李博文等开发新型LNP载体，可高效mRNA递送及基因编辑
先天性肺部疾病，例如表面活性蛋白缺乏症、囊性纤维化、α-1抗胰蛋白酶缺乏症等等，会导致终身发病甚至是死亡。虽然这些疾病的遗传机制已经被深入研究，但仍然缺乏有效的治疗方案。最近，可吸入式mRNA递送平台备受制药业和学术界的关注。这种平台可以提供非侵入性、直接进入肺上皮细胞和肺泡的RNA药物，在应用于囊性纤维化、特发性肺纤维化、肺癌和肺部感染等多种肺部疾病治疗方面有巨大潜力。 以CRISPR-Cas9为代表的基因编辑工具，通过气管内递送到肺部细胞，是一种极具潜力的治疗先天性肺部疾病的方法。目前，已经使用腺相关病毒（AAV）在人体内进行了基因编辑治疗。 然而，AAV载体递送Cas9的DNA在体内的长期表达，虽然提高了成功编辑的效率，但也会导致脱靶编辑的积累。此外，AAV衣壳的免疫原性限制了其重复给药，更重要的是，AAV载体容量有限（不超过4.7kb），这导致其难以递送编辑效率更高的spCas9。 而AAV病毒载体面临的这些挑......阅读全文
什么是质粒载体？
质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的质粒。与天然质粒相比，质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因（如抗生素抗性基因）和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。
分子克隆常用载体
分子克隆常用载体 DNA片段的克隆需要合适的载体，载体或是质粒，或是噬菌体，或是病毒，通常大多经过人工改造[地的。作为载体必须具备两条件：一是该载体在细胞内必须能自主复制，即必须具备复制原点；二是该载体必须具备适合的酶切位点，且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条，保证了载体的可繁殖性和可利用
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明，一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型， 称为RNA干扰（RNA interference，RNAi）。siRNA（small interfering RNAs）就是这种短片断双链RNA分子，能够
药物载体的介绍
药物载体，是指能改变药物进入人体的方式和在体内的分布、控制药物的释放速度并将药物输送到靶向器官的体系。
什么是微载体？
是指直径在60-250μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。
质粒载体的分类
按复制形式分为严紧型和松弛型复制。根据质粒DNA复制与宿主之间的关系或在宿主细胞的拷贝数的多少，可以将质粒分为两种不同的复制类型：严紧型和松弛型。严紧型质粒复制受宿主染色体DNA复制的严格控制，拷贝数较小一般只有1~3个拷贝。疏松型质粒的复制宿主的控制比较松，在宿主中的拷贝数比较多，一般有10~20
什么是电子载体？
在的物质称为电子载体。参与传递的电子载体有四种(coenzyme Q)，在这四类电子载体中，除了辅酶Q以外，接受和提供电子的氧化还原中心都是与蛋白相连的辅基。在线粒体电子传递系统(呼吸链)内起接受和提供电子或氢(由质子和电子组成)的物质称为电子载体，它们分别是各种脱氢酶的辅酶，如NAD+，FMN，F
shRNA干扰载体构建
产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子：人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号，H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA，shRNA经过RISC剪切后形
shRNA干扰载体构建
产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子：人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号，H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA，shRNA经过RISC剪切后形
腺病毒载体综述
腺病毒的一般特性 腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体（Stewart et al., 1993）。其病毒壳体含有三种主要的蛋白：六邻体（II），五邻体基底（III）和纤突（IV），还有多种其他的辅助蛋白VI，VIII，IX，IIIa和Iva2（Fig. 1）。腺病毒基因组是一个线性的双链D
简述siRNA表达载体
多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶Ⅲ启动子（pol Ⅲ）中的一种，操纵一段小的发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol Ⅲ启动子是由于它可以在哺乳动物细胞
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是这种短片断双链RNA分子,能够
疫苗用mRNA递送系统性能的决定因素
mRNA递送系统性能的决定因素是多因素且相互作用的，包括：(1)它们递送到适当细胞并有效释放mRNA到细胞质翻译机制的效力或能力；(2)它们的佐剂性，可增强免疫应答；(3)将注射部位过度炎症或全身分布和脱靶表达可能引起的不良事件或毒性的任何作用降至最低。 1、剂量 目前SARS-CoV-2临床试
首次完成CRISPR体内编辑骨髓细胞
