关于抗碱性磷酸酶复合物制备技术的简介

Mason等(1978),用碱性磷酸酶代替过氧化物酶,建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(APAAP)桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清,很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求,在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等(1989)利用抗AP的McAb建立了一种制备APAAP复合物的简便方法。只需将AP和抗AP的McAb以适当比例混合,4℃结合过夜即可使用。采用改良的ELISA方法检测APAAP复合中AP的最适含量。具体方法是:用羊抗鼠Ig包被微量滴定板;加入一定量的抗APMcAb;分别加入不同量的AP作用后经过洗涤;加底物显色,测定光密度值(OD)。在一定范围内,APAAP复合物溶液中AP含量增加的同时,相应的OD值也随之增大;当AP增加到一定量时(约6~8mg/mL)、OD值保持稳定。......阅读全文

关于冻干技术的简介

  干燥是保持物质不致腐败变质的方法之一。干燥的方法许多,如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等。但这些干燥方法都是在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品,一般是体积缩小、质地变硬,有些物质发生了氧化,一些易挥发的成分大部分会损失掉,有些热敏性的物质,如蛋白质、维生素会发生变性。微生物会失去

关于基因转染技术的简介

  基因转染技术将特定的遗传信息传递到真核细胞 中,这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究,也推动了诊断和治疗方面的分子技术 发展,并使基因治疗 成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。

关于免疫酶技术的简介

  免疫酶技术(immunoenzymatic technique) 最早应用的免疫酶技术是免疫酶组织化学染色,即用标记的抗体与标本中的抗原发生特异性结合,当加入酶的底物时,在酶的作用下经一系列生化反应产生有色物质,借助光镜作出定位判断。目前,应用最广泛的是酶联免疫吸附试验(enzyme linke

关于图像分析技术的简介

  病理形态学的观察基本上是定性的,缺乏精确而更为客观的定量标准。图像分析技术(image analysis)的出现弥补了这个缺点。随着电子计算机技术的发展,形态定量技术已从二维空间向三维空间发展。在肿瘤病理方面图像分析主要应用于核形态参数的测定(区别癌前病变和癌;区别肿瘤的良恶性;肿瘤的组织病理分

关于PCR技术的历史简介

  Khorana (1971)等最早提出核酸体外扩增的设想:“经DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可合成tRNA基因。”  但由于当时基因序列分析方法尚未成熟,热稳定DNA聚合酶尚未报道以及引物合成的困难,这种想法似乎没有实际意义。加上70年代初分子克隆技术的

研究揭示Gabija复合物抗噬菌体侵染的分子机理

为了应对噬菌体的入侵,原核生物演化出多种精巧的免疫系统以实现自我保护。对原核生物免疫系统的深入研究催生了多种具有里程碑意义的分子生物学工具,包括在分子克隆实验中广泛应用的限制性核酸内切酶系统,以及在基因编辑领域中大放异彩的CRISPR-Cas系统等。然而,细菌和古菌基因组中还有一大批功能尚不明确的原

关于碱性磷酸酶的发现介绍

  碱性磷酸酶(alkaline phosphatase , EC 3 .1 .3 .1 ,AP)是非特异性磷酸单酯酶, 可以催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应, 生成无机磷酸和相应的醇、酚、糖等, 还可以催化磷酸基团的转移反应, 且大肠杆菌A P 还是一种依赖亚磷酸盐的氢化酶。AP 存在于除高等植物

制备色谱简介

(1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品

免疫组化中,一抗、二抗的制备方法

  ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。  (一) 原理  ELISA是以

关于辣根过氧化物酶标抗体制备技术的简介

  辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)广泛分布于植物中,因辣根中含量最高而得名,由无色酶蛋白和深棕色铁卟啉(辅基)构成一种糖蛋白(含糖18%)。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。  HRP分子量较小(40kDa),标记物容易穿透入细胞内部;作用底物为H2O

关于免疫复合物的相关介绍

  免疫复合物是抗体与抗原结合所得到的一种复合物,是由各种免疫细胞、吞噬细菌,病毒,致敏物质共同死亡后结合而形成的,所以又称抗原--抗体复合物。  它在正常情况下,小分子可溶性免疫复合物被肾小球滤过排出,大分子不溶免疫复合物被巨噬细胞吞噬消灭,这是机体防御机制的一部分。但在某些情况下,抗原与抗体在体

抗O试验的简介

  抗链球菌溶血素“O”试验  正常范围:ASO<400U  检查介绍:简称抗“0”或ASO试验。链球菌溶血素是溶血性链球菌的代谢产物之一。

抗红细胞抗体(溶血素)的制备

实验概要抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义,而且

抗红细胞抗体(溶血素)的制备

实验概要抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义,而且

关于果胶的制备方法膜分离技术的介绍

  膜技术(Membrane Technology)是用天然或人工合成的高分子薄膜,以外界能量或化学位差为推动力,对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。可用于液相和气相,对于液相分离,可用于水溶液体系、水溶胶体系以及非水溶液体系等。膜技术是一种分子水平上的分离技术。  近年来

关于DNA测序技术的测序凝胶板的制备

  一、玻璃板的处理  银染测序的玻璃板一定要非常清洁,一般先用温水和去污剂洗涤,再用去离子水冲洗玻璃板,除去残留的去污剂,最后用乙醇清洗玻璃板。玻璃板上遗留的去污剂微膜可能导致凝胶染色时背景偏高(棕色)。短玻璃板经粘合溶液处理可将凝胶化学交联于玻璃板上。这一步对于在银染操作过程中防止凝胶撕裂至关重

