北京生科院最新研究进展
4月12日，中国科学院北京生命科学研究院赵方庆团队在《自然-实验手册》（Nature Protocols）上，发表了题为Full-length circular RNA profiling by nanopore sequencing with CIRI-long的研究论文，建立了环形RNA全长转录本解析和高效挖掘的技术体系。 近年的研究表明，环形RNA在真核生物体内具有广泛的生物学功能。环形RNA序列与线性RNA相似度高，因此如何高效鉴定环形RNA特有的外显子结构，是环形RNA研究中的重要问题。针对这一问题，赵方庆团队前期提出了CIRI-AS算法（基于BSJ读段对比结果对环形RNA内部可变剪接结构进行识别）。后续研究开发了CIRI-full算法（通过识别双端250bp测序数据中反向重叠区特征，对500bp以内的环形RNA进行全长重构）。由于上述方法主要基于短读长测序技术，难以对长度500bp以上的环形RNA的全长......阅读全文
什么是免疫PCR(immunoPCR)？
1.定义：免疫-PCR(immuno-PCR)它利用抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性来检测抗原，尤其适用于极微量抗原的检测。是新近建立的一种灵敏、特异的抗原检测系统。主要步骤有三个:①抗原-抗体反应，②与嵌合连接分子结合，③PCR扩增嵌合连接分子中的DNA(一般为质粒DNA)。 2
反向PCR－（inversePCR）实验步骤
inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。基本步骤如下：1、反向PCR（Inverse PCR）原理：反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适
PCR技术（六）：PCR技术应用进展
PCR技术自1985年建立以来，发展之迅速、应用之广泛，表明其具有强大的生命力.近些年来，基于PCR的基本原理，许多学者充分发挥创造性思维，对PCR技术进行研究和改进，使PCR技术得到了进上步地完善，并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术 原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应，它结
PCR技术（七）：mRNA差异PCR技术
生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因，而主 基因在某个特定的细胞中，只有占15％的一小部分表达。而且在不同的细胞中，选择性表达的基础也是不同的。正是这些基因的选择不同决定了整个生命的过程：如细胞的生长分化，激素和细胞困子对细胞的作用、
间接原位PCR（原位杂交PCR）
与直接原位PCR所不同的是，靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入，而是标记一段与扩增片段互补的探针，在扩增结束后，应用此探针进行原位杂交。因此，此处主要介绍原位杂交，其余方法同原位PCR。一、预杂交1. 试剂与配制2×SSC50%去离子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）预杂交液：2×SSC，5%硫酸葡
Real－Time－PCR—Cycleave－PCR法原理
■ CycleavePCR法原理 CycleavePCR法是由RNA和DNA构成的杂合Cycling 探针与RNase H组合使用的高灵敏度检测方法，能够高效率地检出目的基因。Cycling 探针内部夹有RNA部分，5′端标记荧光物质，3′端标记淬灭物质，当探针处于完整状态时，由于荧光淬灭作
反向PCR－（inversePCR）实验步骤
inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。基本步骤如下：1、反向PCR（Inverse PCR）原理：反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适
PCR技术（四）：PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由
逆转录PCR(RTPCR)
实验四 逆转录PCR (RT-PCR )【实验目的】1．了解用逆转录PCR 法获取目的基因的原理。2．学习和掌握逆转录PCR 的技术和方法。【实验原理】聚合酶链式反应（PCR）过程利用模板变性，引物退火和引物延伸的多个循环来扩增DNA序列。因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板，是一个指数增长的
临床化学检查方法介绍鼠红细胞花环形成试验介绍
鼠红细胞花环形成试验介绍： B淋巴细胞与抗体合成有关，是体液免疫反应的效应细胞。B细胞表面带有膜表面免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体及补体受体等。它可与抗原抗体复合物的Fc段牢固结合。选用鸡或羊红细胞，用相应的抗红细胞抗体致敏成EA复合物，B细胞的Fc受体能与EA结合形成花环，称EA花环。如果EA
环形全息复制衍射光栅技术助NASA发现冥王星冰山
分析测试百科网讯 2015年7月14日，“新视野”号探测器飞过冥王星并发回冥王星及其卫星Charon的照片，照片揭示了他们的地质、表面和大气信息。山脉的照片显示这种地质活动发生在不到1亿年前。冰一氧化碳、甲烷、氮气均被检测到。冥王星的大气层主要由氮气组成。然而，虽然冥王星的质量很小
鼠红细胞花环形成试验的临床意义是什么
慢性淋巴细胞白血病患者外周血液的ME花环百分率高达60%-80%，而无丙种球蛋白血症、严重联合型免疫缺陷等，ME花环百分率减低或缺如。
环形正负电子对撞机产业促进会成立