前沿 | 诺奖得主创建公司再获突破： Intellia Therapeutics是由2020年诺贝尔化学奖得主Jennifer Doudna博士联合创建的生物技术公司，致力于利用CRISPR基因编辑技术，通过在体内和体外进行基因编辑开发创新疗法。去年11月，该公司的在研基因编辑疗法NTLA-2
LITMUS38i载体载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS38i载体载体基本信息载体名称LITMUS38i载体抗性Ampicillin载体长度2814 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number克隆方法Enzym
pTrcHis2 B载体载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis2 B载体载体基本信息载体名称pTrcHis2 B载体抗性Ampicillin载体长度4404 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis2 B载体质粒图
M13噬菌体衍生载体的制备实验——载体衍生法
M13噬菌体是一种丝状噬菌体，感染宿主后不裂解细菌细胞，只利用细胞内物质完成自身增殖，组装成完整病毒颗粒后被宿主细胞分泌而出，宿主细胞仍能继续生长分裂。为分子生物学中理想的质粒载体。基因间隔区的有些核苷酸序列即使发生突变、缺失活插入外源DNA片段，也不会影响M13DNA的复制，这为M13DNA构建克
综述|mRNA疫苗设计创新和载体开发
前言 疫苗是预防传染性疾病传播的最有效的公共卫生干预措施。成功的疫苗接种根除了许多威胁生命的疾病，如天花和脊髓灰质炎，世界卫生组织估计疫苗每年可防止200-300万人死于破伤风、百日咳、流感和麻疹。然而，尽管常规疫苗取得了明显的成功，但它们并不能有效对付疟原虫、丙型肝炎和HIV等逃避免疫监视的
《自然》：“加热”恶性胸腔积液，辅助免疫治疗！
恶性胸腔积液（MPE）是晚期肿瘤的常见表现之一，以非小细胞肺癌（NSCLC，36%）、乳腺癌（26%）和淋巴瘤（13%）最为常见。MPE会引起患者咳嗽、胸痛、呼吸困难和乏力等症状，严重影响患者的生活质量和预后，有研究表明，MPE患者的中位生存期仅为5个月。 MPE的传统治疗方法主要以缓解呼吸困
痘苗载体转染细胞实验
CaCl2 法 DOTAP 法 实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质
[运]载体DNA的定义
中文名称[运]载体DNA英文名称carrier DNA定 义在通过转化或转染将外源DNA导入细胞时所用的起辅助作用的DNA。如鲑鱼精子DNA。运载DNA的存在可以增加转化或转染的效率。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
什么是离子载体？
离子载体（ionophore）是一些能够极大提高膜对某些离子通透性的载体分子。
亲和色谱的载体选择
用于亲和色谱的理想载体应具有下列特性：⑴不溶性：不溶于水；⑵渗透性：疏松网状结构，容许大分子自由通过；⑶有一定硬度，最好为均一的珠状；⑷具有大量可供反应的化学基团，能与大量配基共价连接；⑸非特异性吸附能力极低；⑹能抗微生物和酶的侵蚀；⑺有较好的化学稳定性；⑻亲水性。选择配基根据对纯化大分子的特异性的
克隆载体的准备实验
试剂、试剂盒 氯仿-异戊醇 酚：氯仿-异戊醇（25:24:1) 氯化锂 (LiCl 10mol L) 酚（Tris-饱和） TE 缓冲液
基因载体的相关介绍
基因载体本身是DNA,除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外，还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体(temperature sensitive vector)、融合型表达载体、非融合型表达载等。 基因载体(vector) 的作用是运载目的
什么是离子载体？
离子载体（ionophore）是一些能够极大提高膜对某些离子通透性的载体分子。
siRNA表达载体的构建
siRNA表达载体构建可应用于：（1）作为后基因组时代基因功能分析的有力工具；（2）基因组学、细胞信号传导通路分析；（3）药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法原理多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RN
克隆载体的准备实验
试剂、试剂盒 氯仿-异戊醇酚：氯仿-异戊醇（25:24:1)氯化锂 (LiCl10mol L)酚（Tris-饱和）TE 缓冲液乙醇碱性磷酸酶平末端限制性内切酶和反应缓冲液克隆载体仪器、耗材 水浴锅真空干燥机 琼脂糖凝胶电泳设备和试剂实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿-异戊醇（24:1)酚
腺病毒载体综述-2
其他疗法 随着高龄人口的增加，对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒，因其可以感染有丝分裂后的细胞，同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区（immunologically privileged site）中的低病原性，因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。
酵母质粒载体的特点
酵母质粒载体既可以在大肠杆菌复制与扩增、又可以在酵母系统中复制与扩增,故此类载体又称为穿梭载体(shuttlevector)。 在基因工程中,应用上述病毒表达载体在哺乳动物细胞中进行中、小规模的表达是十分实际的。还要有对组织培养技术十分熟悉的前提。但病毒载体的运用仍然存在技术较难、耗时间和不经