关于抗肝细胞膜抗原抗体(ALMA)的简介

  ALMA是非疾病特异性,它最常发生于病毒性及原发性自身免疫肝炎I型,在非肝病的患者,其发生率较低。ALMA为肝特异性抗体之一。ALMA常用间接免疫荧光法测定。 间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿

关于抗肾小球基底膜抗体测定的简介

  抗肾小球基底膜抗体测定:抗肾小球基底膜抗体是由肾小球毛细血管内外透明层及中间致密层构成的网状结构,以糖蛋白为主体。检测GBM抗体的最常用方法是以肾脏组织为抗原的IIF法(间接免疫荧光法),其荧光特点是在肾小球基底膜处显示典型的花瓣状、或斑点状、颗粒状着染。IIF法可出现假阳性结果。以胶原酶消化过

关于抗万古霉素肠球菌的简介

  抗万古霉素肠球菌(Vancomycin-Resistant Enterococcus,简称VRE),又名万古霉素抗药性肠球菌,是肠球菌属下的一种细菌,有着对万古霉素这种抗生素的抗药性。肠球菌是一种移生在肠道的革兰氏阳性球菌,故名肠球菌。在十九世纪末发现,早期归为链球菌属。在肠球菌属中,对人类有着

关于异位抗利尿激素(ADH)综合征的简介

  也叫抗利尿激素分泌异常综合征(SIADH)。能引起异位ADH分泌的肿瘤,最多见的为肺癌(约占40%),其他有胸腺、胰、十二指肠、食管和乳腺的恶性肿瘤。异位 ADH具有同精氨酸加压素相同的生物作用,刺激肾小管回吸收水分,因此病人主要表现为水中毒和稀释性低钠血症、低渗透压的症状,倦怠无力、头痛、厌食

关于抗人胸腺淋巴细胞球蛋白的简介

  适用于器官移植时的抗免疫排异治疗。用于人的同种异体移植有明显疗效,特别是对肾脏移植的病人。但也有一定局限性,主要是对急性排异期有效,对体液免疫所致的超急性排异无效。

关于抗利尿激素分泌不当综合征的简介

  抗利尿激素分泌不当综合征(syndrome of inappropriate secretion of antidiuretic hor-mone,SIADH)是由于抗利尿激素(ADH)分泌不按血浆渗透压等调节而异常增多,导致体内水潴留、稀释性低钠血症等一系列临床表现。

关于抗维生素D佝偻病的简介

  抗维生素D性佝偻病(vitaminD-resi-stantRickets)是一种肾小管遗传缺陷性疾病,发病率约1:25,000。有低血磷性和低血钙性两种。比较多见的是低血磷性抗维生素D佝偻病,又称家族性低磷血症(familialhypophosphatemia),或肾性低血磷性佝偻病(renal

关于抗可溶性肝抗原抗体(SLA)的简介

  抗可溶性肝抗原抗体是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清学标记,对于自身免疫性肝炎的诊断和鉴别诊断均具有重要价值。一般用间接免疫荧光法测定。 间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗

关于抗弹性蛋白酶抗体检测的简介

  弹性蛋自酶是炎症过程中由分叶核中性粒细胞分泌的一种蛋白酶,此抗体检测阳性提示体内炎症存在。抗弹性蛋白酶抗体是一类中性粒细胞抗体,类似髓过氧化物酶抗体,在间接免疫荧光检测中呈核周荧光结构(pANCA)。  抗弹性蛋白酶抗体检测的临床意义:人白细胞抗弹性蛋白酶抗体检测阳性见于系统性红斑狼疮、原发性胆

关于抗肝肾微粒体抗体测定的简介

  1973年Rizzetto首次用间接免疫荧光技术在一些慢性肝炎患者中发现抗肝/肾微粒体抗体(抗-LKM),这些抗体能与肝细胞质、近端肾小管起反应。而原发性胆汁性肝硬化的抗线粒体抗体可使远端肾小管着染。随后鉴定出LKM抗体有3种亚型,LKM-1是Ⅱ型自身免疫性肝炎的血清学标志,LKM-2只出现于由

关于抗线粒体M2型抗体测定的简介

  抗线粒体抗体(AMA)是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,也见于其他自身免疫性疾病患者。线粒体抗原位于真核细胞线粒体膜内,抗原成分为2一氧酸脱氢酶复合体的亚单位,为一组自身抗原。AMA靶抗原分为9型(M1~M9)。M2是原发性胆汁性肝硬化患者血清中与AMA反应的主要成分。

关于抗磷脂酶A2受体抗体的简介

  肾小球足细胞上的磷脂酶A2受体是特发性膜性肾病的主要抗原,循环抗磷脂酶A2受体抗体与肾小球上的磷脂酶A2受体抗原结合成为原位免疫复合物,激活补体导致足细胞损伤,致使尿蛋白产生。

关于三环类抗忧郁药中毒的简介

  本类药物国内已有阿米替林(amitriptyline)、丙咪嗪(imipramine)、多塞平(doxepine)等,主要用以对抗情绪低落、抑郁消极及解除抑制。抗抑郁药主要作用于间脑(特别是下丘脑)及边缘系统,在这个被称为情绪中枢的部位,发挥调整作用。三环类抗抑郁药能阻止生物胺回收,产生抗抑郁作

关于薄层层析法的简介和制备过程介绍

  一、简介  薄层层析法以吸附层析使用最为普遍。常用的吸附剂为硅胶、氧化铝等。薄层层析和其他层析法一样,除吸附法外,也可进行分配、离子交换、分子排阻等机理的层析,即将铺制薄层的材料相应换为涂以固定相的载体、离子交换剂、凝胶等,其操作与吸附法基本相同。  二、过程  制板  铺制薄层板时,要求基底板