关于黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附法检测分析步骤介绍

(1)样品处理 牛奶样品:将50ml含脂牛奶降温至10℃以下,3500r/min离心10min,用吸管吸弃上层脂肪层,取下层牛奶液 作为待测液。奶粉样品:称取5g奶粉于100ml三角瓶中,加入50ml蒸馏水振摇5~10min混匀,以下步骤同上述牛奶样品处理方法。 (2)试剂准备 抗体:将小分子量的AFM1通过化学合成偶联一高分子量的蛋白(BSA,OV,KLH等),制备完全抗原,然后免疫家兔2~3个月,期间加强免疫3~5次,最后从家兔血液中提取抗AFM1的免疫球蛋白(即多克隆抗体)。 酶标抗原:将AFM1通过化学合成,在“桥连剂”的作用下结合上酶蛋白(常用辣根过氧化物酶),经提纯后冷冻干燥得到AFM1酶结合物。 (3)检测 将抗AFM1抗体包被于微孔板上,4 ℃过夜,封闭;每孔中加入AFM1标准溶液或样品待测液,然后加入AFM1酶结合物,37℃反应30min;洗板后每孔中加入酶基质和显色剂,37℃显色15min;目......阅读全文

关于黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附法检测分析步骤介绍

  (1)样品处理  牛奶样品:将50ml含脂牛奶降温至10℃以下,3500r/min离心10min,用吸管吸弃上层脂肪层,取下层牛奶液 作为待测液。奶粉样品:称取5g奶粉于100ml三角瓶中,加入50ml蒸馏水振摇5~10min混匀,以下步骤同上述牛奶样品处理方法。  (2)试剂准备  抗体:将小

关于黄曲霉毒素M1的薄层色谱法检测分析步骤介绍

  (1)AFM1标准溶液的配制  用三氯甲烷配制10μg/mL的AFM1标准溶液,用紫外分光光度计在357nm波长AFM1标准溶液的准确浓度(AFM1的摩尔消光系数为19950),避光4℃保存备用。  (2)样品提取  液体样品直接加入甲醇振荡过滤得提取液,固体样品粉碎过筛或研磨混匀后,用一定比例

检测黄曲霉毒素M1的酶联免疫吸附法原理介绍

  该方法结合了抗原抗体的特异性免疫反应和酶的高效催化显色反应。首先将抗AFM1抗体包被于固相的聚乙烯微孔上,加入作为抗原的AFM1标准品或含AFM1的样品,同时加入AFM1酶结合物,与抗体进行免疫竞争反应,然后加入酶基质:显色剂进行显色,通过标准品孔、样品孔的颜色深浅来确定样品中AFM1的含量。

关于黄曲霉毒素M1的高效液相色谱法检测分析步骤介绍

  (1)AFM1标准溶液的配制   先用乙腈配制2000μg/mL的AFM1标准溶液,再用苯-乙腈(9:1)溶液配制成0.5μg/mL的AFM1标准浓度工作液,可用紫外分光光度计校正浓度(AFM1在乙腈中的摩尔消光系数为19850)。   (2)色谱条件   色谱柱:含球形的5μm颗粒大小的

检测黄曲霉毒素M1的免疫亲和柱法分析步骤介绍

  (1)样品预处理  液体牛乳及牛乳制品,取50mL样品,加入1.0gNaCl,4000r/min离心10min,移取下层(上层脂肪层),用玻璃 纤维滤纸过滤备用。固体奶粉及制品,称取5.0g样品,用50mL130℃~ 60℃热去离子水溶解混匀,以下同液体牛乳预处理方法。  (2)柱净化  先将免