环形正负电子对撞机-超级质子质子对撞机（CEPC-SppC）项目是我国高能物理学界于2012年提出的面向未来的大型粒子对撞机项目。几年来，随着该项目概念设计和关键技术预研的深入，越来越多的企业参与到项目当中。 为了更有效地推进项目进展，协调相关技术的前期预研，组织联合攻关突破关键技术，并加速
酶催化八元氧杂桥环形成机制研究获进展
中国科学院深圳先进技术研究院研究员周佳海与上海有机化学研究所研究员唐功利课题组等合作，在《自然-催化》（Nature Catalysis）上，在线发表了题为Enzymatic catalysis favours eight-membered over five-membered ring clo
T细胞花环形成试验的注意事项及相关疾病
注意事项 一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 3、抽血时 应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难； 有晕血史者请提前说明
桥小脑角区纤维型脑膜瘤环形强化病例分析
脑膜瘤为颅内常见的肿瘤之一，缓慢生长，起源于脑内脑膜或脊髓及脑表面的脑膜层，约占颅内原发性肿瘤的11.1%～33.8%，可发生于颅内任何部位，好发生于蛛网膜颗粒与蛛网膜绒毛处。 纤维型脑膜瘤也称为纤维母细胞型脑膜瘤，是第二常见的脑膜瘤亚型，最常见于脑室内，属于WHOⅠ级，预后较好。纤维型脑膜增强扫
可否用一个与非门组成环形振荡器
单个与非门也可以构成振荡器，不过由于产生信号的频率极高，一般情况下不使用。如图，当与非门输入端为高电平时，输出为低电平，电流通过R1、C1，从输入端流到输出端，使得输入端电容C2放电，电压减小，当C1电压小于输入低电平的门限电压时，输出端反转变成高电平，继而通过R1、C1向输入端放电，C1电压不断升
胶粘带环形法初粘性测试标准介绍以及试验步骤
测试标准：《GB/T 31125-2014 胶粘带初粘性试验方法 环形法》胶粘带环形初粘力，是以一定速度将环形胶粘带材料（胶面向外）与一定面积的标准试验板接触后的分离力。这是我国以及欧美国家广泛使用是初粘力评价指标之一。标准规定了用环形法测定胶粘带初粘性的试验方法。适用于胶粘带初粘性的测定，可用于产
免疫学实验E玫瑰花环形成试验介绍
E-玫瑰花环形成试验介绍： 本试验主要用于检测外周血的B淋巴细胞的百分率，有助于了解免疫缺乏疾病、淋巴细胞增生性疾病、某些感染和组织器官移植时人体免疫状况，以及判断这类疾病的预后，作出病因诊断和疗效观察。 E-玫瑰花环形成试验正常值： 0.40-0.70 (40%-70%) E-玫瑰花
一步法Crystal－RT数字PCR（Crystal－RTdPCR）直接进行RNA绝对...
一步法Crystal RT-数字PCR（Crystal RT-dPCR）直接进行RNA绝对定量检测一步法反转录-PCR（RT-PCR）广泛用于RNA分析，如基因组表达、病毒检测，从生命科学研究到诊断的许多领域，都有所应用。一步法Crystal RT-数字PCR实现了直接对RNA样本进行多重靶
安捷伦完成SARSCoV2－RNA体外诊断试剂盒qRTPCR的CEIVD注册
试剂盒扩展了安捷伦用于COVID-19检测的产品系列 2021年3月9日，北京——安捷伦科技公司（纽约证交所：A）今日宣布推出用于检测 SARS-CoV-2 RNA 的实时逆转录（qRT）PCR诊断试剂盒。CE-IVD标志符合欧盟体外诊断指令98/79/EC，可立即发布。 Agilent S
Access－RTPCR系统问题解答
1)什么是Access RT-PCR？2)什么是Access RT-PCR系统？3)总RNA能否作为模板，是否一定需要 poly(A)+RNA?4)使用Access RT-PCR系统需要的RNA的量是多少？5)同一般常用方法相比较，Access RT-PCR系统有哪些优点？6)使用Access RT
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变
免疫PCR(ImmunoPCR)概念、组成和免疫PCR产物的检测
（一） 免疫PCR技术的概念免疫PCR是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上，再用PCR方法将这段DNA扩增，然后用常规方法检测PCR产物。免疫PCR集PCR的高灵敏度与抗体和抗原反应的特异性于一体。其突出的特点是指数级的扩增效率带来了极高的敏感度，能检出浓度低至2ｎｇ
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变温
普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析（二）
模板 DNA 量越多，荧光达到域值的循环数越少，即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，根据样品 Ct 值，就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是最大变温速度
普通－PCR、实时荧光定量－PCR－和数字－PCR－对比分析（一）
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR，由于该酶不
PCR疑难解答终点PCR及相关PCR反应的分类
1.PCR的概念 PCR，即聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR），主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成：即模板DNA先经高温变性为单链，在DNA聚合酶和适宜的温度下，两条引物分别与两条模板DNA链上的一段互
知晓PCR，定量PCR与数字PCR的实验方法与选择
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将PC