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生物素标记蛋白操作方法

1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。 2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中,加入足够量浓度的生物素,一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数,对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍,或者该试剂也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中 3. 室温30分钟,或冰上放置2小时。 4. 用30 ml PBS预洗纯化柱,上样,加入与欲收集量相同的缓冲液,收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。 5. 以280 nm 的吸收值测定蛋白含量。 6. 生物素化的蛋白4℃存放至使用,可加入叠氮钠、甘油等保存。 HABA法检测生物素标记效果 试剂配......阅读全文

生物素标记蛋白操作方法

下面的操作方法可以使约3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合,对某些蛋白来说,生物素与蛋白的分子比可根据不同的生物素化要求进行调整。1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或

生物素标记蛋白操作方法

1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。  2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg

生物素标记蛋白操作方法

下面的操作方法可以使约3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合,对某些蛋白来说,生物素与蛋白的分子比可根据不同的生物素化要求进行调整。 1.   溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS

如何使用生物素标记抗体或蛋白?

生物素,是一个分子量只有244.31Da的小分子,经活化后可与蛋白、抗体等生物大分子结合,不仅可以很好地保持大分子的生物活性,而且与亲和素结合使用时具有多级放大作用,使其广泛应用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究。那么如何使用生物素标记抗体或蛋白呢?下面给大家分享一下。工具/原料• 10u

抗体的生物素化标记

本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应)0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液,pH

抗体的生物素化标记

本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应) 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液

生物素亲和素标记缺点

灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异

常用标记RNA的生物素有哪些?

用生物素标记RNA的方法常见的是用生物素与UTP结合形成Biotin-UTP,以Biotin-UTPATP、CTP、GTP为底物通过RNA聚合酶SP6、T7等经体外转录合成标记RNA。

抗生物素蛋白-生物素染色

中文名称抗生物素蛋白-生物素染色英文名称avidinbiotin staining定  义通过标记抗生物素蛋白与生物素高亲和性结合,检测大分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

抗生物素蛋白-生物素染色方法介绍

中文名称抗生物素蛋白-生物素染色英文名称avidinbiotin staining定  义通过标记抗生物素蛋白与生物素高亲和性结合,检测大分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

抗体的生物素化标记的方法介绍

本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应)0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液,pH

抗生物素蛋白介绍

抗生物素蛋白存在于卵白中的一种碱性糖蛋白,在生蛋清里可以找到还有大量的抗生素蛋白,与生物素(维生素B7)结合可使其难以被人体吸收。

生物素-抗生物素蛋白系统的方法介绍

中文名称生物素-抗生物素蛋白系统英文名称biotinavidin system定  义利用生物素与待检测的示踪分子(如核苷酸、多肽等)或能与待检测物质结合的分子(如抗体等)相连接,再以抗生物素蛋白与易于检测的分子(如荧光素、能催化成色反应的酶等)相连接,分析生物体内微量物质的检测系统。应用学科生物化

抗生物素蛋白-生物素染色的方法介绍

中文名称抗生物素蛋白-生物素染色英文名称avidinbiotin staining定  义通过标记抗生物素蛋白与生物素高亲和性结合,检测大分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验

检测未知抗原 检测未知抗体             实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验

实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB)

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术,20世纪80年代开始采用。基本试剂:① 第一抗体;② 生物素化第二抗体;③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法:1. 将固定后的标本用PBS漂洗;2. 于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过

抗生物素蛋白-生物素染色方法的功能介绍

中文名称抗生物素蛋白-生物素染色英文名称avidinbiotin staining定  义通过标记抗生物素蛋白与生物素高亲和性结合,检测大分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

抗生物素蛋白分布介绍

存在于卵白中的碱性糖蛋白,因它贪婪地(avidly)与生物素结合,故有此名(avidin)。给动物以生的卵白则产生生物素缺乏症,因为生物素蛋白与生物素结合,使之失活。分子量为68300,含4个亚单位。在体外(试管中)对含生物素的酶具有特异的抑制作用。

常用DAN探针制备的方法介绍--光敏生物素标记

光敏生物素标记(photobiotin labeling)是Forster(1985)等报道的核酸探针制备方法。光敏生物素是一种可用光照活化的生物素衍生物,它的乙酸盐很容易溶于水,在水溶液中将光敏生物素乙酸盐与需要标记的核酸混合,用强的可见光照射,就可将生物素标记在单链或双链的 DNA 或 RNA

ATP酶钙离子转运蛋白PMCA3抗体的生物素化标记实验要点

ATP酶钙离子转运蛋白PMCA3抗体的生物素化标记实验要点:1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析;2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同

生物素-链霉抗生物素蛋白系统的方法介绍

中文名称生物素-链霉抗生物素蛋白系统英文名称biotin streptavidin system定  义利用生物素与链霉抗生物素蛋白有很高亲和结合能力设计的检测分析系统。与生物素-抗生物素蛋白系统相似,但链霉抗生物素蛋白表面所带正电荷少,且不含糖基,在实验中非特异性结合远低于抗生物素蛋白。应用学科生

PCR法DNA探针生物素标记试剂盒产品说明

PCR法DNA探针生物素标记试剂盒产品特点:一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验

抗生物素蛋白的物质特点

在生蛋清里,含有大量抗生物素蛋白,与生物素结合可使其难以被人体吸收,所以,经常吃生蛋清会导致生物素缺乏,出现人体消瘦、皮炎、脱毛、神经过敏等病症。

抗生物素蛋白的分布情况

存在于卵白中的碱性糖蛋白,因它贪婪地(avidly)与生物素结合,故有此名(avidin)。给动物以生的卵白则产生生物素缺乏症,因为生物素蛋白与生物素结合,使之失活。分子量为68300,含4个亚单位。在体外(试管中)对含生物素的酶具有特异的抑制作用。

抗生物素蛋白的物质特点

在生蛋清里,含有大量抗生物素蛋白,与生物素结合可使其难以被人体吸收。所以,经常吃生蛋清会导致生物素缺乏,出现人体消瘦、皮炎、脱毛、神经过敏等病症。

抗生物素蛋白的分布情况

存在于卵白中的碱性糖蛋白,因它贪婪地(avidly)与生物素结合,故有此名(avidin)。给动物以生的卵白则产生生物素缺乏症,因为生物素蛋白与生物素结合,使之失活。分子量为68300,含4个亚单位。在体外(试管中)对含生物素的酶具有特异的抑制作用。

抗生物素蛋白的物质特点

在生蛋清里,含有大量抗生物素蛋白,与生物素结合可使其难以被人体吸收,所以,经常吃生蛋清会导致生物素缺乏,出现人体消瘦、皮炎、脱毛、神经过敏等病症。

抗生物素蛋白的物质特点

在生蛋清里,含有大量抗生物素蛋白,与生物素结合可使其难以被人体吸收,所以,经常吃生蛋清会导致生物素缺乏,出现人体消瘦、皮炎、脱毛、神经过敏等病症。

抗生物素蛋白的功能介绍

抗生物素蛋白存在于卵白中的一种碱性糖蛋白,在生蛋清里可以找到还有大量的抗生素蛋白,与生物素(维生素B7)结合可使其难以被人体吸收。