关于黄曲霉毒素M1的薄层色谱法检测原理介绍

  样品经提取、浓缩、薄层分离后,AFM1在波长365nm的紫外光下产生蓝紫色荧光,根据其在薄层板上显示荧光的最低检出量与标准溶液的荧光强度相比较来测定含量。

黄曲霉毒素的酶联免疫吸附法检测

  酶联免疫吸附法(ELISA)是抗原(或抗体)吸附剂和用酶标记的抗体(或抗原)与标本中的待测物(抗原和抗体)起特异的免疫学反应,用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度,是一种定性或半定量的方法。大致采用两种方法检测AF:一种是用双抗体夹心法;另一种是用竞争法。免疫吸附法测定的试剂盒及配套仪器、方法被

黄曲霉毒素M1的检测方法介绍

  (1)光光度计法  首先在激发波长360nm,发射波长450nm波长下进行荧光光度计的校准,绿色标定管为0,红色标定管 为2.0,黄色标定管为1.0±0.2,然后于50mL AFM1显阴性的样品中添加AFM1系列标准溶液(浓度分别为0、0.1、0.5、1.0μg/L)按上述分析步骤进行分离纯化得

检测黄曲霉毒素M1的免疫亲和柱法原理介绍

  试样经过离心、脱脂、过滤后,滤液经过键合有AFM1特异性单克隆抗体的免疫亲和柱净化,AFM1被柱吸附,先用某一溶剂洗涤杂质,再用洗脱液将AFM1洗下,得到较纯的AFM1洗脱液,最后结合荧光光度计或高效液相色谱仪进行AFM1含量的测定。

关于黄曲霉毒素M1的简介

  黄曲霉毒素M1(AFM1),是一种有机化合物,化学式为C17H12O7,主要用于新陈代谢和致癌性的研究。   2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,黄曲霉毒素M1在2B类致癌物清单中。

简述黄曲霉毒素M1的高效液相色谱法检测分析原理

  用C18柱抽提纯化样品中的AFM1,乙醚对C18柱洗涤,再用CH2Cl2-乙醇洗脱AFM1,然后加入三氟乙酸(TFA)对AFM1进行衍生化处理,利用液相色谱荧光检测器检测,并与标准AFM1-TFA的衍生物比较,进行定性、定量分析。

关于黄曲霉毒素M1的分子结构介绍

  摩尔折射率:77.57  摩尔体积(cm3/mol):196.7  等张比容(90.2K):589.9  表面张力(dyne/cm):80.8  极化率(10-24cm3):30.75

酶联免疫吸附法检测黄曲霉的介绍

  1996年,nakane 建立了辣根过氧化物酶标记抗体的测定技术.由于该方法简便,敏感,特异,可作为多种抗原或抗体的测定,20世纪70年代后期,该方法引入真菌毒素的检测中,下面介绍的是竞争性酶联免疫吸附间接法检测黄曲霉毒素b1.  原理:将已知抗原吸附在固态载体表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗

薄层分析法检测黄曲霉毒素的介绍

  TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的

薄层分析法检测黄曲霉毒素

  TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的

黄曲霉毒素M1检测标准操作程序

目的:建立黄曲霉毒素M1检测标准操作程序,并按规程进行检测,保证检测操作规范化。范围:适用于所有用黄曲霉毒素测定的供试品。责任:检验员、实验室负责人、实验室经理对本规程负责。正文:HPLC条件:色谱柱黄曲霉毒素专用C18柱,150*4.6mm,5um流动相乙腈-水(25:75)荧光检测器:激发波长3

迪马SPE法快速、低成本检测奶粉中黄曲霉毒素M1

  7月20日,广州市工商局在官网公布了近期对市面上乳制品及含乳食品的抽检结果。由湖南长沙亚华乳业有限公司生产的南山奶粉问题最为严重,5个批次的婴幼儿奶粉均检出含有黄曲霉毒素M1。值得注意的是,知名品牌光明奶油、本土沙湾姜汁撞奶均在不合格之列,爱馨多洋奶粉更是两月三登“黑榜”。   目前检测黄曲霉

紫外分析仪检测乳和乳粉中黄曲霉毒素M1

ICS 67.100.10X 04GB/T 18980-2003乳和乳粉中黄曲霉毒素M,的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和 荧 光 光 度 法Determination of aflatoxin M1 content in milk and milk powder-Cleanup by immu

