关于抗碱性磷酸酶复合物制备技术的简介
Mason等(1978),用碱性磷酸酶代替过氧化物酶,建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(APAAP)桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清,很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求,在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等(1989)利用抗AP的McAb建立了一种制备APAAP复合物的简便方法。只需将AP和抗AP的McAb以适当比例混合,4℃结合过夜即可使用。采用改良的ELISA方法检测APAAP复合中AP的最适含量。具体方法是:用羊抗鼠Ig包被微量滴定板;加入一定量的抗APMcAb;分别加入不同量的AP作用后经过洗涤;加底物显色,测定光密度值(OD)。在一定范围内,APAAP复合物溶液中AP含量增加的同时,相应的OD值也随之增大;当AP增加到一定量时(约6~8mg/mL)、OD值保持稳定。......阅读全文
关于抗碱性磷酸酶复合物制备技术的简介
Mason等(1978),用碱性磷酸酶代替过氧化物酶,建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(APAAP)桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清,很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求,在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等(1989)利用抗AP的McAb建立了一种制备
关于抗过氧化物复合物制备技术的简介
Stemberger(1970)等,首先报道了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(peroxidase-antiperoxidase,PAP)法,此法也称为非标记抗体酶法(unlabelled antibody enzymemethod)。PAP法不需用任何化学交联剂处理酶和抗体,二者活性不受化学反
碱性磷酸酶标抗体制备技术的简介
碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP),系小牛肠粘膜和大肠杆菌中提炼出来的一种磷酸酯的水解酶,由多个同功酶组成。从小牛肠粘膜提取的AP分子量为100kDa,酶作用的最适pH为9.6;从大肠杆菌中提取酶分子量为80kDa,最适pH为8.0。它的作用底物较多,常用的酶底物有对硝
简述抗过氧化物复合物制备技术的标记步骤
(1)取5mL抗HRP血清,16 000r/min 4℃离心20min,取上清液。 (2)加入1mL HRP(2mg/mL)溶液混匀,室温(20℃±)静置1h,16 000r/min,4℃离心20min,取沉淀物。 (3)加冷生理盐水反复洗涤-离心(16 000r/min,4℃离心20min
关于碱性磷酸酶的简介
碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同工酶 。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与
关于血清碱性磷酸酶的简介
碱性磷酸酶(ALP)属磷酸单酯水解酶,是一组特异的磷酸酯酶。该酶广泛分布于人体组织和体液,以骨、肝、乳腺、小肠、肾中含量较高,其大部分由骨细胞产生,小部分来自肝,经胆汁排入肠道。ALP测定方法主要是比色法和连续监测法。
关于制备茚三酮/纳米二氧化钛复合物的简介
茚三酮/纳米二氧化钛复合物的制备方法包括: 步骤1,配制前驱体溶液; 步骤2,利用抽滤将前驱体溶液通过经脱水处理的滤膜,使滤膜饱和吸附前驱体溶液; 步骤3,同样利用抽滤将茚三酮溶液通过滤膜,反应生成茚三酮/纳米二氧化钛复合物。所述复合物对氨基酸具有较好的显色灵敏度,可作为薄层层析板检测氨基
碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术
实验方法原理APAAP(Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique)技术的基本原理为:抗鼠IgG抗体作为桥梁,将鼠源性识别细胞抗原的第一抗体与鼠源性的抗碱性磷酸酶单克隆抗体-碱性磷酸酶复合物相连接,使之成为Ag,-Ab1-Ab2-
简述碱性磷酸酶标抗体制备技术的标记步骤
(1)取抗体(2~5mg/mL)1mL,加入AP 5mg溶解。 (2)装入透析袋,用0.01mol/L、Ph7.2PBS4℃透析18h,换液3次。 (3)加入2.5%戊二醛20uL,室温(20℃±)放置2h。4℃0.01mol/L、pH7.2PBS透析过夜,换液3次。 (4)移
关于低碱性磷酸酶血症的简介
低碱性磷酸酶血症(hypophosphatasia,HPP)是由TNSALP基因突变所致的一种罕见单基因遗传病。主要特征是骨化不全,乳牙早期脱落,血液及骨骼中的碱性磷酸酶(ALP)矛盾性减低。HPP可呈常染色体显性或隐性遗传。发病率1/10万,男女均可患病。发病与碱性磷酸酶基因突变有关。临床表现
关于抗利尿激素的简介
(ADH)抗利尿激素也叫加压素,抗利尿激素的第一个作用是管理肾脏的排尿量。肾脏内部有肾小球和肾小管,血液流经肾脏时先从肾小球滤过,把血液中的水分、葡萄糖、盐类和废物滤到肾小管中,肾小管很长,在流动过程中能选择性地重吸收对身体还有用的水分、葡萄糖及盐类等,最后仍末被吸收的部分就成为真正的尿液排到体
关于抗ENA抗体的简介
