条带是什么，如何形成的
首先PCR电泳主要是琼脂糖凝胶电泳。电泳仪有正负极的，而DNA是带负电荷的。故而向正方向移动。然后，DNA里是有碱基的。碱基可以吸收紫外光。最重要的是有染色剂，常用的有溴化乙锭等等。一般在配制凝胶的时候会加进去，或者跑完电泳然后将凝胶浸在含有染色剂的溶液里，染色剂可以插入DNA链中。在可见光下是看不
PCR电泳条带是什么,如何形成的
首先PCR电泳主要是琼脂糖凝胶电泳.电泳仪有正负极的,而DNA是带负电荷的.故而向正方向移动.然后,DNA里是有碱基的.碱基可以吸收紫外光.最重要的是有染色剂,常用的有溴化乙锭等等.一般在配制凝胶的时候会加进去,或者跑完电泳然后将凝胶浸在含有染色剂的溶液里,染色剂可以插入DNA链中.在可见光下是看不
为什么pcr阴性总有条带出现
提高退火温度，或重新设计引物，或者是阴性对照被污染，当然还有其它好多小原因，要是还没解决，请细说并追问。
pcr－阴性对照出现条带，怎么办
这个是分子实验室常见问题，有人说是由于气溶胶引起的假阳性。首先要防止污染，其次要优化PCR体系及反应程序。
小知识：pcr电泳条带图的解读
PCR扩增后一般进行琼脂糖凝胶电泳分析，电泳后一般有以下几种条带： 1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有，一般不呈现为细带，为发散状；如果目的扩增产物带和引物带都很亮，可以考虑适当降低引物量。 2、引物二聚体带。比引物跑得慢一点，条带清晰，但如果扩增产物小于100bp时，产
怎么看PCR扩增电泳条带分析？
PCR扩增后一般进行琼脂糖凝胶电泳分析，电泳后一般有以下几种条带： 1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有，一般不呈现为细带，为发散状；如果目的扩增产物带和引物带都很亮，可以考虑适当降低引物量。 2、引物二聚体带。比引物跑得慢一点，条带清晰，但如果扩增产物小于100bp时，产
菌液PCR有目的条带的位置，但是质粒PCR后却没有
如果PCR系统没有问题，很可能是质粒和染色体发生了重组。建议提细菌的genomeDNA做一次PCR。如果是阳性，就说明是这样。另外，还可以另挑几个菌落，重新提质粒扩增。
聚合酶链式反应（PCR）PCR产物电泳条带分析
PCR扩增后一般进行琼脂糖凝胶电泳分析,电泳后一般有以下几种条带:1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有,一般不呈现为细带,为发散状;如果目的扩增产物带和引物带都很亮,可以考虑适当降低引物量。2、引物二聚体带。比引物跑得慢一点,条带清晰,但如果扩增产物小于100bp时,产物与引物二聚
PCR产物电泳条带为什么被“劈开”了
PCR产物电泳条带为什么被“劈开”了说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试（目前最好的免费引物设计）.如果还是不行,把序列发给我,我帮你设计（我有专业软件,ABI pr
PCR扩增后没有条带是怎么回事
PCR的反应条件与很多参数有关系。如模板浓度，引物长度及GC含量，引物浓度，dNTPs浓度，选用的taq enzyme,缓冲液的离子含量，产物大小，变性时间，退火温度及时间，延长的时间。物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩
在做PCR实验时为什么总是P不出条带
情况比较复杂，你得确认1.你的RNA没问题，没有被降解，cDNA合成没问题。可以用该材料的actin引物做PCR检测试试。2你P的基因如果是已知序列，那么设计引物应该很简单，如果是未知的，那么兼并引物没P出东西来是有可能的。若是根据已知序列设计的引物而没有P出产物那就是你PCR体系或者Tm有问题了，
逆转录PCR，扩增出的条带怎样区分
区分你的模板里面是否有基因组污染的方法：在做逆转录反应的同时，做一个阴性对照，其他所有都和实验组相同，除了不加入逆转录酶。得到RT-PCR产物后跑胶，如果该阴性对照里也扩增出来明显条带的话，你的模板就是有基因组污染，否则就是正常。
PCR扩增后没有条带是怎么回事
PCR的反应条件与很多参数有关系。如模板浓度，引物长度及GC含量，引物浓度，dNTPs浓度，选用的taq enzyme,缓冲液的离子含量，产物大小，变性时间，退火温度及时间，延长的时间。物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩
PCR扩增后没有条带是怎么回事
PCR的反应条件与很多参数有关系。如模板浓度，引物长度及GC含量，引物浓度，dNTPs浓度，选用的taq enzyme,缓冲液的离子含量，产物大小，变性时间，退火温度及时间，延长的时间。物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩
PCR仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅原因分析
*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系 *与反应起始时RNA的总量及纯度有关 *建议在试验中加入对照RNA *第一链的反应啊产物在进行PCR扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10 *建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物（GSP
合成的引物进行PCR反应时无目的条带
合成的引物进行PCR 反应时无目的条带，怎么办?PCR反应失败的原因很多，可以从以下几个方面考虑。1) 引物和模板是否配对，同源性有多大?2) 引物本身是否有立体结构.3) PCR反应用试剂是否能正常工作?4) PCR仪 是否工作正常?5) PCR反应条件是否合适?如果一切正常，还无法解决问题时，我
PCR纯化，跑胶没有出现条带，是什么原因
你要确定你PCR有没有扩增出条带，先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带，回收胶看不到的话，可能是你PCR的产物的量太少了，回收胶胶孔宽，PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的，明亮的，但是跑回收看不到，那么，跑胶用的TAE/TBE是不是1X的，你点胶的时候PCR
pcr反应后，非特异性条带怎么去除
1、提高退火温度2、换个特异性好的引物重新pcr
PCR纯化，跑胶没有出现条带，是什么原因
你要确定你PCR有没有扩增出条带，先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带，回收胶看不到的话，可能是你PCR的产物的量太少了，回收胶胶孔宽，PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的，明亮的，但是跑回收看不到，那么，1.跑胶用的TAE/TBE是不是1X的，你点胶的时候P
PCR纯化，跑胶没有出现条带，是什么原因
你要确定你PCR有没有扩增出条带，先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带，回收胶看不到的话，可能是你PCR的产物的量太少了，回收胶胶孔宽，PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的，明亮的，但是跑回收看不到，那么，跑胶用的TAE/TBE是不是1X的，你点胶的时候PCR
PCR扩出来的条带亮度很弱是什么原因
1. 模板的用量在你这种情况下应该和目的条带浓度关系不大——记得realtimePCR的原理图么，循环数够多时，目的片段的终浓度在不同模板量条件下相差不大；2.首先考虑扩增效率问题，可用touch down PCR，除开头几个循环外，后面的退火温度降低一些，可提高扩增效率；3.如果无效，建议使用两步
PCR反应假阴性，不出现扩增条带的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模 板核酸变性
PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡
你的MARKER是对的，说明胶的问题不是很大（但也可能是影响因素）。可能的原因是：（1）DNA不纯，里面蛋白质过多。 （2）梳子非常不干净，有杂质在点样孔里 （3）胶的浓度（过大或过小）不适合你的PCR产物
PCR实验结果出现多条条带,如何进行优化
出现多条条带表示PCR反应的特异性不高，可以进行如下优化尝试：1.适当提高PCR的退火温度。退火温度越高，DNA分子之间的配对越困难。这样可以减少引物与模板之间非特异性的结合。2.检查一下引物的Tm值和序列结构，如果引物Tm值过高，上下游引物Tm值相差太大，或者引物单链易形成高级结构，都不利于PCR
质粒PCR后电泳出现－很多条带－怎么回事
最常见的原因有：（1）引物特异性不好；（2）退火温度过低；（3）pcr体系有问题。
真菌dna做pcr条带总是很浅该怎么办
首先是样品DNA质量，你应测下样品DNA的OD值，在1.8-2.0为宜，纯度或pH不对也会使PCR效果不佳。然后测下浓度，我们这用50-300ng/ul,PCR上样1-2微升，DNA浓度过高反而会抑制PCR反应。另外，最好跑个电泳，看看DNA的完整性，如果完整性不行（即无一条大片段条带)，则在进行较