黄曲霉毒素M1和B1-HPLC检测

根据2010年发布的“食品安全国家标准——乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定”以及2006年发布的“食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定-高效液相色谱法”两项国家标准,提供了相关的值得信赖的色谱耗材解决方案,供分析工作者选择。 1、仪器与设备: 固相萃取装置:Thermo H

黄曲霉毒素检测方法薄层分析法(TLC)

TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的试样

强致癌物质黄曲霉毒素M1检测(二)

免疫柱净化步骤:完全符合GB/T 18980-2003┅┅取出免疫亲和层析柱, 恢复至室温,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上。┅┅将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下。准确移取清澈液注入玻璃注射器;┅┅将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约2-3mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3

天美公司推出黄曲霉毒素M1的检测方法

  黄曲霉毒素M1 (Aflatoxin M1)属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种,黄曲霉毒素是一种强烈的致癌物,而且是曲霉菌等菌类的高毒代物,而黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢物,当奶牛被饲养被污染的饲料后,黄曲霉毒素B1通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1,进而污染牛奶。黄曲霉毒素M1

强致癌物质黄曲霉毒素M1检测(一)

针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业(眉山)和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明,反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量,在之前的相关食品卫生标准中有明确规定,其中:鲜乳及其乳制品(折算为鲜乳汁)不得超过0.5ug/

黄曲霉毒素M1柱CH09003

  华安麦科生物技术有限公司是国内首家将免疫亲和层析柱(IAC)系列产品化的公司   一、用途:    免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对黄曲霉毒素M1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素M1含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用

黄曲霉毒素M1柱CH09003

  华安麦科生物技术有限公司是国内首家将免疫亲和层析柱(IAC)系列产品化的公司   一、用途:    免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对黄曲霉毒素M1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素M1含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用

防不胜防的黄曲霉毒素M1

  被检测出黄曲霉素M1实测值为1.2μg/kg(微克/千克),国家规定的最高值为0.5μg/kg,蒙牛该批次产品超标140%。蒙牛该批次超标的产品为该集团眉山公司2011年10月18日生产的250ML/盒包装的纯牛奶产品。公另一款福建长富乳品有限公司生产的长富纯牛奶(精品奶)也被检出黄曲霉素M1不

科学家调查中国奶牛饲料及原奶中的黄曲霉毒素含量

  据sciencedirect数据库消息,2010年8月《食品控制》(Food Control)杂志刊登一项关于中国奶牛饲料及原奶中黄曲霉毒素含量的调查研究。   研究人员在中国十个主要牛奶产地的牧场中采集200件饲料样品及200件牛奶样品。使用高效液相色谱法检测饲料样品中的黄曲霉毒素B1、

黄曲霉毒素M1检测方案在生鲜乳质量安全监测中的应用

我国生鲜乳中真菌毒素黄曲霉毒素M1(以下简称“AFM1”)的风险评估监测是一项长期的工作,根据《乳品质量安全监督管理条例》规定,农业农村部畜牧兽医局组织开展《2020年生鲜乳质量安全监测计划》。针对生鲜乳中AFM1的检测,Pribolab依据GB 5009.24-2016特推出前处理耗材及仪器配置方

奶及奶制品中黄曲霉素M1检测

一、背景介绍黄曲霉毒素M1 (Aflatoxin M1)属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。物理化学性质相当稳定,不被巴氏消毒法破坏。哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食品后,通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。黄曲霉毒素M1危害主要表

黄曲霉毒素及其检测方法综合介绍(一)

一、黄曲霉毒素介绍黄曲霉毒素(aflatoxin,简称为 AF)是到目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素。它可通过多种途径污染食品和饲料,直接或间接进入人类食物链,威胁人类健康和生命安全,对人体及动物内脏器官尤其是肝脏损害严重,该毒素是黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物,普遍存在于霉变的粮食及粮食制