抗ENA抗体称盐水可提取性核抗原的抗体,是抗小分子细胞核核糖核蛋白(snRNPs)和小分子细胞浆核糖核蛋白(scRNPs)的自身抗体,不含组蛋白。主要有七种:抗Sm抗体 、抗SS-A/Ro抗体、抗SS-B/ La抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗U1-RNP抗体、抗r-RNP抗体。对结
关于抗Sm抗体的简介
抗Sm抗体属于抗核抗体的其中一种,其在系统性红斑狼疮病人血清中可被发现。抗Sm抗体是诊断系统性红斑狼疮的特异性抗体,且其与红斑狼疮是否处于活动期无关,故抗Sm抗体检测具有辅助诊断系统性红斑狼疮的意义。常用的抗Sm抗体检测方法有两种,分别为对流免疫电泳法或琼脂双扩散法和免疫印迹法,单用其中一种时检
关于抗磷脂抗体的简介
在系统性风湿性疾病的诊断中,抗磷脂抗体这个词包括多种特异性不同的自身抗体。靶抗原为带负电荷的阴离子磷脂,如心磷脂。它们在自身免疫性患者血清中的反应性需要辅助因子(β2-糖蛋白Ⅰ即载脂蛋白H)。抗磷脂抗体可以导致梅毒试验假阳性反应,即VDRL阳性或螺旋体特异性抗体试验阴性而心磷脂-补体固定实验阳性
碱性磷酸酶的简介
碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与A
免疫复合物的简介
免疫复合物是抗体与抗原结合所得到的一种复合物,是由各种免疫细胞、吞噬细菌,病毒,致敏物质共同死亡后结合而形成的,所以又称抗原--抗体复合物。 它在正常情况下,小分子可溶性免疫复合物被肾小球滤过排出,大分子不溶免疫复合物被巨噬细胞吞噬消灭,这是机体防御机制的一部分。但在某些情况下,抗原与抗体在体
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或
细胞表面标记的检测技术
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP(Al
细胞表面标记的检测技术
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP(Al
关于抗衰蛋白FN的简介
纤连蛋白,也称纤维连接蛋白,英文名称fibronectin(缩写FN),是1974年国外研究发现的一种高分子糖蛋白,具有多种生物学功能。FN广泛存在于动物组织和组织液中,是一种大分子糖蛋白,分子量约为450KD,具有多种生物活性。大量国内外的研究结果证明,FN分子在进化过程中保守性很强,各种动物
关于抗胃壁细胞抗体的简介
抗胃壁细胞抗体(PCA)由Taylor等首次于恶性贫血病人血清中发现,其靶抗原定位于壁细胞分泌小管微绒毛的膜内,是胞浆内的微粒体部分和胞质膜上的一种脂蛋白。PCA有器官特异性,不与胃以外的其他脏器反应,但无种属特异性,故可用大鼠或兔的胃壁细胞作抗原。PCA的Ig类别主要为IgG和IgA类(也有少
关于抗高血压药的简介
降压药(antihypertensive drugs) 又称抗高血压药。是一类能控制血压、用于治疗高血压的药物。 降压药主要通过影响交感神经系统、肾素-血管紧张素-醛固酮系统和内皮素系统等对血压的生理调节起重要作用的系统而发挥降压效应。
关于抗血小板抗体的简介
抗血小板抗体是一种自身抗体。自身抗体是指针对自身组织,器官、细胞及细胞成分的抗体。自身抗体由于对自身的组织器官识别,所以会攻击自身的组织器官,从而造成损害。正常人体血液中可以有低度的自身抗体,但不会发生疾病,但如果自身抗体的滴度超过某—水平,就可能对身体产生损伤,诱发疾病。 PA 抗血小板抗
关于抗心磷脂抗体的简介
抗心磷脂抗体(anti cardiolipin antibody,ACA)是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体,为抗磷脂抗体的一种,也是抗磷脂抗体综合征(anti-phospholipid syndrome,APS)的标志性抗体。常见于系统性红斑狼疮及其他自身免疫性疾
关于抗内膜抗体阳性的简介
抗子宫内膜抗体(EMAb),是以子宫内膜为靶抗原并引起一系列免疫反应的自身抗体。有报道表明在子宫内膜异位症及不育妇女血中抗子宫内膜抗体的阳性率比正常对照有显著性增高,其中在子宫内膜异位症血清中,EMAb的检出率可达70%-80%。当女性子宫内膜有炎症时,抗子宫内膜抗体可能转化成抗原或半抗原,刺激
关于抗角蛋白抗体的简介
类风湿关节炎(RA)是一种以侵蚀性关节炎为主要表现的全身性自身免疫性疾病,多数患者血清中可出现类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体、抗修饰型瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化纤维蛋白原抗体、抗角蛋白抗体和抗核周因子等多种自身抗体。1979年Young等发现RA血清中有一种能与鼠食管角质层反应的抗体,并对R
关于壳聚糖制备单糖的简介
甲壳素和壳聚糖主链水解制备单糖的主要途径是化学法。对甲壳素和壳聚糖进行水解得到的最终产物是D-氨基葡萄糖单糖,D氨基葡萄糖单糖具有刺激蛋白多糖合成、辅助治疗关节炎等功能。N-乙酰氨基葡萄糖具有免疫调节、促进双歧杆菌生长、改善肠道微生态环境、治疗和预防肠道疾病等功能。甲壳素用热的浓盐酸水解可得到D
外切体复合物的简介
外切体的核心是一个由六个亚基组成的环状结构,外围的亚基都结合在这一环状结构上。在真核细胞中,这一核心存在于细胞质和细胞核(特别是核仁)等细胞区室中;在不同的区室中,与之结合的蛋白质也不尽相同,从而可以调控外切体的活性以特异性地降解特定区室的RNA底物。外切体的底物包括信使RNA(mRNA)、核糖
抗肽抗体的制备
实验材料 抗体试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中,置于一个2 ml 的玻璃试管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室温下温和搅拌30 min。 2